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操作步骤:
实验开始前,各试剂均应平衡至室温(试剂不能直接在37℃溶解);试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量,如样品浓度过高时,应对样品进行稀释,以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围,计算时再乘以相应的稀释倍数。
1. 加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。
2. 弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100μl(在使用前一小时内配制),酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。
3. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,大约400μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。
4. 每孔加检测溶液B工作液(同检测A工作液) 100μl,酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。
5. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶标板加上覆膜37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。
7. 依序每孔加终止溶液50μl,终止反应,此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。
8. 用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。
商品属性:
产品名称 | |
规格 | 50管/24样 |
检测方法 | 可见分光光度法 |
货号 | GOY-01S6418 |
商品介绍:
测定意义
GOD(EC 1.1.3.4)广泛存在于动物、和植物中,催化葡萄糖氧化生成葡萄糖酸,并产生H2O2,是生物体中产生活性氧的代谢途径之一。
测定原理:
GOD催化产生H2O2,过氧化物酶在有氧存在时催化H2O2分解产生的氧又将邻联茴香胺氧化生成有色物质,颜色深浅与葡萄糖氧化酶活性成线性关系。
试验中所需的仪器和设备:
可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1 mL玻璃比色皿/96孔板、研钵、冰、蒸馏水。
实验方法学:
一、肝素的配制: 市售肝素冻干粉140单位/mg,1克瓶装,每瓶140,000单位,称取0.1克肝素冻干粉,加生理盐水5ml,配成2800单位/ml。取50~100μl湿润管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不会凝固。老鼠血易凝固,所以最好更浓一些。可以取0.1克肝素冻干粉,加3ml生理盐水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。 肝素抗凝管的制备:取0.1克肝素冻干粉,加2.5ml生理盐水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,湿润管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),横向转动,每隔5~10分钟转动一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。 | 二、血液样本的收集: 全血根据收集的条件,分成不抗凝和抗凝两种。同时,不抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血清;抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血浆。 1、不抗凝收集血清:将收集好的全血,静置1~2小时,直接低速离心分离出血清待用或保存。 2、抗凝收集血浆: 收集抗凝全血,轻轻颠倒充分抗凝后,可直接低速离心分离血浆(也可静置半小时左右再低速离心分离血浆)待用或保存。根据不同抗凝剂的性能特征,选择合适的抗凝剂。实验室常用的抗凝剂有肝素的各种盐、EDTA。 |
选择抗凝的注意点:
①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致;
②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;
③、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.4~0.5ml血浆);
④、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后
用于测定。
油酸 98%DL-N-乙酰高半胱硫内脂 99%IGFBP-1(Human insulin-like growth factors binding protein 1) ELISA Kit 人胰岛素样生长因子结合蛋白1
3-苯基酚 97%DL-半胱 97%IGF-2(Human insulin-like growth factors 2) ELISA Kit 人胰岛素样生长因子2
8-喹啉磺酰氯 98%DL-高胱 98%IGF-1(Human insulin-like growth factors 1) ELISA Kit 人胰岛素样生长因子1
2,6-二羟基喹啉 90%DL-高半胱硫内脂盐酸盐 98%IFN- Gamma(Human Interferon Gamma) ELISA Kit 人γ干扰素
(R)-N,N-二甲基-1-[(S)-1',2-双(二苯基膦基)二茂铁基]乙 98%N-苯基甘 97%ICAM-1/CD54(Human intercellular adhesion molecule 1) ELISA Kit 人间粘附分子1
1-庚烷磺酸钠 98%,离子色谱级四氮唑乙酸 98%HGF(Human hepatocyte growth factor) ELISA kit 人肝生长因子
1-己烷磺酸钠 离子色谱级,98%氮化钛 99.5%,2-10 μmGM-CSF(Human Granulocyte-Macrophage Colony Stimulating Factor) ELISA Kit 人粒巨噬集落激因子
十二烷基磺酸钠 离子对色谱氢钙 AR,99.0 %GDNF(Human glial cell line-derived neurotrophic factor) ELISA KIT 人胶质系来源的神经营养因子
葡萄糖氧化酶(GOD)可见分光光度法标准溶液 100μg/m,u=6~2%,酮 Anti-MMP-2/RBITC 红色罗丹明标记质金属蛋白-2抗体IgG猪载脂蛋白C3(ApoC3)联免疫吸附测定试剂盒
嘧螨酯 分析标准品,99.6%Anti-XIAP/FITC 荧光素标记X-连锁凋亡蛋白/性连锁凋亡抑制蛋白抗体IgG猪血管紧张素II (ANG II)联免疫吸附测定试剂盒
热必斯 分析标准品,99.3%Anti-XRCC1/FITC 荧光素标记X射线修复交叉互补蛋白/碱切除修复因抗体IgG猪肾小球组织糖化终末产物(GTEAGE)联免疫吸附测定试剂盒
氟喹唑 分析标准品,97.5%Anti-YBX-1/FITC 荧光素标记高保留转录因子抗体IgG猪N-乙酰β-D-氨葡萄糖苷(NAGase)联免疫吸附测定试剂盒
双氟磺草 分析标准品,99.8%Anti-YY1/FITC 荧光素标记核转录因子YY1抗体IgG猪解整合素金属蛋白10(ADAM10)联免疫吸附测定试剂盒
alpha-六六六标准溶液 100μg/ml,u=3%Anti-ZAP-70/FITC 荧光素标记zeta相关蛋白70抗体IgG猪脱氧核糖核I(DNase-I)联免疫吸附测定试剂盒
alpha-六六六标准溶液 10μg/ml,u=6%Anti-ZCWCC1/FITC 荧光素标记ZCWCC1抗体IgG猪Ⅲ型胶原(COL3)联免疫吸附测定试剂盒
恶霉灵 分析标准品,99.8%Anti-Z-DEVD-FMK/FITC 荧光素标记PASE3凋亡抑制剂IgG猪雷帕霉素靶蛋白(mTOR)联免疫吸附测定试剂盒
氟铃脲 分析标准品,99%Anti-Zfp91/FITC 荧光素标记白血病相关新因抗体IgG猪促睡眠肽α(δSIP-α)联免疫吸附测定试剂盒
环酮 分析标准品,98%Anti-ZNF217/FITC 荧光素标记锌指脂蛋白217抗体IgG猪甘露聚糖结合凝集素相关丝氨蛋白1(MASP1)联免疫吸附测定试剂盒
吡嘧磺隆 分析标准品,99.5%Anti-ZNF268(1a)/FITC 荧光素标记锌指脂蛋白-1a抗体IgG猪CCAAT增强子结合蛋白δ(C/EBPδ)联免疫吸附测定试剂盒
噻螨酮 分析标准品,99.5%Anti-ZNF268(1b)/FITC 荧光素标记锌指脂蛋白-1b抗体IgG猪C型钠尿肽(CNP)联免疫吸附测定试剂盒
噻螨酮标准溶液 100μg/ml,u=3%Anti-ZNF268(1c)/FITC 荧光素标记锌指脂蛋白-1c抗体IgG猪普列克底物蛋白同源物样结构域家族A成员2(PHLDA2)联免疫吸附测定试剂盒
噻螨酮标准溶液 10μg/ml,u=6%Anti-ZNF300 /FITC 荧光素标记锌指蛋白300抗体IgG猪粘蛋白5B(MUC5B)联免疫吸附测定试剂盒
七标准溶液 100μg/ml,u=2(剧品)Anti-ZNF307/FITC 荧光素标记锌指蛋白307抗体IgG猪XV 型胶原(COL15)联免疫吸附测定试剂盒