二胺氧化酶(DAO)微量法检测试剂盒

二胺氧化酶(DAO)微量法检测试剂盒

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2022-04-24 15:18:49
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产品简介

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详细介绍

测定步骤:

1、 酶标仪预热30min以上,调节波长至450nm。

2、 试剂三的稀释:将试剂三用蒸馏水稀释50倍,用多少配多少。(试剂三和蒸馏水1:49稀释。

3、 工作液配制:在试剂一加入100μl试剂二,充分混匀。配好的试剂4℃避光可保存一周。(若一次性测定样本较少,可按照实际用量将试剂一和试剂二按照20ml:0.1ml的比例混匀配制)

4、 将一瓶试剂四用5ml蒸馏水溶解(溶解后一周内用完)。

5、 样本测定(在96孔板中依次加入下列试剂)

选择抗凝的注意点:

①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致;

②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;

③、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.4~0.5ml血浆);

④、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后用于测定。

【友情提示】:本产品仅供科研研究使用,不得用于人体临床直接检测。避免给您带来不必要的损失,请仔细阅读购买说明!

产品名称

规格

检测方法

货号

二胺氧化酶(DAO)微量法检测试剂盒

100管/48样

微量法

GOY-01S6429

商品介绍

测定意义

DAO(EC1.4.3.6)广泛存在于动物(肠粘膜、肺、肝脏、肾脏等)、植物和微生物中。催化多胺氧化为醛,其活性与核酸和蛋白合成密切相关,能够反映肠道机械屏障的完整性和受损伤程度。

测定原理:

DAO催化尸胺产生醛和过氧化氢,外源添加过量的辣根过氧化物酶,催化过氧化氢氧化邻联茴香胺生成有色物质,在460nm处有特征吸收峰,通过测定该波长吸光度增加速率,计算DAO活性。

自备实验用品及仪器:

天平、低温离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、蒸馏水。

试剂的组成和配制:

提取液:液体 100mL×1 瓶,4℃保存;

试剂一:液体 5mL×1 瓶,4℃保存;

试剂二:液体 200μL×1 支,4℃保存;

试剂三:液体 4mL×1 瓶,4℃保存;

试剂四:粉剂×2 瓶,4℃保存。QQ截图20220307153443.png

所需的仪器和用品:

可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿(光径 1cm)、低温离心机、移液器、研钵、冰和蒸馏水

四、超氧化物歧化酶(SOD)的测定:

建议正式实验前选取 2 个样本做预测定,了解本批样品情况,熟悉实验流程,避免实验

样本和试剂浪费!

1、样本制备

① 组织样本:

取约 0.1g 组织(水分充足的样本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4ºC 或冰浴进行

匀浆(或使用各类常见匀浆器)。4ºC×12000rpm 离心 10min,取上清作为待测液。

【注】:若增加样本量,可按照组织质量(g):提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例进行提取

② 细菌/细胞样本:

先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;取约 500 万细菌或细胞加入 1mL

提取液,超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率 200W,超声 3s,间隔 10s,重复 30 次);

12000rpm 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。

【注】:若增加样本量,可按照细菌/细胞数量(10

4):提取液(mL)为 500~1000:1 的比例进行提取。 ③ 液体样本:直接检测;若浑浊,离心后取上清检测。

注意事项:

1、试剂二为酶,不可冷冻,使用时在冰上放置。

2、对照管只需要做一管。

3、若对照管吸光值大于 1,建议将试剂二用蒸馏水稀释 7 倍后使用(10μL 试剂二原液+60μL蒸馏水)。

4、SOD为什么有的样本测定管大于对照管,对照管数值在什么范围?对照管的范围是 0.4-1。对照管吸光值过低可能是(1)试剂二或试剂四没有现配现用;

2)没有按顺序加试剂;(3)反应时间不够,可以延长反应时间(反应时间 30min可以延长到 40min)。对照管吸光值过高可能是试剂二未按操作说明书稀释相应倍数。

若出现测定管大于对照管,可能是样本中杂质的影响太大,为了降低杂质的影响一般

将样本提取上清液用蒸馏水或提取液稀释 10倍后再测,通常可以使测定正常。

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CP小鼠叉头框蛋白03(FoxP3)免疫试剂盒BAP31蛋白抗体SEZ6L  癫痫样相关蛋白6抗体

98%小鼠层连蛋白/板层素(LN)免疫试剂盒支链氨转氨2抗体SETBP1  SET结合蛋白1抗体

呋喃 >99.0%(GC)小鼠草膦乙酰转移(PAT)免疫试剂盒BCL2相关蛋白A1抗体SET translocation  SET易位蛋白抗体(髓系白血病相关蛋白)

呋喃 CP小鼠不对称二精氨(ADMA)免疫试剂盒B淋巴瘤蛋白3抗体SET  SET结合蛋白1抗体

呋喃 99.5%小鼠补体因子H(CFH)免疫试剂盒转录因子MYB相关蛋白B抗体SESN3  Sestrin3抗体

呋喃 standard for GC,≥99.5% (GC) 小鼠补体片断5a(C5a)免疫试剂盒防御素β1/Defensin β1抗体SESN2/Hi95  缺氧诱导因95抗体

1-吡咯 99%小鼠补体片断3a(C3a)免疫试剂盒B活化因子受体抗体SESN1/PA26  p53调控PA26核蛋白抗体

2-四 99%小鼠补体蛋白5(C5)免疫试剂盒TNF家族B激活因子抗体Sertad1  调控周期蛋白依赖蛋白激SEI1抗体

2-四 Standard for GC, ≥99.5% (GC)小鼠补体蛋白4(C4)免疫试剂盒蛇巴曲抗体SERPINI2/PI14  蛋白抑制剂14抗体

40%溶液小鼠补体蛋白3(C3)免疫试剂盒大脑蛋白2抗体SERPING1/C1 Inactivator  酯抑制蛋白C1IN抗体

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吡咯 standard for GC,>99.7%(GC)小鼠波形蛋白(VIM)免疫试剂盒B7-H4抗体SERPINB12  丝氨蛋白抑制剂B12抗体

 


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