α酮戊二酸脱氢酶(αKGDH)微量法

α酮戊二酸脱氢酶(αKGDH)微量法

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2022-04-27 09:40:34
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产品简介

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详细介绍

测定步骤:

1、 酶标仪预热30min以上,调节波长至450nm。

2、 试剂三的稀释:将试剂三用蒸馏水稀释50倍,用多少配多少。(试剂三和蒸馏水1:49稀释。

3、 工作液配制:在试剂一加入100μl试剂二,充分混匀。配好的试剂4℃避光可保存一周。(若一次性测定样本较少,可按照实际用量将试剂一和试剂二按照20ml:0.1ml的比例混匀配制)

4、 将一瓶试剂四用5ml蒸馏水溶解(溶解后一周内用完)。

5、 样本测定(在96孔板中依次加入下列试剂)

选择抗凝的注意点:

①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致;

②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;

③、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.4~0.5ml血浆);

④、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后用于测定。

【友情提示】:本产品仅供科研研究使用,不得用于人体临床直接检测。避免给您带来不必要的损失,请仔细阅读购买说明!

产品名称

规格

检测方法

货号

α酮戊二酸脱氢酶(αKGDH)微量法

100管/96样

微量法

GOY-01S6571

商品介绍

测定意义

α-KGDHEC 1.2.4.2)广泛存在于动物、植物微生物和培养细胞的线粒体中,是三羧酸循环调控关键酶之一,催化α-酮戊二酸氧化脱羧生成琥珀酰。

测定原理

α-KGDH催化α-酮戊二酸、NAD+ 和生成琥珀酰、 二氧化碳和 NADHNADH340 nm有特征吸收峰,以NADH的生成速率表示α-KGDH活性。

需自备的仪器和用品

紫外分光光度计/酶标仪、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。

试剂的组成和配制:

提取液:液体 100mL×1 瓶,4℃保存;

试剂一:液体 5mL×1 瓶,4℃保存;

试剂二:液体 200μL×1 支,4℃保存;

试剂三:液体 4mL×1 瓶,4℃保存;

试剂四:粉剂×2 瓶,4℃保存。
QQ截图20220307153443.png

所需的仪器和用品:

可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿(光径 1cm)、低温离心机、移液器、研钵、冰和蒸馏水

四、超氧化物歧化酶(SOD)的测定:

建议正式实验前选取 2 个样本做预测定,了解本批样品情况,熟悉实验流程,避免实验

样本和试剂浪费!

1、样本制备

① 组织样本:

取约 0.1g 组织(水分充足的样本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4ºC 或冰浴进行

匀浆(或使用各类常见匀浆器)。4ºC×12000rpm 离心 10min,取上清作为待测液。

【注】:若增加样本量,可按照组织质量(g):提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例进行提取

② 细菌/细胞样本:

先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;取约 500 万细菌或细胞加入 1mL

提取液,超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率 200W,超声 3s,间隔 10s,重复 30 次);

12000rpm 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。

【注】:若增加样本量,可按照细菌/细胞数量(10

4):提取液(mL)为 500~1000:1 的比例进行提取。 ③ 液体样本:直接检测;若浑浊,离心后取上清检测。

注意事项:

1、试剂二为酶,不可冷冻,使用时在冰上放置。

2、对照管只需要做一管。

3、若对照管吸光值大于 1,建议将试剂二用蒸馏水稀释 7 倍后使用(10μL 试剂二原液+60μL蒸馏水)。

4、SOD为什么有的样本测定管大于对照管,对照管数值在什么范围?对照管的范围是 0.4-1。对照管吸光值过低可能是(1)试剂二或试剂四没有现配现用;

2)没有按顺序加试剂;(3)反应时间不够,可以延长反应时间(反应时间 30min可以延长到 40min)。对照管吸光值过高可能是试剂二未按操作说明书稀释相应倍数。

若出现测定管大于对照管,可能是样本中杂质的影响太大,为了降低杂质的影响一般

将样本提取上清液用蒸馏水或提取液稀释 10倍后再测,通常可以使测定正常。

聚二乙烯苯多孔小球GDX-102 80-100目液体石蜡 ARAnti-IRF7 /FITC  荧光素标记干扰素调节因子7抗体IgG

聚二乙烯苯多孔小球GDX-103 40-60目山梨酸 AR,99%Anti-Phospho-IRF7 (Ser471/472) /FITC  荧光素标记化干扰素调节因子7抗体IgG

聚二乙烯苯多孔小球GDX-103 60-80目 CP,99.0%Anti-IRS-1/FITC   荧光素标记胰岛素受体底物-1抗体IgG

聚二乙烯苯多孔小球GDX-104 60-80目磺嘧银 98%Anti-phospho-IRS1(Tyr895)/FITC   荧光素标记化胰岛素受体底物-1抗体IgG

