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商品介绍
测定意义 线粒体是半自主性细胞器,不仅是细胞内氧化磷酸化和合成三磷酸腺苷(ATP)的主要场所,为细胞的活动提供能量,而且在许多生命活动中具有重要调控作用。因此,准确和全面分离保持正常活性的线粒体已经成为许多研究的前提。 测定原理: 利用专门试剂温和匀浆组织和细胞,再采用差速离心法从匀浆中分离完整线粒体;利用专门试剂,配合超声波破碎线粒体,可以得到保持活性的线粒体酶。 需自备的仪器和用品: 超声波破碎仪、台式离心机、可调式移液器、研钵、冰和蒸馏水。 |
试剂的组成和配制:
提取液:液体 100mL×1 瓶,4℃保存;
试剂一:液体 5mL×1 瓶,4℃保存;
试剂二:液体 200μL×1 支,4℃保存;
试剂三:液体 4mL×1 瓶,4℃保存;
试剂四:粉剂×2 瓶,4℃保存。
【友情提示】:本产品仅供科研研究使用,不得用于人体临床直接检测。避免给您带来不必要的损失,请仔细阅读购买说明!
产品名称 | 规格 | 检测方法 | 货号 |
50管/48样 | 差速离心法 | GOY-01S6569 |
所需的仪器和用品:
可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿(光径 1cm)、低温离心机、移液器、研钵、冰和蒸馏水
四、超氧化物歧化酶(SOD)的测定:
建议正式实验前选取 2 个样本做预测定,了解本批样品情况,熟悉实验流程,避免实验
样本和试剂浪费!
1、样本制备
① 组织样本:
取约 0.1g 组织(水分充足的样本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4ºC 或冰浴进行
匀浆(或使用各类常见匀浆器)。4ºC×12000rpm 离心 10min,取上清作为待测液。
【注】:若增加样本量,可按照组织质量(g):提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例进行提取
② 细菌/细胞样本:
先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;取约 500 万细菌或细胞加入 1mL
提取液,超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率 200W,超声 3s,间隔 10s,重复 30 次);
12000rpm 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。
【注】:若增加样本量,可按照细菌/细胞数量(10
4):提取液(mL)为 500~1000:1 的比例进行提取。 ③ 液体样本:直接检测;若浑浊,离心后取上清检测。
注意事项:
1、试剂二为酶,不可冷冻,使用时在冰上放置。
2、对照管只需要做一管。
3、若对照管吸光值大于 1,建议将试剂二用蒸馏水稀释 7 倍后使用(10μL 试剂二原液+60μL蒸馏水)。
4、SOD为什么有的样本测定管大于对照管,对照管数值在什么范围?对照管的范围是 0.4-1。对照管吸光值过低可能是(1)试剂二或试剂四没有现配现用;
(2)没有按顺序加试剂;(3)反应时间不够,可以延长反应时间(反应时间 30min可以延长到 40min)。对照管吸光值过高可能是试剂二未按操作说明书稀释相应倍数。
若出现测定管大于对照管,可能是样本中杂质的影响太大,为了降低杂质的影响一般
将样本提取上清液用蒸馏水或提取液稀释 10倍后再测,通常可以使测定正常。
测定步骤:
1、 酶标仪预热30min以上,调节波长至450nm。
2、 试剂三的稀释:将试剂三用蒸馏水稀释50倍,用多少配多少。(试剂三和蒸馏水1:49稀释。
3、 工作液配制:在试剂一加入100μl试剂二,充分混匀。配好的试剂4℃避光可保存一周。(若一次性测定样本较少,可按照实际用量将试剂一和试剂二按照20ml:0.1ml的比例混匀配制)
4、 将一瓶试剂四用5ml蒸馏水溶解(溶解后一周内用完)。
5、 样本测定(在96孔板中依次加入下列试剂)
选择抗凝的注意点:
①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致;
②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;
