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选择抗凝的注意点:
①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致;
②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;
③、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.4~0.5ml血浆);
④、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后
用于测定。
商品属性:
产品名称 | |
规格 | 100管/96样 |
检测方法 | 微量法 |
货号 | GOY-01S6488 |
商品介绍:
测定意义
NO(Nitric Oxide,NO)广泛分布于生物体内神经、循环、呼吸、消化、泌尿生殖等系统中,特别是神经组织中较丰富。它作为细胞间及细胞内的信息物质,发挥信号传递的作用,是一种新型的生物信使分子,在机体的生理、病理过程中起着重要的作用。
测定原理:
NO在体内或水溶液中极易氧化生成NO2—,在酸性条件下,NO2—与重氮盐磺酸胺生成重氮化合物,进一步与萘基乙烯基二胺偶合,产物在550nm处有特征吸收峰,测定其吸光值,可以计算NO含量。为了排除样品色素等的影响,每个样品需做对照管。
自备实验用品及仪器:
天平、研钵或匀浆器、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、蒸馏水。
实验方法学:
一、肝素的配制: 市售肝素冻干粉140单位/mg,1克瓶装,每瓶140,000单位,称取0.1克肝素冻干粉,加生理盐水5ml,配成2800单位/ml。取50~100μl湿润管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不会凝固。老鼠血易凝固,所以最好更浓一些。可以取0.1克肝素冻干粉,加3ml生理盐水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。 肝素抗凝管的制备:取0.1克肝素冻干粉,加2.5ml生理盐水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,湿润管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),横向转动,每隔5~10分钟转动一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。 | 二、血液样本的收集: 全血根据收集的条件,分成不抗凝和抗凝两种。同时,不抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血清;抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血浆。 1、不抗凝收集血清:将收集好的全血,静置1~2小时,直接低速离心分离出血清待用或保存。 2、抗凝收集血浆: 收集抗凝全血,轻轻颠倒充分抗凝后,可直接低速离心分离血浆(也可静置半小时左右再低速离心分离血浆)待用或保存。根据不同抗凝剂的性能特征,选择合适的抗凝剂。实验室常用的抗凝剂有肝素的各种盐、EDTA。 |
操作步骤:
实验开始前,各试剂均应平衡至室温(试剂不能直接在37℃溶解);试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量,如样品浓度过高时,应对样品进行稀释,以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围,计算时再乘以相应的稀释倍数。
1. 加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。
2. 弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100μl(在使用前一小时内配制),酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。
3. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,大约400μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。
4. 每孔加检测溶液B工作液(同检测A工作液) 100μl,酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。
5. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶标板加上覆膜37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。
7. 依序每孔加终止溶液50μl,终止反应,此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。
8. 用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。
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NO含量微量法检测试剂盒雾化镍粉 99.8%,200目Podoplanin Protein 平足蛋白抗原猴红膜蛋白(EMP)联免疫吸附测定试剂盒
锡 AR,100目Pokemon (POK Erythroid Myeloid Ontogenic factor) “扑克蒙”蛋白又称“波克曼”蛋白猴瘦素(LEP)联免疫吸附测定试剂盒
AR, ≥99.5%Polycystin 1(Polycystic Kidney Disease 1) 多囊肾蛋白1抗原猴过氧化还原2(PRDX2)联免疫吸附测定试剂盒
AR,99%Polycystin 2(polycystic kidney disease 2) 多囊肾蛋白2抗体猴谷氨脱羧2(GAD2)联免疫吸附测定试剂盒
for HPLC, ≥99.5%phospho-AKT1/PKB1/2/3(pThr473)peptide 化蛋白激B抗原(丝氨化位点:473)猴心肌钙黏蛋白(H-Cadherin)联免疫吸附测定试剂盒
邻二 for HPLC,99%RKIP(Raf kinase inhibitor protein) Raf激抑制蛋白抗原猴硒蛋白1(SEP1)联免疫吸附测定试剂盒
海因 98%pre-X protein[Hepatitis B virus]N-Terminus 乙肝病pre-X蛋白抗原(N端)猴Toll样受体9(TLR9/CD289)联免疫吸附测定试剂盒
吩恶 98%pre-X protein(CT)[Hepatitis B virus C-Terminus] 乙肝病pre-X蛋白抗原(C端)猴金属硫蛋白1 (MT1)联免疫吸附测定试剂盒
氧化亚铜 AR,95.0%PHD3 (Egln3; HIF-prolyl hydroxylase 3) 脯氨羟化(多肽)猴脂联素受体2(ADIPOR2)联免疫吸附测定试剂盒
氧化亚铜 CP,90.0%ADAMTS-7(a disintegrin-like and metalloprotease-7 ) 新型金属质蛋白(抗原)猴血栓调节蛋白(TM)联免疫吸附测定试剂盒
氧化亚铜 99%Adiponectin 脂联素(多肽片断抗原)猴胰多肽(PP)联免疫吸附测定试剂盒
2,4-二酚 >98.0%(GC)Adipo R1(adiponectin receptor 1) 脂联素受体-1(抗原)猴核孔蛋白98kda(NUP98)联免疫吸附测定试剂盒
2,6-二酚 AR,99.0%Adipo R2(adiponectin receptor 2) 脂联素受体-2(抗原)猴糖化白蛋白(GA)联免疫吸附测定试剂盒
2,4-二氧乙 97%PSAP/PAP peptide 前列腺性抗原猴肌-3-激2α肽(PI3K2α)联免疫吸附测定试剂盒
2,4-二氧乙钠 98%PSAP/PAP peptide (human) 前列腺性抗原(人)猴抗状腺球蛋白抗体(ATGA/TGAB)联免疫吸附测定试剂盒