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选择抗凝的注意点:
①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致;
②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;
③、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.4~0.5ml血浆);
④、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后
用于测定。
商品属性:
产品名称 | |
规格 | 100管/96样 |
检测方法 | 微量法 |
货号 | GOY-01S6498 |
商品介绍:
测定意义
氮素是构成生物体的一种必需元素,自然界中的氮素循环包括许多转化作用。空气中的氮气被固氮微生物及植物与微生物的共生体固定成氨态氮,经过硝化微生物的作用转化成硝态氮,后者被植物或微生物同化成有机氮化物,植物组织氨氮含量可反映植物受胁迫的程度。
测定原理
铵态氮在强碱性介质中与次氯酸盐和作用,生成水溶性染料靛酚蓝,在625nm处有特征吸收峰,吸光值与铵态氮含量成正比。
自备实验用品及仪器
天平、常温离心机、酶标仪、96孔板、蒸馏水。
实验方法学:
一、肝素的配制: 市售肝素冻干粉140单位/mg,1克瓶装,每瓶140,000单位,称取0.1克肝素冻干粉,加生理盐水5ml,配成2800单位/ml。取50~100μl湿润管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不会凝固。老鼠血易凝固,所以最好更浓一些。可以取0.1克肝素冻干粉,加3ml生理盐水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。 肝素抗凝管的制备:取0.1克肝素冻干粉,加2.5ml生理盐水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,湿润管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),横向转动,每隔5~10分钟转动一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。 | 二、血液样本的收集: 全血根据收集的条件,分成不抗凝和抗凝两种。同时,不抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血清;抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血浆。 1、不抗凝收集血清:将收集好的全血,静置1~2小时,直接低速离心分离出血清待用或保存。 2、抗凝收集血浆: 收集抗凝全血,轻轻颠倒充分抗凝后,可直接低速离心分离血浆(也可静置半小时左右再低速离心分离血浆)待用或保存。根据不同抗凝剂的性能特征,选择合适的抗凝剂。实验室常用的抗凝剂有肝素的各种盐、EDTA。 |
操作步骤:
实验开始前,各试剂均应平衡至室温(试剂不能直接在37℃溶解);试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量,如样品浓度过高时,应对样品进行稀释,以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围,计算时再乘以相应的稀释倍数。
1. 加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。
2. 弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100μl(在使用前一小时内配制),酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。
3. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,大约400μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。
4. 每孔加检测溶液B工作液(同检测A工作液) 100μl,酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。
5. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶标板加上覆膜37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。
7. 依序每孔加终止溶液50μl,终止反应,此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。
8. 用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。
二乙基锌 1.0 M in Hexane3,4-二氯苯甲酰氯 97%ASO(Human anti-streptolysin O) ELISA Kit 人抗链球菌溶血素O/抗O