③、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.4~0.5ml血浆);
④、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后用于测定。
Anti-Tubulin- Beta/FITC 荧光素标记微管蛋白抗体IgG
Anti-Tubulin- Gamma/FITC 荧光素标记微管蛋白-γ抗体IgG
Anti- Beta-Actin/HRP 辣根过氧化物标记β-肌动蛋白(抗体)
Anti-Tuberin/TSC2/FITC 荧光素标记马铃薯球蛋白(结节性硬化)抗体IgG
Anti-Phospho-Tuberin/TSC2 (Tyr320) /FITC 荧光素标记化马铃薯球蛋白(结节性硬化)抗体IgG
Anti-Phospho-Tuberin/TSC2 (Ser1387)/FITC 荧光素标记化马铃薯球蛋白(结节性硬化)抗体IgG
Anti-Phospho-Tuberin/TSC2 (Ser939) /FITC 荧光素标记化马铃薯球蛋白(结节性硬化)抗体IgG
Anti-Phospho-Tuberin/TSC2 (Tyr1571)/FITC 荧光素标记化马铃薯球蛋白(结节性硬化)抗体IgG
叶绿体分离和叶绿体酶提取差速离心法对硝标准溶液 1.02mg/ml,体:人抗中性粒胞浆抗体(cANCA)IgM 免疫试剂盒C-藻蓝素/藻蓝蛋白/藻青蛋白抗体Phospho-MYPT1/MBS(Ser507) 化肌球蛋白抗体
对硝 GR,99.5%人抗中性粒/中心体抗体(ACA)免疫试剂盒色素P450 1A1抗体Phospho-MYPT1(Thr696) 化肌球蛋白抗体
对硝 分析标准品,用于环境分析人抗增殖核抗原(PCNA)抗体免疫试剂盒丝/苏氨蛋白质激II α抗体Phospho-MYPT1 (Thr853) 化肌球蛋白抗体
2,4-二硝 GR,99%(剧品)人抗硬皮病抗体70(SCL70/topoⅠ)免疫试剂盒2号染色体开放阅读框66抗体Phospho-MYPT1 (Ser668) 化肌球蛋白抗体
愈创木酚 >99.0%(GC)人抗抑制素B抗体(IgG)免疫试剂盒CULLIN抗体phospho-Myosin light chain(Ser20) 化肌球蛋白轻链抗体
邻二 AR,98%人抗异质型核糖核蛋白抗体/抗RA33抗体(anti-hnRNP-ab/anti-RA33-ab)免疫试剂盒小牛胸腺DNA抗体phospho-MyoD1(Ser200) 化肌原调节蛋白抗体
邻二 99%,用于生化研究人抗异亮氨氨酰tRNA连接,质(IARS)抗体免疫试剂盒1号染色体开放阅读框226抗体phospho-MYL9(Thr19) 化肌球蛋白轻链9抗体
香草 AR,99%人抗异亮氨tRNA连接,线粒体(IARS2)抗体免疫试剂盒组织蛋白L抗体phospho-MYL6(Tyr29+Ser30) 化肌球蛋白轻链6抗体
1,4-二(反式+顺式) 97%人抗胰岛素受体抗体(AIRA)免疫试剂盒丝/苏氨蛋白激II β抗体(casein kinase IIβ)Phospho-MYL(Ser19) 化肌球蛋白轻链2抗体
顺-2--1,4-二 98%人抗胰蛋白(AT)免疫试剂盒角蛋白18抗体phospho-MYF5 (phospho Ser49) 化生肌决定因子Myf5抗体
辛酰 99%人抗眼肌抗体(EMAb)免疫试剂盒转化生长因子β1结合蛋白抗体Phospho-mu Opioid Receptor (Ser375) 化µ-型阿片受体抗体
反,反-2,4-壬二烯 >85.0%(GC)人抗血小板抗体IgM(PA-IgM)免疫试剂盒22号染色体开放阅读框45抗体Phospho-mTOR (Tyr144) 化雷帕霉素靶蛋白抗体
间酰 97%人抗血小板抗体IgG(PA-IgG)免疫试剂盒22号染色体开放阅读框32抗体Phospho-mTOR (Thr2446) 化雷帕霉素靶蛋白抗体
间二酰 99%人抗血小板抗体IgA(PA-IgA)免疫试剂盒CD5L抗体Phospho-mTOR (Ser2481) 化雷帕霉素靶蛋白抗体
对二酰 99%人抗血小板抗体(anti-PA Ab)免疫试剂盒(半定量)CD6抗体Phospho-Mst2(Thr180) 化蛋白激MST2抗体