聚二乙烯苯多孔小球GDX-201 60-80目磺胍 98%Anti-phospho-IRS1(Tyr1222)/FITC   荧光素标记化胰岛素受体底物-1抗体IgG

聚二乙烯苯多孔小球GDX-301 80-100目磺嘧 分析标准品Anti-phospho-IRS1(Ser1101)/FITC   荧光素标记化胰岛素受体底物-1抗体IgG

聚二乙烯苯多孔小球GDX-501 60-80目磺嘧 98%Anti-phospho-IRS1(Ser302) /FITC   荧光素标记化胰岛素受体底物-1抗体IgG

聚二乙烯苯多孔小球GDX-502 40-60目甜蜜素 药用级Anti-phospho-IRS1(Ser332/336)/FITC   荧光素标记化胰岛素受体底物-1抗体IgG

α酮戊二酸脱氢酶(αKGDH)微量法(2-二膦乙) 96%Anti-FASN/FITC  荧光素标记抗脂肪合成抗体IgG鸡解旋样转录因子(HLTF)联免疫吸附测定试剂盒

(1S,2S)-2-(二膦)环己 97%Anti-FasL/FITC  荧光素标记FasL蛋白抗体IgG鸡血管紧张肽A(ATA)联免疫吸附测定试剂盒  

(1S,2S)-(-)-1, 2-二-1, 2-乙二 98%Anti-FAST kinase/FITC  荧光素标记抗Fas活化的丝/苏氨激抗体IgG鸡葡萄糖变位(PGM)联免疫吸附测定试剂盒

(1S,2S)-N-(对磺酰)-1,2-二乙二 98%Anti-FBN1 /FITC  荧光素标记原纤维蛋白1抗体IgG鸡延伸蛋白A(EloA)联免疫吸附测定试剂盒

(1S,2S)-(+)-N,N'-二环己烷-1,2-二 98%Anti-Fc GammaR II A/CD32a/FITC  荧光素标记免疫球蛋白G Fc段受体Ⅱ抗体IgG鸡血小板相关抗体IgM(PA-IgM)联免疫吸附测定试剂盒

(1S,2S)-(-)-1,2-环己二D-盐 98%Anti-FDC-SP/FITC  荧光素标记抗B淋巴表面结合蛋白抗体IgG鸡前列腺素内过氧化物合2(PTGS2/COX-2)联免疫吸附测定试剂盒

(S,S)-2,6-双(4-异-2-恶唑啉-2-)吡 99%Anti-Fe65 protein/FITC  荧光素标记Fe65 蛋白抗体IgG鸡趋化素样因子超家族成员5(CKLFSF5)联免疫吸附测定试剂盒

(S,S)-N-(对磺酰)-1,2-二乙烷二(对异)化钌(II) Anti-FGF1/FITC  荧光素标记性成纤维生长因子鸡白分化抗原CD109(CD109)联免疫吸附测定试剂盒

二乙酰[(S)-(-)-2,2'-双(二-P-酰)-1,1'联萘]钌 95%Anti-FGF3/Oncogene INT2 /FITC  荧光素标记纤维母生长因子3抗体IgG鸡软骨糖蛋白39(GP39)联免疫吸附测定试剂盒

2,2′:6′,2′′-三吡 98%Anti-FGF4/HSTF1/HBGF-4/FITC  荧光素标记纤维母生长因子4抗体IgG鸡血小板反应蛋白2(TSP-2)联免疫吸附测定试剂盒

 97%Anti-FGF5/FITC  荧光素标记纤维母生长因子5抗体IgG鸡天青杀素1(AZU1)联免疫吸附测定试剂盒  

三特丁膦 1.0 M in tolueneAnti-KGF/FGF-7/FITC  荧光素标记角质形成生长因子受体/纤维母生长因子-7抗体IgG鸡白介素3介导核因子(NFIL3)联免疫吸附测定试剂盒

(二亚苄酮)二钯,加合物 98%Anti-FGF-8/HBGF-8/FITC  荧光素标记成纤维生长因子-8/纤维母生长因子-8抗体IgG鸡胃蛋白原C(PGC)联免疫吸附测定试剂盒

三氟乙酰酮 98%Anti-FGF-13/FITC  荧光素标记抗纤维母生长因子-13抗体IgG鸡性别决定区Y框蛋白2(SOX2)联免疫吸附测定试剂盒

(2-)膦 97%Anti-FGF-10/FITC  荧光素标记成纤维生长因子-10/纤维母生长因子-10抗体IgG鸡S-转移θ1(GSTθ1/GSTt1)联免疫吸附测定试剂盒

 


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