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测定步骤:
1、 酶标仪预热30min以上,调节波长至450nm。
2、 试剂三的稀释:将试剂三用蒸馏水稀释50倍,用多少配多少。(试剂三和蒸馏水1:49稀释。
3、 工作液配制:在试剂一加入100μl试剂二,充分混匀。配好的试剂4℃避光可保存一周。(若一次性测定样本较少,可按照实际用量将试剂一和试剂二按照20ml:0.1ml的比例混匀配制)
4、 将一瓶试剂四用5ml蒸馏水溶解(溶解后一周内用完)。
5、 样本测定(在96孔板中依次加入下列试剂)
选择抗凝的注意点:
①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致;
②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;
③、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.4~0.5ml血浆);
④、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后用于测定。
【友情提示】:本产品仅供科研研究使用,不得用于人体临床直接检测。避免给您带来不必要的损失,请仔细阅读购买说明!
产品名称 | 规格 | 检测方法 | 货号 |
50管/48样 | 可见分光光度法 | GOY-01S6489 |
商品介绍
测定意义 NO(Nitric Oxide,NO)广泛分布于生物体内神经、循环、呼吸、消化、泌尿生殖等系统中,特别是神经组织中较丰富。它作为细胞间及细胞内的信息物质,发挥信号传递的作用,是一种新型的生物信使分子,在机体的生理、病理过程中起着重要的作用。 测定原理: NO在体内或水溶液中极易氧化生成NO2—,在酸性条件下,NO2—与重氮盐磺酸胺生成重氮化合物,进一步与萘基乙烯基二胺偶合,产物在550nm处有特征吸收峰,测定其吸光值,可以计算NO含量。为了排除样品色素等的影响,每个样品需做对照管。 自备实验用品及仪器: 天平、研钵或匀浆器、可见分光光度计/酶标仪、1 mL玻璃比色皿/96孔板、蒸馏水。 |
试剂的组成和配制:
提取液:液体 100mL×1 瓶,4℃保存;
试剂一:液体 5mL×1 瓶,4℃保存;
试剂二:液体 200μL×1 支,4℃保存;
试剂三:液体 4mL×1 瓶,4℃保存;
试剂四:粉剂×2 瓶,4℃保存。
所需的仪器和用品:
可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿(光径 1cm)、低温离心机、移液器、研钵、冰和蒸馏水
四、超氧化物歧化酶(SOD)的测定:
建议正式实验前选取 2 个样本做预测定,了解本批样品情况,熟悉实验流程,避免实验
样本和试剂浪费!
1、样本制备
① 组织样本:
取约 0.1g 组织(水分充足的样本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4ºC 或冰浴进行
匀浆(或使用各类常见匀浆器)。4ºC×12000rpm 离心 10min,取上清作为待测液。
【注】:若增加样本量,可按照组织质量(g):提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例进行提取
② 细菌/细胞样本:
先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;取约 500 万细菌或细胞加入 1mL
提取液,超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率 200W,超声 3s,间隔 10s,重复 30 次);
12000rpm 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。
【注】:若增加样本量,可按照细菌/细胞数量(10
4):提取液(mL)为 500~1000:1 的比例进行提取。 ③ 液体样本:直接检测;若浑浊,离心后取上清检测。
注意事项:
1、试剂二为酶,不可冷冻,使用时在冰上放置。
2、对照管只需要做一管。
3、若对照管吸光值大于 1,建议将试剂二用蒸馏水稀释 7 倍后使用(10μL 试剂二原液+60μL蒸馏水)。
4、SOD为什么有的样本测定管大于对照管,对照管数值在什么范围?对照管的范围是 0.4-1。对照管吸光值过低可能是(1)试剂二或试剂四没有现配现用;
(2)没有按顺序加试剂;(3)反应时间不够,可以延长反应时间(反应时间 30min可以延长到 40min)。对照管吸光值过高可能是试剂二未按操作说明书稀释相应倍数。
若出现测定管大于对照管,可能是样本中杂质的影响太大,为了降低杂质的影响一般
将样本提取上清液用蒸馏水或提取液稀释 10倍后再测,通常可以使测定正常。
10号染色体开放阅读框81抗体Human GPR120(G Protein Coupled Receptor 120) ELISA Kit人抗浦肯野抗体/抗Yo抗体(PCA-1/Yo)ELISA试剂盒, PCA-1/Yo ELISA
