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商品介绍
测定意义 SDH(EC 1.3.5.1)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中。SDH是线粒体的一种标志酶,位于线粒体内膜上的一种膜结合酶,是连接呼吸电子传递和氧化磷酸化的枢纽之一。此外,为多种原核细胞产能的呼吸链提供电子。 测定原理 SDH催化琥珀酸脱氢生成延胡索酸,脱下的氢通过吩嗪二甲酯硫酸(PMS)传递还原2,6-二氯酚靛酚(DCPIP),并且在600nm处具有特征吸收峰,通过600nm吸光度的变化,测定2.6-DPIP的还原速度,代表SDH酶活性。 需自备的仪器和用品 可见分光光度计、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿、研钵、冰和蒸馏水。 |
试剂的组成和配制:
提取液:液体 100mL×1 瓶,4℃保存;
试剂一:液体 5mL×1 瓶,4℃保存;
试剂二:液体 200μL×1 支,4℃保存;
试剂三:液体 4mL×1 瓶,4℃保存;
试剂四:粉剂×2 瓶,4℃保存。
【友情提示】:本产品仅供科研研究使用,不得用于人体临床直接检测。避免给您带来不必要的损失,请仔细阅读购买说明!
产品名称 | 规格 | 检测方法 | 货号 |
100管/96样 | 微量法 | GOY-01S6575 |
所需的仪器和用品:
可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿(光径 1cm)、低温离心机、移液器、研钵、冰和蒸馏水
四、超氧化物歧化酶(SOD)的测定:
建议正式实验前选取 2 个样本做预测定,了解本批样品情况,熟悉实验流程,避免实验
样本和试剂浪费!
1、样本制备
① 组织样本:
取约 0.1g 组织(水分充足的样本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4ºC 或冰浴进行
匀浆(或使用各类常见匀浆器)。4ºC×12000rpm 离心 10min,取上清作为待测液。
【注】:若增加样本量,可按照组织质量(g):提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例进行提取
② 细菌/细胞样本:
先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;取约 500 万细菌或细胞加入 1mL
提取液,超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率 200W,超声 3s,间隔 10s,重复 30 次);
12000rpm 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。
【注】:若增加样本量,可按照细菌/细胞数量(10
4):提取液(mL)为 500~1000:1 的比例进行提取。 ③ 液体样本:直接检测;若浑浊,离心后取上清检测。
注意事项:
1、试剂二为酶,不可冷冻,使用时在冰上放置。
2、对照管只需要做一管。
3、若对照管吸光值大于 1,建议将试剂二用蒸馏水稀释 7 倍后使用(10μL 试剂二原液+60μL蒸馏水)。
4、SOD为什么有的样本测定管大于对照管,对照管数值在什么范围?对照管的范围是 0.4-1。对照管吸光值过低可能是(1)试剂二或试剂四没有现配现用;
(2)没有按顺序加试剂;(3)反应时间不够,可以延长反应时间(反应时间 30min可以延长到 40min)。对照管吸光值过高可能是试剂二未按操作说明书稀释相应倍数。
若出现测定管大于对照管,可能是样本中杂质的影响太大,为了降低杂质的影响一般
将样本提取上清液用蒸馏水或提取液稀释 10倍后再测,通常可以使测定正常。
测定步骤:
1、 酶标仪预热30min以上,调节波长至450nm。
2、 试剂三的稀释:将试剂三用蒸馏水稀释50倍,用多少配多少。(试剂三和蒸馏水1:49稀释。
3、 工作液配制:在试剂一加入100μl试剂二,充分混匀。配好的试剂4℃避光可保存一周。(若一次性测定样本较少,可按照实际用量将试剂一和试剂二按照20ml:0.1ml的比例混匀配制)
4、 将一瓶试剂四用5ml蒸馏水溶解(溶解后一周内用完)。
5、 样本测定(在96孔板中依次加入下列试剂)
选择抗凝的注意点:
①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致;
②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;
