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操作步骤:
实验开始前,各试剂均应平衡至室温(试剂不能直接在37℃溶解);试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量,如样品浓度过高时,应对样品进行稀释,以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围,计算时再乘以相应的稀释倍数。
1. 加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。
2. 弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100μl(在使用前一小时内配制),酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。
3. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,大约400μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。
4. 每孔加检测溶液B工作液(同检测A工作液) 100μl,酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。
5. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶标板加上覆膜37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。
7. 依序每孔加终止溶液50μl,终止反应,此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。
8. 用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。
商品属性:
产品名称 | |
规格 | 100管/96样 |
检测方法 | 微量法 |
货号 | GOY-01S6496 |
商品介绍:
测定意义
硝态氮是植物最主要的氮源。植物体内硝态氮含量反映了土壤中硝态氮的供应情况,可作为土壤氮肥的指标。测定植物体内的硝态氮含量,不仅能够反映出植物的氮素营养情况,而且对鉴定蔬菜和以植物为原料的加工制品的品质也有重要的意义。
测定原理
在浓酸条件下,NO3-与水杨酸反应,生成硝基水杨酸,硝基水杨酸在碱性条件下(PH>12)呈黄色,在一定范围内,其颜色深浅与含量成正比,可比色测定计算得硝态氮含量。
自备实验用品及仪器
蒸馏水、天平、常温离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、恒温水浴锅。
实验方法学:
一、肝素的配制: 市售肝素冻干粉140单位/mg,1克瓶装,每瓶140,000单位,称取0.1克肝素冻干粉,加生理盐水5ml,配成2800单位/ml。取50~100μl湿润管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不会凝固。老鼠血易凝固,所以最好更浓一些。可以取0.1克肝素冻干粉,加3ml生理盐水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。 肝素抗凝管的制备:取0.1克肝素冻干粉,加2.5ml生理盐水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,湿润管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),横向转动,每隔5~10分钟转动一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。 | 二、血液样本的收集: 全血根据收集的条件,分成不抗凝和抗凝两种。同时,不抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血清;抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血浆。 1、不抗凝收集血清:将收集好的全血,静置1~2小时,直接低速离心分离出血清待用或保存。 2、抗凝收集血浆: 收集抗凝全血,轻轻颠倒充分抗凝后,可直接低速离心分离血浆(也可静置半小时左右再低速离心分离血浆)待用或保存。根据不同抗凝剂的性能特征,选择合适的抗凝剂。实验室常用的抗凝剂有肝素的各种盐、EDTA。 |
选择抗凝的注意点:
①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致;
②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;
③、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.4~0.5ml血浆);
④、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后
用于测定。
硒基酸 99%2-溴-4-氟甲苯 98%ASD(Human Androstenedione) ELISA Kit 人雄烯二酮
1-芘丁酸 99%2-溴-5-氟甲苯 98%E3(Human Estriol) ELISA Kit 人雌三
吡 无水级2-溴-6-氟甲苯 98%17-OHP(Human 17-Hydroxyprogesterone) ELISA Kit 人17羟孕酮
晶体, ≥99%3-溴-2-氟甲苯 98%Human Tri-iodothyronine ELISA Kit 人状腺原
五氟酸酐 AR,98.0%3-溴-4-氟甲苯 99%Human thyroxineT4 ELISA Kit 人甲状腺素
喹啉黄 95%4-溴-2-氟甲苯 99%FT4(Human Free Thyroxine) ELISA Kit 人游离甲状腺素
喹哪红 AR4-溴-3-氟甲苯 98%Free-T3(Human Free Tri-iodothyronine Indes) ELISA Kit 人游离状腺原
罗丹明110 激光级5-溴-2-氟甲苯 98%NN-T4(Human Neonatal Thyroxine) ELISA Kit 人新生甲状腺素
植物硝态氮微量法检测试剂盒2,4-二酚 分析标准品T激活核转录因子4抗体CD44v7 CD44V7抗体
葡萄糖钙 99%脑低密度脂蛋白受体蛋白1抗体CD44v6 CD44V6抗体
葡萄糖钙 USP级轴突蛋白2抗体CD44v5 CD44V5抗体
D-葡萄糖钠 AR,99.0%肾小球粘附分子受体抗体CD44v4 CD44V4抗体
D-葡萄糖钠 药用级神经生长调节蛋白1抗体CD44v10 CD44V10抗体
D-葡萄糖溶液,49-53 wt. % in H2O轴突生长诱向因子G2抗体CD44/HCAM/PGP1 CD44抗体
葡萄糖亚铁 USP级黑色素瘤硫软骨素蛋白多糖4抗体CD44/HCAM/PGP1 CD44抗体
葡萄糖亚铁 98%,试剂级NDST1蛋白抗体CD43/SPN CD43抗体
葡萄糖镁 USP级EGR1结合蛋白2抗体CD40L CD40L抗体
葡萄糖 AR硝化α-突触核蛋白CD40/TNFRSF5 肿瘤坏死因子受体超家族成员5抗体
葡萄糖 药用级,USPNK2转录样蛋白B抗体CD4 CD4抗体
葡萄糖锌 98%神经正五聚体1抗体CD4 CD4抗体
中性氧化铝 100-200目核孔蛋白NUP160抗体CD4 CD4抗体
碱性氧化铝 100-200目核分离因C蛋白抗体CD38 CD38抗体
性氧化铝 100-200目化核分离因C蛋白抗体CD38 CD38抗体