琥珀酸脱氢酶(SDH)可见分光光度法

琥珀酸脱氢酶(SDH)可见分光光度法

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2022-04-27 09:43:47
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产品简介

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详细介绍

选择抗凝的注意点:

①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致;

②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;

③、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.4~0.5ml血浆);

④、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后

用于测定。

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商品属性:

产品名称

琥珀酸脱氢酶(SDH)可见分光光度法

规格

50管/48样

检测方法

可见分光光度法

货号

GOY-01S6576

商品介绍:

测定意义

SDH(EC 1.3.5.1)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中。SDH是线粒体的一种标志酶,位于线粒体内膜上的一种膜结合酶,是连接呼吸电子传递和氧化磷酸化的枢纽之一。此外,为多种原核细胞产能的呼吸链提供电子。

测定原理

SDH催化琥珀酸脱氢生成延胡索酸,脱下的氢通过吩嗪二甲酯硫酸(PMS)传递还原2,6-二氯酚靛酚(DCPIP),并且在600nm处具有特征吸收峰,通过600nm吸光度的变化,测定2.6-DPIP的还原速度,代表SDH酶活性。

需自备的仪器和用品

可见分光光度计、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1 mL玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。

实验方法学:

一、肝素的配制:

市售肝素冻干粉140单位/mg1克瓶装,每瓶140000单位,称取0.1克肝素冻干粉,加生理盐水5ml,配成2800单位/ml。取50100μl湿润管壁,可抗凝人血35ml,血液不会凝固。老鼠血易凝固,所以最好更浓一些。可以取0.1克肝素冻干粉,加3ml生理盐水溶解后,取50100μl,可抗凝鼠血24ml

肝素抗凝管的制备:取0.1克肝素冻干粉,加2.5ml生理盐水。取100μl150μl滴入塑料或玻璃管中,湿润管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),横向转动,每隔510分钟转动一次,直至干燥后放入4℃保存,可使25ml血液不凝固。

二、血液样本的收集:

全血根据收集的条件,分成不抗凝和抗凝两种。同时,不抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血清;抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血浆。

1、不抗凝收集血清:将收集好的全血,静置12小时,直接低速离心分离出血清待用或保存。

2、抗凝收集血浆: 收集抗凝全血,轻轻颠倒充分抗凝后,可直接低速离心分离血浆(也可静置半小时左右再低速离心分离血浆)待用或保存。根据不同抗凝剂的性能特征,选择合适的抗凝剂。实验室常用的抗凝剂有肝素的各种盐、EDTA

操作步骤:

实验开始前,各试剂均应平衡至室温(试剂不能直接在37℃溶解);试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量,如样品浓度过高时,应对样品进行稀释,以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围,计算时再乘以相应的稀释倍数。

1.        加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。

2.        弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100μl(在使用前一小时内配制),酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。

3.        温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,大约400μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。

4.        每孔加检测溶液B工作液(同检测A工作液) 100μl,酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。

5.        温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。

6.        依序每孔加底物溶液90μl,酶标板加上覆膜37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。

7.       依序每孔加终止溶液50μl,终止反应,此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。

8.       用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。

L-乙酯盐酸盐 98.5%氢二,无水 ACSAnti-Polycystin 1/FITC  荧光素标记多囊肾蛋白1抗体IgG

L-精乙酯 98%氢二,无水 用于分子生物学,≥99.0% (T)Anti-Polycystin 2/FITC  荧光素标记多囊肾蛋白2抗体IgG

L-苄酯对甲苯磺酸盐 98%氢二,无水 for HPLC, ≥99.0% (T)Anti-PP-1/FITC  荧光素标记蛋白酯-1抗体IgG

L-天冬-β-苄酯 98%氢二,三水 AR,99.0%Anti-PP-2A/FITC  荧光素标记蛋白质-2A抗体IgG

D- 98%烯基脲 98%Anti-PP-2A/FITC  荧光素标记蛋白质-2A抗体IgG

L-叔丁酯盐酸盐 97%3-奎宁环酮盐酸盐 99%Anti-PP2Ac/FITC  荧光素标记酯-2Ac抗体IgG

N-乙酰-D- 98%基化锍 98%Anti-PRL1/PTP4A1/FITC  荧光素标记肝再生酯1抗体IgG

D-精 98%2,6-二异基 98%Anti-PRL3/PTP4A3/FITC  荧光素标记酯3蛋白抗体IgG

琥珀酸脱氢酶(SDH)可见分光光度法壬酚 分析标准品CsA ELISA Kit  大鼠A兔增殖核抗原(PCNA)联免疫吸附测定试剂盒

2,9-二-1,10-菲啰啉盐盐 99%hs-CRP ELISA Kit  大鼠超敏C反应蛋白兔嗜环蛋白/亲环素B(CYPB)联免疫吸附测定试剂盒  

1-萘 高纯级Beta2-GP1 IgA/G/M ELISA Kit  大鼠β2糖蛋白1抗体IgA/G/M兔巨噬趋化因子(MCF)联免疫吸附测定试剂盒

1,2-萘醌-4-磺钠盐 98%EMAb ELISA Kit  大鼠抗内膜抗体兔成纤维生长因子受体4(FGFR4)联免疫吸附测定试剂盒

对壬酚 98%LDL-IC ELISA Kit  大鼠低密度脂蛋白免疫复合物兔半凝集素14(GAL14)联免疫吸附测定试剂盒

对壬酚 分析标准品,纯品15-LO/LOX ELISA Kit  大鼠15脂加氧兔雌激素受体α(ERα)联免疫吸附测定试剂盒

2-萘 97%Tn- I ELISA Kit  大鼠肌钙蛋白Ⅰ兔肌动蛋白束蛋白(FSCN)联免疫吸附测定试剂盒

(R)-(+)-1-(2-萘)乙 99+%SAA ELISA Kit  大鼠血清淀粉样蛋白A兔肝配蛋白A3 (EFNA3)联免疫吸附测定试剂盒

2-萘钠盐 98+%Hpt/HP ELISA Kit  大鼠结合珠蛋白/触珠蛋白兔胞外超氧化物歧化(SOD3)联免疫吸附测定试剂盒

3-肼盐盐 98%Alpha1-AGP ELISA Kit  大鼠α1性糖蛋白兔钙粘蛋白相关的神经受体1(CNR-1)联免疫吸附测定试剂盒

3-磺酰 97%eNOS-3 ELISA Kit  大鼠内皮型一氧化氮合成3兔泛素关联蛋白2 (UBAP2)联免疫吸附测定试剂盒

(±)-降烟碱 98%CETP ELISA Kit  大鼠胆固酯转移蛋白兔肝配蛋白A受体10 (EPHA10)联免疫吸附测定试剂盒

5-氨-2-硝三氟 ARaGT ELISA Kit  大鼠血管紧张素原兔钙周期蛋白结合蛋白(CACYBP)联免疫吸附测定试剂盒

4-硝喹啉-N-氧化物 98%Hsp-60 ELISA Kit  大鼠热休克蛋白60兔S100钙结合蛋白A12(S100A12 )联免疫吸附测定试剂盒

3-辛烯-2-酮 98%MDA ELISA Kit  大鼠二兔半胱天冬1(P1)联免疫吸附测定试剂盒

 


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