③、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.4~0.5ml血浆);
④、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后用于测定。
支链酸转氨2抗体Human GSG1L ELISA Kit人嗜酸性白血球相关之RNA水解酵素家族成员12(EAR12)ELISA试剂盒,EAR12 ELIS
BCL2相关蛋白A1抗体Human GSPT2 ELISA Kit人干扰素活化基因205(Ifi205)ELISA试剂盒,
B瘤蛋白3抗体Human GPRIN3 ELISA Kit人蛋白1调控/抑制因子亚基1A(PPP1R1A)ELISA试剂盒,
转录因子MYB相关蛋白B抗体Human GPS2 ELISA Kit人可溶性血管内皮蛋白C受体(sEPCR)ELISA试剂盒,
防御素β1/Defensin β1抗体Human GPSM2 ELISA Kit人转录因子抗体-1(ATF-1)ELISA试剂盒,
B活化因子受体抗体Human GPX4 ELISA Kit人功能相关抗原2(LFA-2/CD2)ELISA试剂盒,
TNF家族B激活因子抗体Human GPX7 ELISA Kit人S100B蛋白(S-100B)ELISA试剂盒,
蛇巴曲抗体Human GPX5 ELISA Kit人凝胶原蛋白(gelson)ELISA试剂盒,
琥珀酸脱氢酶(SDH)微量法检测试剂盒三(二亚苄酮)二钯 Pd 21.5%Anti-GAPDH(human)/FITC 荧光素标记3-甘油脱氢(人)抗体IgG大鼠含免疫球蛋白样环和上皮生长因子样域酪氨激2(Tie-2)联免疫吸附测定试剂盒
4-苄氧酚 98%Anti-GAPDH(rat、mouse)/FITC 荧光素标记3-甘油脱氢(大鼠、小鼠)抗体IgG大鼠高敏状腺素(U-T4)联免疫吸附测定试剂盒
牛蒡子苷元 分析标准品,>98% Anti-GAPDH/FITC 荧光素标记3-甘油脱氢IgG大鼠高敏状腺原氨(U-T3)联免疫吸附测定试剂盒
牛蒡子苷 分析标准品,>98% Anti-GAPDH/FITC 荧光素标记3-甘油脱氢抗体IgG大鼠红衍生核因子2样蛋白2(NFE2L2)联免疫吸附测定试剂盒
马兜铃 分析标准品,>98% Anti-Gastrin/FITC 荧光素标记胃泌素/蛙皮素抗体IgG大鼠尿激型纤溶原激活因子(PLAU/uPA)联免疫吸附测定试剂盒
异补骨脂素 分析标准品,>98%Anti-Gastrin/FITC 荧光素标记胃泌素/蛙皮素抗体IgG大鼠尿激型纤溶原激活物受体(PLAUR/uPAR)联免疫吸附测定试剂盒
桃叶珊瑚苷 分析标准品,≥98%Anti-Brs3/Bombesin Receptor 3/FITC 荧光素标记蛙皮素受体3抗体IgG大鼠血管内皮生长因子B(VEGF-B)联免疫吸附测定试剂盒
白桦脂 分析标准品,>98%Anti-GATA-3/FITC 荧光素标记抗GATA结合蛋白3抗体IgG大鼠血管内皮生长因子C(VEGF-C)联免疫吸附测定试剂盒
(+)- 分析标准品,≥98% (GC)Anti-GATA-4/FITC 荧光素标记抗GATA结合蛋白4抗体IgG大鼠血管内皮生长因子D(VEGF-D)联免疫吸附测定试剂盒
岩白菜素 分析标准品,>98% Anti-GATA-5/FITC 荧光素标记抗GATA结合蛋白5抗体IgG大鼠血管内皮生长因子受体2(VEGFR-2/KDR)联免疫吸附测定试剂盒
双去氧姜黄素 分析标准品,>98% Anti-GATA-6/FITC 荧光素标记抗GATA结合蛋白6抗体IgG大鼠血管内皮粘附分子1(VCAM-1/CD106)联免疫吸附测定试剂盒
野百合碱 分析标准品Anti-Gax/FITC 荧光素标记生长终止特异性同源盒因抗体IgG大鼠血管活性肠肽(VIP)联免疫吸附测定试剂盒
白屈菜红碱 分析标准品,>98% Anti-GCK/FITC 荧光素标记抗葡萄糖激抗体IgG大鼠迟现抗原(VLA)联免疫吸附测定试剂盒
木香烃内酯 分析标准品,>98%Anti-GCN2/FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠蛋白激GCN2蛋白抗体IgG大鼠V-Fos FBJ骨髓瘤病癌因同源物(FOS)联免疫吸附测定试剂盒
二氢丹参酮 分析标准品,≥98%Anti-Phospho-GCN2 (Thr898) /FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠化蛋白激GCN2蛋白抗体IgG大鼠V-Ha-Ras Harvey肉瘤病癌因同源物(HRAS)联免疫吸附测定试剂盒