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测定步骤:
1、 酶标仪预热30min以上,调节波长至450nm。
2、 试剂三的稀释:将试剂三用蒸馏水稀释50倍,用多少配多少。(试剂三和蒸馏水1:49稀释。
3、 工作液配制:在试剂一加入100μl试剂二,充分混匀。配好的试剂4℃避光可保存一周。(若一次性测定样本较少,可按照实际用量将试剂一和试剂二按照20ml:0.1ml的比例混匀配制)
4、 将一瓶试剂四用5ml蒸馏水溶解(溶解后一周内用完)。
5、 样本测定(在96孔板中依次加入下列试剂)
选择抗凝的注意点:
①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致;
②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;
③、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.4~0.5ml血浆);
④、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后用于测定。
【友情提示】:本产品仅供科研研究使用,不得用于人体临床直接检测。避免给您带来不必要的损失,请仔细阅读购买说明!
产品名称 | 规格 | 检测方法 | 货号 |
100管/96样 | 微量法 | GOY-01S6577 |
商品介绍
测定意义 PDH(EC 4.1.1.1)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,是丙酮酸脱氢酶复合体(PDHC)催化丙酮酸氧化脱羧的限速酶,催化丙酮酸脱梭生成-TPP,把糖酵解和三羧酸循环连接起来。 测定原理 PDH催化丙酮酸脱氢,同时还原WST-8产生黄色物质,从而导致450nm光吸收的增加。 可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。 |
试剂的组成和配制:
提取液:液体 100mL×1 瓶,4℃保存;
试剂一:液体 5mL×1 瓶,4℃保存;
试剂二:液体 200μL×1 支,4℃保存;
试剂三:液体 4mL×1 瓶,4℃保存;
试剂四:粉剂×2 瓶,4℃保存。
所需的仪器和用品:
可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿(光径 1cm)、低温离心机、移液器、研钵、冰和蒸馏水
四、超氧化物歧化酶(SOD)的测定:
建议正式实验前选取 2 个样本做预测定,了解本批样品情况,熟悉实验流程,避免实验
样本和试剂浪费!
1、样本制备
① 组织样本:
取约 0.1g 组织(水分充足的样本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4ºC 或冰浴进行
匀浆(或使用各类常见匀浆器)。4ºC×12000rpm 离心 10min,取上清作为待测液。
【注】:若增加样本量,可按照组织质量(g):提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例进行提取
② 细菌/细胞样本:
先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;取约 500 万细菌或细胞加入 1mL
提取液,超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率 200W,超声 3s,间隔 10s,重复 30 次);
12000rpm 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。
【注】:若增加样本量,可按照细菌/细胞数量(10
4):提取液(mL)为 500~1000:1 的比例进行提取。 ③ 液体样本:直接检测;若浑浊,离心后取上清检测。
注意事项:
1、试剂二为酶,不可冷冻,使用时在冰上放置。
2、对照管只需要做一管。
3、若对照管吸光值大于 1,建议将试剂二用蒸馏水稀释 7 倍后使用(10μL 试剂二原液+60μL蒸馏水)。
4、SOD为什么有的样本测定管大于对照管,对照管数值在什么范围?对照管的范围是 0.4-1。对照管吸光值过低可能是(1)试剂二或试剂四没有现配现用;
(2)没有按顺序加试剂;(3)反应时间不够,可以延长反应时间(反应时间 30min可以延长到 40min)。对照管吸光值过高可能是试剂二未按操作说明书稀释相应倍数。
若出现测定管大于对照管,可能是样本中杂质的影响太大,为了降低杂质的影响一般
将样本提取上清液用蒸馏水或提取液稀释 10倍后再测,通常可以使测定正常。
Corynebacterium gultamicum转肽检测试剂盒
Azotobacter chroococcum无色花色素还原检测试剂盒
Paenibacillus polymyxa钙依赖蛋白激检测试剂盒
Azotobacter chroococcum花色素还原检测试剂盒
Enterococcus faecium直链淀粉检测试剂盒
Acetobacter aceti支链淀粉检测试剂盒
Azotobacter chroococcum硝酸还原糖检测试剂盒
Micrococcus luteasγ-谷氨酰环化转移检测试剂盒
丙酮酸脱氢酶(PDH)微量法检测试剂盒氢氧化铯,一水 99.9% metals basis犬胰岛素(INS)免疫试剂盒化丝裂原活化蛋白激1/2抗体Neurofascin/Nfasc155 神经束蛋白155抗体
塑料盖和垫片,匹配20L铝桶,φ99.4*32犬胰蛋白原激活肽(TAP)免疫试剂盒酪氨蛋白激受体B4抗体NeuroD1/NEUROD 神经分化因子1抗体
2- 98%犬胰蛋白原-1 免疫试剂盒酪氨蛋白激A5受体抗体Neurocan 神经粘蛋白抗体
2-溴代异丁 98%犬胰蛋白(trypsin)免疫试剂盒上皮钠离子通道蛋白γ/γENaC抗体Neurobeachin 蛋白激锚定蛋白抗体
1,2,3,4-丁烷四羧 99%犬一氧化氮(NO)免疫试剂盒癌因ETS2抗体Neurexin 2 轴突蛋白2抗体
3-溴-5- 98%犬叶(FA)免疫试剂盒内皮素3抗体Neurexin 1 轴突蛋白1(Neurexin 1α)抗体
二二氨钯 Pd ≥50% 犬血纤蛋白原降解产物(FDP)免疫试剂盒化外信号调节激5抗体NeuN 神经元核抗原抗体
2-乙酯 98%犬血纤蛋白原(Fbg)免疫试剂盒化外信号调节激5抗体NEU4 神经氨4抗体
溴乙乙酯 98%犬血栓素B2(TXB2)免疫试剂盒外信号调节激4抗体Netrin G2 轴突生长诱向因子G2抗体
2-溴丁乙酯 98%犬血栓前体蛋白(TpP)免疫试剂盒肠出血性大肠杆菌埃希氏菌O157:H7抗体Netrin G1 ligand 轴突生长诱向因子G1配体抗体
2-溴已乙酯 99%犬血栓调节蛋白(TM)免疫试剂盒化丝裂原活化蛋白激ERK抗体Netrin 4 轴突生长诱向因子4抗体
三化金水溶液 Au 23.5~23.8%犬血清淀粉样蛋白A2(SAA2)免疫试剂盒CD312抗体NETO1 脑低密度脂蛋白受体蛋白1抗体
2-溴丁酯 97%犬血清淀粉样蛋白A(SAA)免疫试剂盒eIF4E结合蛋白抗体NET1 神经上皮转化因1抗体
2-溴已酯 98%犬血管性血友病因子/瑞斯托霉素辅因子(VWF)免疫试剂盒化因子受体抗体NET1 去素转运蛋白/神经递质去素转运体抗体
2-酯 97%犬血管紧张素转化2(ACE2)免疫试剂盒化因子受体抗体Nestin 巢蛋白/神经上皮干蛋白抗体