多酚氧化酶(PPO)可见分光光度法检测试剂盒

多酚氧化酶(PPO)可见分光光度法检测试剂盒

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2022-04-24 15:11:36
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产品简介

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详细介绍

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商品属性:

产品名称

多酚氧化酶(PPO)可见分光光度法检测试剂盒

规格

50管/24样

检测方法

可见分光光度法

货号

GOY-01S6420

商品介绍:

测定意义

PPO(EC1.10.3.1)主要存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,是一种含铜的氧化酶,能使一元酚和二元酚氧化产生醌,从而引起褐化,与果蔬加工、茶叶品质和组培等密切相关。

测定原理:

PPO能够催化邻苯二酚产生醌,后者在525nm有特征光吸收。

需自备的仪器和用品:

可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1 mL玻璃比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。

实验方法学:

一、肝素的配制:

市售肝素冻干粉140单位/mg1克瓶装,每瓶140000单位,称取0.1克肝素冻干粉,加生理盐水5ml,配成2800单位/ml。取50100μl湿润管壁,可抗凝人血35ml,血液不会凝固。老鼠血易凝固,所以最好更浓一些。可以取0.1克肝素冻干粉,加3ml生理盐水溶解后,取50100μl,可抗凝鼠血24ml

肝素抗凝管的制备:取0.1克肝素冻干粉,加2.5ml生理盐水。取100μl150μl滴入塑料或玻璃管中,湿润管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),横向转动,每隔510分钟转动一次,直至干燥后放入4℃保存,可使25ml血液不凝固。

二、血液样本的收集:

全血根据收集的条件,分成不抗凝和抗凝两种。同时,不抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血清;抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血浆。

1、不抗凝收集血清:将收集好的全血,静置12小时,直接低速离心分离出血清待用或保存。

2、抗凝收集血浆: 收集抗凝全血,轻轻颠倒充分抗凝后,可直接低速离心分离血浆(也可静置半小时左右再低速离心分离血浆)待用或保存。根据不同抗凝剂的性能特征,选择合适的抗凝剂。实验室常用的抗凝剂有肝素的各种盐、EDTA

选择抗凝的注意点:

①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致;

②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;

③、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.4~0.5ml血浆);

④、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后

用于测定。

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多酚氧化酶(PPO)可见分光光度法检测试剂盒 98%大鼠状旁(PTH)免疫试剂盒神经生长相关蛋白43hnRNP F  异质核糖核蛋白F抗体

2-氨-5-硝-6-吡  98%大鼠种胎儿球蛋白/胎蛋白(AFP)免疫试剂盒3-甘油脱氢(兔来源免疫组化用抗体)hnRNP A2B1  异质核糖核蛋白hnRNPA2抗体

2-氨-3-硝-6-吡  98%大鼠羟戊5-焦脱羧(MDD)免疫试剂盒3-甘油脱氢单克隆抗体(内参抗体)HNF4/TCF4/HNF4A  肝核因子4α抗体

2-溴-4-氨吡 97%大鼠低密度脂蛋白(VLDL)免疫试剂盒生长停滞特异性蛋白2家族1抗体HNF1/TCF1/HNF1A  肝核因子1α抗体

5-氨-2-吡 98%大鼠激肽原(KNG)免疫试剂盒G蛋白偶联受体97抗体HN1L  雄激素调节样蛋白抗体

4-氨-2-吡 98%大鼠激动异构/分裂素MB(CKMB)免疫试剂盒G蛋白结合蛋白7抗体HN1/ARM2  雄激素调节蛋白2抗体

3-氨-2-吡 97%大鼠质衍生因子1β(SDF-1β/CXCL12)免疫试剂盒绿色荧光蛋白抗体HN protein  鸡新城疫血凝素-神经氨抗体

3,5-双(三氟) 97%大鼠质衍生因子1a(SDF-1a/CXCL12)免疫试剂盒绿色荧光蛋白抗体HMW Kininogen  高分子量激肽原重链抗体

2-溴-5-三氟 98%大鼠质金属蛋白抑制因子3(TIMP-3)免疫试剂盒G蛋白通路抑制蛋白1抗体HMGCS2  三羟辅A合成2抗体

对二三氟 99%大鼠质金属蛋白抑制因子2(TIMP-2)免疫试剂盒胶质系源性神经营养因子受体α2抗体HMGCS1  三羟辅A合成1

5-溴-1-茚酮 98%大鼠质金属蛋白抑制因子1(TIMP-1)免疫试剂盒核突触蛋白-γ抗体HMGCR  三羟辅A还原抗体

N-苄哌酮 98%大鼠质金属蛋白9/明胶B(MMP-9/Gelatinase B) 免疫试剂盒粒-巨噬克隆激因子抗体HMGCL  三羟辅A裂解抗体

 98%大鼠质金属蛋白8/中性粒胶原(MMP-8/Collagenase II)免疫试剂盒还原抗体HMGB4  高迁移率族蛋白B4抗体

2--4-硝吡 98.0%大鼠质金属蛋白7(MMP-7)免疫试剂盒胰高血糖素样肽-1抗体HMGB1  高迁移率族蛋白B1抗体

L-苹果二酯 98%大鼠质金属蛋白5(MMP-5)免疫试剂盒颗粒蛋白前体抗体HMGA2  高迁移率族蛋白A2抗体

操作步骤:

实验开始前,各试剂均应平衡至室温(试剂不能直接在37℃溶解);试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量,如样品浓度过高时,应对样品进行稀释,以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围,计算时再乘以相应的稀释倍数。

1.        加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。

2.        弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100μl(在使用前一小时内配制),酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。

3.        温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,大约400μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。

4.        每孔加检测溶液B工作液(同检测A工作液) 100μl,酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。

5.        温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。

6.        依序每孔加底物溶液90μl,酶标板加上覆膜37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。

7.       依序每孔加终止溶液50μl,终止反应,此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。

8.       用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。


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