苯基锂 1.5M 乙溶液2,6-二氯苯甲酰氯 98%ACA(Human adrenal cortex antibody) ELISA Kit 人皮质抗体
苯基锂 1.7M in THF2,3-二氯苯甲酰氯 98%GBM(Human glomerular basement membrane antibogy) ELISA Kit 人抗肾小球基底膜抗体
乙酸 98%对乙基苯甲酰氯 97%BMG/ Beta2-MG(Human Beta2-microglobulin) ELISA Kit 人β2微球蛋白
乙酸 70%溶液4-甲酸乙酯 99%ANX- V (Human Annexin V ) ELISA Kit 人膜联蛋白Ⅴ
金刚烷 99.0%对氟苯甲酰氯 98%TBM(Human tubular basement membrane antibogy) ELISA Kit 人抗肾小管基底膜抗体
2-金刚烷酮 98%邻氟苯甲酰氯 97%AP13(Human apelin 13) ELISA Kit 人apelin 13
2,4-噻唑烷二酮 99%3-氟苯甲酰氯 98%AP36(Human Apelin 36) ELISA Kit 人Apelin 36
植物铵态氮微量法检测试剂盒汞标准溶液10.00mg/L,溶剂:Anti-Caspase-13/FITC 荧光素标记半胱蛋白蛋白-13抗体IgG鸡α羟丁脱氢(αHBDH)联免疫吸附测定试剂盒
间酚标准溶液 1000μg/ml,溶剂:Anti-Phospho-Caspase-9 (Thr125) /FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠化白介素1-β转化样凋亡蛋白6抗体IgG鸡cGMP依赖性蛋白激I (PRKG1)联免疫吸附测定试剂盒
邻酚标准溶液 1000μg/ml,溶剂:Anti- Alpha-Catenin/ Alpha-cats /FITC 荧光素标记α-连环蛋白抗体(α-α链接素)IgG鸡胰岛素样生长因子2(IGF-2)联免疫吸附测定试剂盒
邻硝标准溶液 1000μg/ml,溶剂:Anti- Beta-catenin/ Beta-cats /FITC 荧光素标记 β-连环蛋白抗体IgG鸡ⅩⅢ(F13)联免疫吸附测定试剂盒
间硝标准溶液 1000μg/ml,溶剂:Anti-Phospho- Beta-Catenin (Ser33/37) /FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠化β 连环素蛋白抗体IgG鸡促睡眠肽α(δSIP-α)联免疫吸附测定试剂盒
水质镍标样 浓度范围:0.959-1.01(mg/L),分析标准品 anti-p- Beta catenin/FITC 荧光素标记化β-连环蛋白抗体IgG鸡神经纤维网蛋白1(NRP1)联免疫吸附测定试剂盒
对酚标准溶液 1000μg/ml,溶剂:Anti-Phospho- Beta-Catenin (Ser45)/FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠化β 连环素蛋白抗体IgG鸡信号传导转录激活因子5A(STAT5A)联免疫吸附测定试剂盒
对酚标准溶液1009mg/L,溶剂:Anti-Phospho- Beta-Catenin (Ser552) /FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠化β 连环素蛋白抗体IgG鸡B分化因子(BCDF)联免疫吸附测定试剂盒
中对标样 浓度范围:1004±5ug/mL,分析标准品Anti-Phospho- Beta-Catenin (Ser675) /FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠化β 连环素蛋白抗体IgG鸡甘露聚糖结合凝集素相关丝氨蛋白(MASP)联免疫吸附测定试剂盒
镍标准溶液 500mg/L,溶剂:1%硝Anti-Phospho- Beta-Catenin (Thr41/Ser45) /FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠化β 连环素蛋白抗体IgG鸡低氧上调节因子1(HYOU1)联免疫吸附测定试剂盒
亚硝盐标准溶液 100mg/L,溶剂:水Anti- Gamma-Catenin/ Gamma-cats /FITC 荧光素标记γ-连环蛋白抗体(γ-γ链接素)IgG鸡黑素瘤衍生亮氨拉链额外核因子(MLZE)联免疫吸附测定试剂盒
亚硝盐标准溶液 1000μg/mlanti-cath-B/CB/FITC 荧光素标记组织蛋白B抗体IgG鸡血小板衍生生长因子(PDGF)联免疫吸附测定试剂盒
水质标样 浓度范围:1.20-2.03(mg/L),分析标准品 Anti-cath-D/CD /FITC 荧光素标记组织蛋白D抗体IgG鸡钙调(CaN)联免疫吸附测定试剂盒
亚硝盐标准溶液 (以氮计)100mg/L,溶剂:水Anti-cath-G/CG /FITC 荧光素标记组织蛋白G抗体IgG鸡色素P450氧化还原(CPR)联免疫吸附测定试剂盒
硝根离子(NO4-)标准溶液500mg/L,溶剂:水Anti-cath-H/CH /FITC 荧光素标记组织蛋白H抗体IgG鸡周期素依赖性激抑制因子3(CDKN3)联免疫吸附测定试剂盒