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【友情提示】:本产品仅供科研研究使用,不得用于人体临床直接检测。避免给您带来不必要的损失,请仔细阅读购买说明!
产品名称 | 规格 | 检测方法 | 货号 |
100管/96样 | 微量法 | GOY-01S6573 |
商品介绍
测定意义 CA又称枸橼酸,广泛存在于各种生物胞质中,是生物体内重要的有机酸。CA也存在于线粒体基质中,是三羧酸循环第一步反应的产物,与脂肪、蛋白质和糖最终转化为二氧化碳密切相关。 测定原理 酸性条件下,柠檬酸可将Cr6+还原成Cr3+,在545nm处有特征吸收峰;通过测定545nm吸光值的增加,即可计算出样品中柠檬酸含量。 实验中所需仪器及设备 可见分光光度计、低温离心机、掌上离心机、可调式移液枪、1ml玻璃比色皿、双蒸水 |
试剂的组成和配制:
提取液:液体 100mL×1 瓶,4℃保存;
试剂一:液体 5mL×1 瓶,4℃保存;
试剂二:液体 200μL×1 支,4℃保存;
试剂三:液体 4mL×1 瓶,4℃保存;
试剂四:粉剂×2 瓶,4℃保存。
所需的仪器和用品:
可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿(光径 1cm)、低温离心机、移液器、研钵、冰和蒸馏水
四、超氧化物歧化酶(SOD)的测定:
建议正式实验前选取 2 个样本做预测定,了解本批样品情况,熟悉实验流程,避免实验
样本和试剂浪费!
1、样本制备
① 组织样本:
取约 0.1g 组织(水分充足的样本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4ºC 或冰浴进行
匀浆(或使用各类常见匀浆器)。4ºC×12000rpm 离心 10min,取上清作为待测液。
【注】:若增加样本量,可按照组织质量(g):提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例进行提取
② 细菌/细胞样本:
先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;取约 500 万细菌或细胞加入 1mL
提取液,超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率 200W,超声 3s,间隔 10s,重复 30 次);
12000rpm 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。
【注】:若增加样本量,可按照细菌/细胞数量(10
4):提取液(mL)为 500~1000:1 的比例进行提取。 ③ 液体样本:直接检测;若浑浊,离心后取上清检测。
注意事项:
1、试剂二为酶,不可冷冻,使用时在冰上放置。
2、对照管只需要做一管。
3、若对照管吸光值大于 1,建议将试剂二用蒸馏水稀释 7 倍后使用(10μL 试剂二原液+60μL蒸馏水)。
4、SOD为什么有的样本测定管大于对照管,对照管数值在什么范围?对照管的范围是 0.4-1。对照管吸光值过低可能是(1)试剂二或试剂四没有现配现用;
(2)没有按顺序加试剂;(3)反应时间不够,可以延长反应时间(反应时间 30min可以延长到 40min)。对照管吸光值过高可能是试剂二未按操作说明书稀释相应倍数。
若出现测定管大于对照管,可能是样本中杂质的影响太大,为了降低杂质的影响一般
将样本提取上清液用蒸馏水或提取液稀释 10倍后再测,通常可以使测定正常。
Burkholderia gladioli氨肽N检测试剂盒
Pseudomonas nitroreducens内皮微粒水平检测试剂盒
Pseudomonas chlororaphis神经酰检测试剂盒
Pseudomonas fulva前脑钠素检测试剂盒
Burkholderia pyrrocinia紧密连接蛋白2检测试剂盒
Pseudomonas viridiflava转化生长因子P1检测试剂盒
Pseudomonas cichorii乙脱氢1家族成员A2检测试剂盒
Pseudomonas putida神经生长因子前体检测试剂盒
柠檬酸(CA)含量微量法检测试剂盒正辛 AR,99%TRBF1 (omeric repeat binding factor 1) 端粒体复制结合因子1抗原猴组织蛋白D(CTSD)联免疫吸附测定试剂盒
1,2- AR,99%TRIM32(tripartite motif protein 32) TRIM32抗原猴原纤维蛋白3(FBN3)联免疫吸附测定试剂盒
红铝溶液 70 wt%溶液Trop-2/Tpm2 peptide 原肌球蛋白抗原猴脑源性神经营养因子(BDNF) 联免疫吸附测定试剂盒
氢化钠 98%TSARG4(Testis and spermatogenesis related gene 4) 生精凋亡相关因4抗原猴可溶性转铁蛋白受体1(sTfR1)联免疫吸附测定试剂盒
三乙烯四 Standard for GCTSGF(Tumor Specific Growth Fanctor) 恶性肿瘤特异性生长因子抗原猴回肠脂肪结合蛋白6(FABP6)联免疫吸附测定试剂盒
三乙烯四 CP,68%CIDEB peptide CIDEB抗原猴趋化素样因子超家族成员5(CKLFSF5)联免疫吸附测定试剂盒
三乙烯四 AR,70%Tsg101(Tumor susceptibility gene 101 protein) Tsg101抗原猴质金属蛋白7(MMP-7)联免疫吸附测定试剂盒
三乙烯四 色谱固定液TSHR (Thyroid stimulating hormone receptor) 促状腺素受体抗原猴REST协阻抑因子3(RCOR3)联免疫吸附测定试剂盒
三异 95%MAP1LC3A(microtubule-associated protein 1 light chain 3) 自噬微管相关蛋白轻链3抗原猴D-脱氢(D-LDH)联免疫吸附测定试剂盒
3,5,5-己 97%TSLC1 (tumor suppressor in lung cancer-1) 肺癌肿瘤阻抑因1抗原猴肝脂 (LIPC)联免疫吸附测定试剂盒
三羟烷 98%TTF-1 (Thyroid Transcription Factor-1) 状腺核转录因子-1抗原猴生长分化因子2(GDF2)联免疫吸附测定试剂盒
3,4,5,6-四氢酐 98%Tubulin- Gamma 微管蛋白-γ抗原猴过氧化还原5(PRDX5)联免疫吸附测定试剂盒
己二 98%TWIST protein peptide TWIST蛋白抗原猴纽蛋白(VCL)联免疫吸附测定试剂盒
三硅烷 98%T Beta10 peptide β10抗原猴信号传导转录激活因子4(STAT4)联免疫吸附测定试剂盒
六亚二异酯 97%UCN(Urocortin)mouse ret 新型血管活性因子UCN抗原(小鼠、大鼠)猴C-Myc结合蛋白(MYCBP)联免疫吸附测定试剂盒
测定步骤:
1、 酶标仪预热30min以上,调节波长至450nm。
2、 试剂三的稀释:将试剂三用蒸馏水稀释50倍,用多少配多少。(试剂三和蒸馏水1:49稀释。
3、 工作液配制:在试剂一加入100μl试剂二,充分混匀。配好的试剂4℃避光可保存一周。(若一次性测定样本较少,可按照实际用量将试剂一和试剂二按照20ml:0.1ml的比例混匀配制)
4、 将一瓶试剂四用5ml蒸馏水溶解(溶解后一周内用完)。
5、 样本测定(在96孔板中依次加入下列试剂)
选择抗凝的注意点:
①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致;
②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;
③、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.4~0.5ml血浆);
④、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后用于测定。