亚硝酸还原酶(NiR)可见分光光度法

亚硝酸还原酶(NiR)可见分光光度法

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产品简介

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详细介绍

商品介绍

测定意义

硝酸还原酶(NiR)是一类能催化亚硝酸盐还原的酶,广泛存在于微生物及植物体内,是自然界氮循环过程中的关键酶,可以将亚硝酸盐降解为NONH3,从而减少环境中亚硝态氮的积累,降低因亚硝酸盐累积而造成的对生物体的毒害作用。

测定原理

亚硝酸还原酶可将NO2—还原为NO,使样品中参与重氮化反应生成紫红色化合物的NO2—减少,即540nm处吸光值的变化可反应亚硝酸还原酶的活性。

需自备的仪器和用品

天平、研钵、可见分光光度计、水浴锅、低温离心机、1mL玻璃比色皿。

试剂的组成和配制:

提取液:液体 100mL×1 瓶,4℃保存;

试剂一:液体 5mL×1 瓶,4℃保存;

试剂二:液体 200μL×1 支,4℃保存;

试剂三:液体 4mL×1 瓶,4℃保存;

试剂四:粉剂×2 瓶,4℃保存。

【友情提示】:本产品仅供科研研究使用,不得用于人体临床直接检测。避免给您带来不必要的损失,请仔细阅读购买说明!

产品名称

规格

检测方法

货号

亚硝酸还原酶(NiR)可见分光光度法

50管/24样

可见分光光度法

GOY-01S6481


QQ截图20220307153443.png

所需的仪器和用品:

可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿(光径 1cm)、低温离心机、移液器、研钵、冰和蒸馏水

四、超氧化物歧化酶(SOD)的测定:

建议正式实验前选取 2 个样本做预测定,了解本批样品情况,熟悉实验流程,避免实验

样本和试剂浪费!

1、样本制备

① 组织样本:

取约 0.1g 组织(水分充足的样本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4ºC 或冰浴进行

匀浆(或使用各类常见匀浆器)。4ºC×12000rpm 离心 10min,取上清作为待测液。

【注】:若增加样本量,可按照组织质量(g):提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例进行提取

② 细菌/细胞样本:

先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;取约 500 万细菌或细胞加入 1mL

提取液,超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率 200W,超声 3s,间隔 10s,重复 30 次);

12000rpm 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。

【注】:若增加样本量,可按照细菌/细胞数量(10

4):提取液(mL)为 500~1000:1 的比例进行提取。 ③ 液体样本:直接检测;若浑浊,离心后取上清检测。

注意事项:

1、试剂二为酶,不可冷冻,使用时在冰上放置。

2、对照管只需要做一管。

3、若对照管吸光值大于 1,建议将试剂二用蒸馏水稀释 7 倍后使用(10μL 试剂二原液+60μL蒸馏水)。

4、SOD为什么有的样本测定管大于对照管,对照管数值在什么范围?对照管的范围是 0.4-1。对照管吸光值过低可能是(1)试剂二或试剂四没有现配现用;

2)没有按顺序加试剂;(3)反应时间不够,可以延长反应时间(反应时间 30min可以延长到 40min)。对照管吸光值过高可能是试剂二未按操作说明书稀释相应倍数。

若出现测定管大于对照管,可能是样本中杂质的影响太大,为了降低杂质的影响一般

将样本提取上清液用蒸馏水或提取液稀释 10倍后再测,通常可以使测定正常。

测定步骤:

1、 酶标仪预热30min以上,调节波长至450nm。

2、 试剂三的稀释:将试剂三用蒸馏水稀释50倍,用多少配多少。(试剂三和蒸馏水1:49稀释。

3、 工作液配制:在试剂一加入100μl试剂二,充分混匀。配好的试剂4℃避光可保存一周。(若一次性测定样本较少,可按照实际用量将试剂一和试剂二按照20ml:0.1ml的比例混匀配制)

4、 将一瓶试剂四用5ml蒸馏水溶解(溶解后一周内用完)。

5、 样本测定(在96孔板中依次加入下列试剂)

选择抗凝的注意点:

①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致;

②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;

③、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.4~0.5ml血浆);

④、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后用于测定。

乙二四乙酸铁钠 CP,98%甲基烯酸异辛酯 99%Anti-IGFBP-4/IBP4/FITC  荧光素标记胰岛素样生长因子结合蛋白-4抗体IgG

乙二四乙酸铁钠  13.5-18.5% Fe basis甲基烯酰氧乙基基氯化铵 75 wt. % in H2OAnti-IGFBP-5/IBP5 /FITC  荧光素标记胰岛素样生长因子结合蛋白-5抗体IgG

