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测定步骤:
1、 酶标仪预热30min以上,调节波长至450nm。
2、 试剂三的稀释:将试剂三用蒸馏水稀释50倍,用多少配多少。(试剂三和蒸馏水1:49稀释。
3、 工作液配制:在试剂一加入100μl试剂二,充分混匀。配好的试剂4℃避光可保存一周。(若一次性测定样本较少,可按照实际用量将试剂一和试剂二按照20ml:0.1ml的比例混匀配制)
4、 将一瓶试剂四用5ml蒸馏水溶解(溶解后一周内用完)。
5、 样本测定(在96孔板中依次加入下列试剂)
选择抗凝的注意点:
①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致;
②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;
③、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.4~0.5ml血浆);
④、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后用于测定。
【友情提示】:本产品仅供科研研究使用,不得用于人体临床直接检测。避免给您带来不必要的损失,请仔细阅读购买说明!
产品名称 | 规格 | 检测方法 | 货号 |
100管/96样 | 微量法 | GOY-01S6589 |
商品介绍
测定意义 丙酮酸通过乙酰CoA连接葡萄糖、脂肪酸和氨基酸三大代谢,起着重要的枢纽作用。 测定原理: 丙酮酸与2,肼作用,生成丙酮酸-2,腙,在碱性溶液中呈樱红色。 需自备的仪器和用品: 可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰、蒸馏水。 |
试剂的组成和配制:
提取液:液体 100mL×1 瓶,4℃保存;
试剂一:液体 5mL×1 瓶,4℃保存;
试剂二:液体 200μL×1 支,4℃保存;
试剂三:液体 4mL×1 瓶,4℃保存;
试剂四:粉剂×2 瓶,4℃保存。
所需的仪器和用品:
可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿(光径 1cm)、低温离心机、移液器、研钵、冰和蒸馏水
四、超氧化物歧化酶(SOD)的测定:
建议正式实验前选取 2 个样本做预测定,了解本批样品情况,熟悉实验流程,避免实验
样本和试剂浪费!
1、样本制备
① 组织样本:
取约 0.1g 组织(水分充足的样本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4ºC 或冰浴进行
匀浆(或使用各类常见匀浆器)。4ºC×12000rpm 离心 10min,取上清作为待测液。
【注】:若增加样本量,可按照组织质量(g):提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例进行提取
② 细菌/细胞样本:
先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;取约 500 万细菌或细胞加入 1mL
提取液,超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率 200W,超声 3s,间隔 10s,重复 30 次);
12000rpm 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。
【注】:若增加样本量,可按照细菌/细胞数量(10
4):提取液(mL)为 500~1000:1 的比例进行提取。 ③ 液体样本:直接检测;若浑浊,离心后取上清检测。
注意事项:
1、试剂二为酶,不可冷冻,使用时在冰上放置。
2、对照管只需要做一管。
3、若对照管吸光值大于 1,建议将试剂二用蒸馏水稀释 7 倍后使用(10μL 试剂二原液+60μL蒸馏水)。
4、SOD为什么有的样本测定管大于对照管,对照管数值在什么范围?对照管的范围是 0.4-1。对照管吸光值过低可能是(1)试剂二或试剂四没有现配现用;
(2)没有按顺序加试剂;(3)反应时间不够,可以延长反应时间(反应时间 30min可以延长到 40min)。对照管吸光值过高可能是试剂二未按操作说明书稀释相应倍数。
