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选择抗凝的注意点:
①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致;
②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;
③、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.4~0.5ml血浆);
④、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后
用于测定。
商品属性:
产品名称 | |
规格 | 50管/24样 |
检测方法 | 可见分光光度法 |
货号 | GOY-01S6588 |
商品介绍:
测定意义
乳酸是生物体代谢过程中重要的中间产物,与糖代谢、脂类代谢、蛋白质代谢及细胞内能量代谢密切相关,乳酸含量是评估糖元代谢的和有氧代谢的重要指标。
测定原理
乳酸在乳酸脱氢酶的作用下生成丙酮酸,同时使NAD+还原生成NADH和H+,H+传递给PMS生成的PMSH2还原INT生成红色物质,在530nm处有特征吸收峰。
自备实验用品及仪器
天平、研钵、离心机、可见分光光度计、1 mL玻璃比色皿、恒温水浴锅。
实验方法学:
一、肝素的配制: 市售肝素冻干粉140单位/mg,1克瓶装,每瓶140,000单位,称取0.1克肝素冻干粉,加生理盐水5ml,配成2800单位/ml。取50~100μl湿润管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不会凝固。老鼠血易凝固,所以最好更浓一些。可以取0.1克肝素冻干粉,加3ml生理盐水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。 肝素抗凝管的制备:取0.1克肝素冻干粉,加2.5ml生理盐水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,湿润管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),横向转动,每隔5~10分钟转动一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。 | 二、血液样本的收集: 全血根据收集的条件,分成不抗凝和抗凝两种。同时,不抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血清;抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血浆。 1、不抗凝收集血清:将收集好的全血,静置1~2小时,直接低速离心分离出血清待用或保存。 2、抗凝收集血浆: 收集抗凝全血,轻轻颠倒充分抗凝后,可直接低速离心分离血浆(也可静置半小时左右再低速离心分离血浆)待用或保存。根据不同抗凝剂的性能特征,选择合适的抗凝剂。实验室常用的抗凝剂有肝素的各种盐、EDTA。 |
操作步骤:
实验开始前,各试剂均应平衡至室温(试剂不能直接在37℃溶解);试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量,如样品浓度过高时,应对样品进行稀释,以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围,计算时再乘以相应的稀释倍数。
1. 加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。
2. 弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100μl(在使用前一小时内配制),酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。
3. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,大约400μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。
4. 每孔加检测溶液B工作液(同检测A工作液) 100μl,酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。
5. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶标板加上覆膜37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。
7. 依序每孔加终止溶液50μl,终止反应,此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。
8. 用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。
高迁移率族蛋白A1抗原Anti-COL5A2 Antibody猪肌肉糖原化(PYGM)elisa定量检测试剂盒
高迁移率族蛋白A2抗原Anti-COL5A3 Antibody猪胸腺依赖性抗原(TD-Ag)elisa定量检测试剂盒
血红素氧合-1/热休克蛋白-32抗原Anti-COL6A3 Antibody猪膜桥蛋白elisa定量检测试剂盒
血红素氧合-1/热休克蛋白-32抗原Anti-COL6A2 Antibody猪食欲素/阿立新B(OXB)elisa定量检测试剂盒
血红素氧合-2抗原Anti-COL9A1 Antibody猴肝脂 (LIPC)elisa定量检测试剂盒
异染色质蛋白1(化多肽)Anti-COL9A3 Antibody猴微管蛋白α3C(TUBα3C)elisa定量检测试剂盒
异染色质蛋白1(化多肽)Anti-COP1 Antibody猪基质衍生因子4(SDF-4)elisa定量检测试剂盒
人类状瘤病18E6Anti-Collagen XII alpha1 Antibody猪c-junelisa定量检测试剂盒
乳酸含量(LA)可见分光光度法检测试剂盒茜素黄R 98%人核糖体合成蛋白NSA2同源物(NSA2)免疫试剂盒补体C1RL链多肽抗体phospho-EIF4G1(Ser1238) 化真核翻译起始因子4G抗体
依来铬蓝R >99%(HPLC)人核糖体蛋白S9(RPS9)免疫试剂盒周期素M2抗体phospho-eIF4G(ser1108) 化真核翻译起始因子4G抗体
铬黑T ACS人核糖体蛋白S25(RPS25)免疫试剂盒周期素T2抗体phospho-eIF4EBP1/4EBP1(Ser65/Thr70) 化eIF4E结合蛋白抗体
依莱铬红B 高纯级人核糖核抑止剂(RNH1/PRI/RNH)免疫试剂盒周期素K抗体phospho-eIF4EBP1/4EBP1(Ser64) 化4E结合蛋白1抗体
铬蓝黑R AR人核糖核,核糖核A家族,(肝脏,嗜性粒源性神经素)(RNASE2)免疫试剂盒抗菌肽CAMP抗体phospho-eIF4EBP1/2/3(Thr36) 化4E结合蛋白1,2,3抗体
铬蓝黑R Indicator人核糖核(RNASE1/RIB1/RNS1)免疫试剂盒5号染色体开放阅读框4抗体phospho-eIF4EBP1(Thr37/46) 化4E结合蛋白1抗体
苄氢氧化铵 40%溶液人核仁纤维蛋白抗体(AFA/snoRNP/U3RNP)免疫试剂盒4号染色体开放阅读框44抗体phospho-eIF4EBP1(Thr36) 化4E结合蛋白1抗体
四乙氢氧化铵 AR,25%水溶液人核质蛋白22(NMP-22)免疫试剂盒4号染色体开放阅读框33抗体phospho-EIF4EBP1(Ser111) 化eIF4E结合蛋白抗体
四丁氢氧化铵溶液 ~25% in H2O (~0.8 M)人核黄素激(RFK)免疫试剂盒4号染色体开放阅读框42抗体phospho-EIF4EBP1(Ser100) 化eIF4E结合蛋白抗体
石英砂 AR,6-10目,2-3mm人和肽素(copeptin)免疫试剂盒5号染色体开放阅读框33抗体phospho-eIF4E(Ser209) 化真核翻译起始因子4E抗体
石英砂 AR,8-16目或1-2mm人汉坦病(HV)抗体(IgM)免疫试剂盒9号染色体开放阅读框89抗体phospho-EIF4B (Ser540) 化真核翻译起始因子4B抗体
2-氨吡 CP人含免疫球蛋白样环和上皮生长因子样域酪氨激2(Tie-2)免疫试剂盒19号染色体开放阅读框66抗体phospho-EIF4B (Ser422) 化真核翻译起始因子4B抗体
酯 99%人含免疫球蛋白样环和上皮生长因子样域酪氨激1(Tie-1)免疫试剂盒21号染色体开放阅读框55抗体Phospho-eIF2 alpha (Ser51) 化真核启动因子2α抗体
氨黑10B AR人含SET域4(setd4)免疫试剂盒21号染色体开放阅读框70抗体Phospho-EGFR(Tyr845) 化因子受体抗体
石杉碱 99%人含patatin样脂域3(PNPLA3/ADPN/C22orf20)免疫试剂盒胱抑素A/半胱氨蛋白抑制剂A抗体Phospho-EGFR(Ser991) 化因子受体抗体