19号染色体开放阅读框47抗体Human GPRC5A(G Protein Coupled Receptor, Family C, Group 5, Member A) ELISA Kit人葡萄球蛋白A(SPA)ELISA试剂盒, SPA ELISA
19号染色体开放阅读框54抗体Human GPR37(G Protein Coupled Receptor 37) ELISA Kit人单氧化(MAO)ELISA试剂盒,MAO ELISA
N-乙酰半乳糖糖蛋白3、β-半乳糖转移1抗体Human GR(Glutathione Reductase) ELISA Kit人二氢嘧样2(DPYSL2)ELISA试剂盒,
19号染色体开放阅读框18抗体Human GIF(Gastric Intrinsic Factor) ELISA Kit人球蛋白重链可变区(IgHV)ELISA试剂盒,
19号染色体开放阅读框21抗体Human GPR120(G Protein Coupled Receptor 120) ELISA Kit人SH2携带蛋白(SHC/SLP-76)ELISA试剂盒,
19号染色体开放阅读框24抗体Human GLDL(Glycated Low Density Lipoprotein) ELISA Kit人胶原凝集素(Collectin)ELISA试剂盒,
Ⅱ型胶原α1蛋白/软骨钙素抗体Human GJβ1(Gap Junction Protein Beta 1) ELISA Kit大鼠白介素7(IL-7)ELISA试剂盒,
NO含量可见分光光度法检测试剂盒4-氟 99%兔可溶性凋亡相关因子(sFAS/Apo-1)免疫试剂盒钙离子通道a1F亚型抗体Rabbit Anti-mouse IgG/APC APC标记的兔抗小鼠IgG
2-氟-4-(三氟) 97%兔抗糖蛋白抗体(GP)免疫试剂盒钙调B亚B1抗体Rabbit Anti-mouse IgG/AP 碱性(AP)标记的兔抗小鼠IgG
3-羟 97%兔抗平滑肌抗体(ASMA) 免疫试剂盒钙调蛋白激激α抗体CaMKKαRabbit Anti-mouse IgG/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647标记的兔抗小鼠IgG
2-羟 97%兔抗III(SERPINC1)免疫试剂盒环腺苷应答元件结合蛋白H抗体Rabbit Anti-mouse IgG/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555标记的兔抗小鼠IgG
3-羟 97%兔抗脑组织抗体(ABAb)免疫试剂盒化周期检测点激1抗体Rabbit Anti-mouse IgG/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488标记的兔抗小鼠IgG
4-异喹啉盐盐 98%兔抗内皮抗体(AECA)免疫试剂盒钙激活蛋白12抗体Rabbit Anti-mouse IgG/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350标记的兔抗小鼠IgG
4-异 98%兔抗单核抗体(AMA)免疫试剂盒20号染色体开放阅读框134抗体Rabbit anti-mouse IgG whole serum 兔抗小鼠IgG抗血清
4-异氧 98%兔胶原吡交联(PYD)免疫试剂盒B粘附分子CD239抗体Rabbit Anti-mouse IgG 兔抗小鼠IgG
6-氧-2-萘 97%兔降钙素原(PCT)免疫试剂盒胰羧肽B2抗体Rabbit Anti-Monkey IgM/RBITC 罗丹明标记的兔抗猴IgM
4-氧-2-三氟 96%兔降钙素因相关肽(CGRP)免疫试剂盒视网膜色素变性蛋白26抗体Rabbit Anti-Monkey IgM/PE-CY5 PE-CY5标记的兔抗猴IgM
3-氧羰 97%兔状旁(PTH)免疫试剂盒过氧化物体肉碱酰转移抗体Rabbit Anti-Monkey IgM/PE-Cy3 PE-Cy3标记的兔抗猴IgM
4-酯 97%兔质衍生因子-1(SDF-1/CXCL12)免疫试剂盒16号染色体开放阅读框7抗体Rabbit Anti-Monkey IgM/HRP 辣根过氧化物标记的兔抗猴IgM
4-氧-2- 97%兔质金属蛋白2/明胶A(MMP-2/Gelatinase A)免疫试剂盒16号染色体开放阅读框57抗体Rabbit Anti-Monkey IgM/Gold 胶体金标记的兔抗猴IgM
2-硫 98%兔质金属蛋白1(MMP-1)免疫试剂盒3号染色体开放阅读框37抗体Rabbit Anti-Monkey IgM/FITC FITC标记的兔抗猴IgM
3-硫 97%兔环腺苷(cAMP)免疫试剂盒3号染色体开放阅读框49抗体Rabbit Anti-Monkey IgM/Cy3 Cy3标记的兔抗猴IgM