若出现测定管大于对照管,可能是样本中杂质的影响太大,为了降低杂质的影响一般
将样本提取上清液用蒸馏水或提取液稀释 10倍后再测,通常可以使测定正常。
分裂周期相关蛋白Human RAB14(Ras-related protein Rab-14) ELISA Kit甲状腺素(T4)ELISA试剂盒--动物,人
猪瘟病抗体Human TACR3(Neuromedin-K receptor) ELISA KitL-缬
16号染色体开放阅读框72抗体Human TAGLN3(Transgelin-3) ELISA Kit丁香酸/3,5-二甲氧基-4-羟基苯甲酸 Syringic acid
补体C4 γ 链蛋白抗体Human ATP7A(Copper-transporting ATPase 1) ELISA Kit大黄素甲醚 Physcion
补体C4d-A蛋白抗体Human NEDD9(Enhancer of filamentation 1) ELISA KitHot Taq
补体C4b-A蛋白抗体Human HLA-DRB5(HLA class II histocompatibility antigen, DR beta 5 chain) ELISA KitT3 RNA聚合
化整合素β2/Integrin β2抗体Human S100A12(Protein S100-A12) ELISA Kit刀豆素A
化整合素β2/Integrin β2抗体Human MCTS1(Malignant T cell-amplified sequence 1) ELISA Kit邻菲啰啉盐酸盐
丙酮酸(PA)含量微量法检测试剂盒(2S,3aS,7aS)-2-羧八氢 98%Anti-MIP-1 Beta /FITC 荧光素标记 巨噬炎症因子1β 抗体IgG猪半凝集素8(GAL8)联免疫吸附测定试剂盒
4,4'-二羧二 98%Anti-MIP3 Alpha/CCL20/FITC 荧光素标记巨噬炎性蛋白3α抗体IgG猪胱天蛋白10(P10)联免疫吸附测定试剂盒
3,4'-二氨二 97%Anti-Microsporidia/FITC 荧光素标记蜜蜂微孢子虫蛋白抗体IgG猪多效生长因子(PTN)联免疫吸附测定试剂盒
2- 98%Anti-MIP-3 Beta/ELC/CCL19/FITC 荧光素标记巨噬炎性蛋白3β 抗体IgG猪白介素16(IL-16)联免疫吸附测定试剂盒
1,3-二(4-氨氧) 98%Anti-MIP4/CCL18/FITC 荧光素标记巨噬炎症蛋白4抗体IgG猪S转移pi因(GSTpi)联免疫吸附测定试剂盒
2-吡 98%Anti-Midnolin isoform Protein 1/FITC 荧光素标记中脑核仁蛋白1抗体IgG猪化外信号调节激(pERK)联免疫吸附测定试剂盒
对氨叔丁酯 98%Anti-Midnolin isoform Protein 2/FITC 荧光素标记中脑核仁蛋白2抗体IgG猪质金属蛋白抑制因子2(TIMP-2)联免疫吸附测定试剂盒
3,5-二氨三氟 98%Anti-MIF /FITC 荧光素标记巨噬移动抑制因子抗体IgG猪间隙连接蛋白(Cx)联免疫吸附测定试剂盒
4-叔丁环己 98%Anti-MITF/FITC 荧光素标记小眼相关转录因子抗体IgG猪β2糖蛋白(β2-GP)联免疫吸附测定试剂盒
间三氟 99%Anti-Mitofilin/IMMT /FITC 荧光素标记线粒体内膜蛋白抗体IgG猪α-黑色素激素(αMSH)联免疫吸附测定试剂盒
2-乙酰吡 98%Anti-MK(Midkine) 荧光素标记中期因子/肝素结合生长因子抗体IgG猪胱天蛋白9(P9)联免疫吸附测定试剂盒
2-乙酰-2-噻唑啉 97%Anti-MEK6/FITC 荧光素标记丝裂原活化蛋白激MKK6抗体IgG猪转状腺素蛋白(TTR)联免疫吸附测定试剂盒
鱼腥草 98%Anti-MKK3/FITC 荧光素标记抗丝裂原活化蛋白激MKK3/6抗体IgG猪钙腔蛋白(CALU)联免疫吸附测定试剂盒
3-巯乙酯 96%Anti-Phospho-MKK3 (Ser189)/MKK6 (Ser207) /FITC 荧光素标记化丝裂原活化蛋白激MKK3/6抗体IgG猪成纤维生长因子4(FGF4)联免疫吸附测定试剂盒
乙糠硫酯 99%Anti-Phospho-MEK6 (Ser207)/FITC 荧光素标记化丝裂原活化蛋白激MKK6抗体IgG猪天门冬氨氨转移(AST)联免疫吸附测定试剂盒