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经销商厂商性质
上海市所在地
商品属性:
产品名称 | |
规格 | 50管/24样 |
检测方法 | 可见分光光度法 |
货号 | GOY-01S6762 |
商品介绍:
测定意义
纤维素酶是由微生物产生的多组分的酶系,能水解纤维素β-1,4葡萄糖苷键生成葡萄糖,滤纸酶是其中的一个组分,研究滤纸酶活力对纤维素酶的研究具有非常重要的意义。
测定原理
滤纸酶水解滤纸产生的还原糖能与3,5-二硝基水杨酸生成红棕色氨基化合物,在540nm处有最大光吸收,在一定范围内反应液颜色深浅与还原糖的量成正比,可测定计算得滤纸酶的活力。
自备实验用品及仪器
天平、研钵、低温离心机、可见分光光度计、1 mL玻璃比色皿、恒温水浴锅。
实验方法学:
一、肝素的配制: 市售肝素冻干粉140单位/mg,1克瓶装,每瓶140,000单位,称取0.1克肝素冻干粉,加生理盐水5ml,配成2800单位/ml。取50~100μl湿润管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不会凝固。老鼠血易凝固,所以最好更浓一些。可以取0.1克肝素冻干粉,加3ml生理盐水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。 肝素抗凝管的制备:取0.1克肝素冻干粉,加2.5ml生理盐水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,湿润管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),横向转动,每隔5~10分钟转动一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。 | 二、血液样本的收集: 全血根据收集的条件,分成不抗凝和抗凝两种。同时,不抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血清;抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血浆。 1、不抗凝收集血清:将收集好的全血,静置1~2小时,直接低速离心分离出血清待用或保存。 2、抗凝收集血浆: 收集抗凝全血,轻轻颠倒充分抗凝后,可直接低速离心分离血浆(也可静置半小时左右再低速离心分离血浆)待用或保存。根据不同抗凝剂的性能特征,选择合适的抗凝剂。实验室常用的抗凝剂有肝素的各种盐、EDTA。 |
选择抗凝的注意点:
①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致;
②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;
③、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.4~0.5ml血浆);
④、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后
用于测定。
氯离子通道蛋白2抗体Human PDX1(Pancreas/duodenum homeobox protein 1) ELISA Kit木犀草苷 Cynaroside
C型凝集素结构域家族9成员A抗体Human C19orf10(UPF0556 protein C19orf10) ELISA Kit去甲基盐酸
C型凝集素结构域家族9成员A抗体Human UBE3A(Ubiquitin-protein ligase E3A) ELISA Kit二甲酚橙四钠
脑钙粘蛋白12抗体Human ENTPD1(Ectonucleoside triphosphate diphosphohydrolase 1) ELISA Kit苯甲酸
钙粘蛋白20抗体Human MAPK8(Mitogen-activated protein kinase 8) ELISA Kit二十七烷
钙粘蛋白29抗体Human CHIA(Acidic mammalian chitinase) ELISA Kit人黑色素(MSH)ELISA试剂盒,MSH ELISA kit
CD200受体抗体Human AVPR1B(Vasopressin V1b receptor) ELISA Kit人抗网硬蛋白抗体(ARA)ELISA试剂盒, ARA ELISA kit
钙粘蛋白26抗体Human LILRB2(Leukocyte immunoglobulin-like receptor subfamily B member 2) ELISA Kit人抗天然脱氧核糖核酸抗体(n-DNA-Ab)ELISA试剂盒,n-DNA-Ab ELISA
滤纸酶可见分光光度法检测试剂盒犬脂蛋白脂(LPL)免疫试剂盒进口、组装
牛乙酰辅A(acetyl-CoA)免疫试剂盒*直销
α-黑色素细胞刺激素(α-MSH)免疫试剂盒*直销
鸡γ干扰素(IFN-γ)免疫试剂盒进口、组装
Q热科克斯体1(Q fever)抗体(IgA)免疫试剂盒进口、组装
鼻病毒(RV)抗体(IgA)免疫试剂盒*直销
牛白三烯B4(LT-B4)免疫试剂盒进口、组装
鱼雄烯二酮(ASD)免疫试剂盒现货供应
小鼠前白蛋白(PA)免疫试剂盒*直销
小鼠CXC趋化因子配体1(CXCL1)免疫试剂盒*直销
操作步骤:
实验开始前,各试剂均应平衡至室温(试剂不能直接在37℃溶解);试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量,如样品浓度过高时,应对样品进行稀释,以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围,计算时再乘以相应的稀释倍数。
1. 加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。
2. 弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100μl(在使用前一小时内配制),酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。
3. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,大约400μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。
4. 每孔加检测溶液B工作液(同检测A工作液) 100μl,酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。
5. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶标板加上覆膜37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。
7. 依序每孔加终止溶液50μl,终止反应,此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。
8. 用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。