乙二四乙酸二钠镁 98%锆粉 99.95% metals basis ((不包括铪))Anti-IGSF8/CD3/FITC  荧光素标记球蛋超家族成员8抗体IgG

碳酸乙烯酯 98.0%锆粉 99.5% metals basis ((不包括铪)),200 目Anti-IKB Alpha/FITC  荧光素标记KB抑制蛋白α抗体IgG

碳酸乙烯酯 99%偶氮二异戊 98%Anti-IKB alpha(phospho S32 + S36)/FITC  荧光素标记化KB抑制蛋白α抗体IgG

曙红Y,溶 AR2,4-二羟基二苯甲酮 99%Anti-IKB Beta/FITC  荧光素标记KB抑制蛋白β抗体IgG

曙红Y,溶 Biological stain2-羟基-4-甲氧基-5-磺酸二苯甲酮 98%Anti-phospho-IkB beta (Ser23)/FITC  荧光素标记化KB抑制蛋白β抗体IgG

曙红Y,溶 95%2-羟基-4-正辛氧基二苯甲酮 99%Anti-IL-1 Alpha /FITC  荧光素标记白介素1α抗体IgG

亚硝酸还原酶(NiR)可见分光光度法升麻素苷 分析标准品,>98% Anti-GIP/FITC  荧光素标记胃泌素抑制肽抗体IgG大鼠纤(FG)联免疫吸附测定试剂盒

血根碱 分析标准品,≥98% (HPLC)Anti-TNFRSF18/FITC  荧光素标记糖皮质激素诱导肿瘤坏死因子受体抗体IgG大鼠甘露糖受体C1(MRC1)联免疫吸附测定试剂盒

血根碱 ≥98% (HPLC)Anti-GIG8/ID2/FITC  荧光素标记DNA结合抑制因子2抗体IgG大鼠脂酰乙N-转移(PEMT)联免疫吸附测定试剂盒

柴胡皂苷C 分析标准品,>98%Anti-Glasses Snake poison Protein/FITC  荧光素标记抗眼镜蛇蛇蛋白抗体(眼镜蛇)IgG大鼠转铁蛋白(TRF)联免疫吸附测定试剂盒

五味子乙 分析标准品,>98% Anti-GLI1/FITC  荧光素标记下游转录因子Gli1蛋白抗体IgG大鼠低密度脂蛋白(VLDL)联免疫吸附测定试剂盒

柴胡皂苷A 分析标准品,≥98%Anti-GLP-1(7-36)/FITC  荧光素标记兔抗胰高血糖素样肽-1抗体IgG大鼠山梨脱氢(SDH)联免疫吸附测定试剂盒

柴胡皂苷D 分析标准品,≥98%Anti-GLP-1/KG-31 /FITC  荧光素标记胰高血糖素样肽-1抗体IgG大鼠原片段F1+2(F1+2)联免疫吸附测定试剂盒

五味子素 分析标准品,>98% Anti-GLP-2/FITC  荧光素标记胰高血糖素样肽-2抗体IgG大鼠血管舒张剂激活蛋白(VASP)联免疫吸附测定试剂盒

斯皮诺素 分析标准品,≥97%Anti-GLP-2/FITC  荧光素标记胰高血糖素样肽-2抗体IgG大鼠DNA转移3A(DNMT3A)联免疫吸附测定试剂盒

五味子乙素 分析标准品,>98%Anti-Glu-Glu Tag/FITC  荧光素标记兔抗Glu-Glu Tag标签抗体IgG大鼠血管粘附蛋白1(VAP-1)联免疫吸附测定试剂盒

五味子 分析标准品,>98% Anti-GLUR2/FITC  荧光素标记谷氨受体2抗体IgG大鼠载脂蛋白A1 (ApoA1) 联免疫吸附测定试剂盒

五味子酯 分析标准品,>98% Anti-GLUR3/FITC  荧光素标记谷氨受体3抗体IgG大鼠异柠檬脱氢 (ICD) 联免疫吸附测定试剂盒

五味子素 分析标准品,≥98%Anti-GLUR4/FITC  荧光素标记谷氨受体4抗体IgG大鼠α酮戊二脱氢 (α-KGDHC) 联免疫吸附测定试剂盒

延胡索乙素 分析标准品,>97%Anti-GLP-1R/FITC  荧光素标记兔抗胰高血糖素样肽-1受体抗体IgG大鼠NADH脱氢1 (ND1) 联免疫吸附测定试剂盒

延胡索乙素 97%Anti-GLUT1/FITC  荧光素标记葡萄糖转运蛋白1抗体IgG大鼠6-果糖激 (6-PFK)联免疫吸附测定试剂盒

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