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商品介绍
测定意义 生物体内超氧阴离子等活性氧具有免疫和信号传导的作用,但积累过多时会对细胞膜及生物大分子产生破坏作用,导致机体细胞和组织代谢异常,从而引起多种疾病。 测定原理: 超氧阴离子与盐酸羟胺反应生成NO2-,NO2-在对氨基苯磺酸和α-萘胺的作用下,生成红色的偶氮化合物,在530nm处有特征吸收峰,根据A530值可以计算样品中O2-含量。 自备实验用品及仪器: 天平、水浴锅、离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、和蒸馏水。 |
试剂的组成和配制:
提取液:液体 100mL×1 瓶,4℃保存;
试剂一:液体 5mL×1 瓶,4℃保存;
试剂二:液体 200μL×1 支,4℃保存;
试剂三:液体 4mL×1 瓶,4℃保存;
试剂四:粉剂×2 瓶,4℃保存。
【友情提示】:本产品仅供科研研究使用,不得用于人体临床直接检测。避免给您带来不必要的损失,请仔细阅读购买说明!
产品名称 | 规格 | 检测方法 | 货号 |
100管/96样 | 微量法 | GOY-01S6431 |
所需的仪器和用品:
可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿(光径 1cm)、低温离心机、移液器、研钵、冰和蒸馏水
四、超氧化物歧化酶(SOD)的测定:
建议正式实验前选取 2 个样本做预测定,了解本批样品情况,熟悉实验流程,避免实验
样本和试剂浪费!
1、样本制备
① 组织样本:
取约 0.1g 组织(水分充足的样本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4ºC 或冰浴进行
匀浆(或使用各类常见匀浆器)。4ºC×12000rpm 离心 10min,取上清作为待测液。
【注】:若增加样本量,可按照组织质量(g):提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例进行提取
② 细菌/细胞样本:
先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;取约 500 万细菌或细胞加入 1mL
提取液,超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率 200W,超声 3s,间隔 10s,重复 30 次);
12000rpm 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。
【注】:若增加样本量,可按照细菌/细胞数量(10
4):提取液(mL)为 500~1000:1 的比例进行提取。 ③ 液体样本:直接检测;若浑浊,离心后取上清检测。
注意事项:
1、试剂二为酶,不可冷冻,使用时在冰上放置。
2、对照管只需要做一管。
3、若对照管吸光值大于 1,建议将试剂二用蒸馏水稀释 7 倍后使用(10μL 试剂二原液+60μL蒸馏水)。
4、SOD为什么有的样本测定管大于对照管,对照管数值在什么范围?对照管的范围是 0.4-1。对照管吸光值过低可能是(1)试剂二或试剂四没有现配现用;
(2)没有按顺序加试剂;(3)反应时间不够,可以延长反应时间(反应时间 30min可以延长到 40min)。对照管吸光值过高可能是试剂二未按操作说明书稀释相应倍数。
若出现测定管大于对照管,可能是样本中杂质的影响太大,为了降低杂质的影响一般
将样本提取上清液用蒸馏水或提取液稀释 10倍后再测,通常可以使测定正常。
测定步骤:
1、 酶标仪预热30min以上,调节波长至450nm。
2、 试剂三的稀释:将试剂三用蒸馏水稀释50倍,用多少配多少。(试剂三和蒸馏水1:49稀释。
3、 工作液配制:在试剂一加入100μl试剂二,充分混匀。配好的试剂4℃避光可保存一周。(若一次性测定样本较少,可按照实际用量将试剂一和试剂二按照20ml:0.1ml的比例混匀配制)
4、 将一瓶试剂四用5ml蒸馏水溶解(溶解后一周内用完)。
5、 样本测定(在96孔板中依次加入下列试剂)
选择抗凝的注意点:
①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致;
②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;
③、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.4~0.5ml血浆);
④、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后用于测定。
二乙二丁醋酸酯 98%烧碱石棉 CP,20-30目Anti-PCNA 增殖核抗原抗体
N,N-二甲基乙酰 P,98.0% 氢钠 AR(剧品)ANti-PDCD4 凋亡相关蛋白4抗体
N,N-二甲基乙 99.0%亚硝酸钴钠 99.995% metals basisAnti-PCNA-Proliferation Marker 增殖核抗原抗体
N,N-二甲基乙 CP,98.0% 烧碱石棉 CP, 10-20目Anti-TFAR19/PDCD5 凋亡相关蛋白TFAR19抗体
N,N-二甲基乙 重蒸馏, ≥99.5%邻联甲苯 AR,98%Anti-PCNA-Proliferation Marker 增殖核抗原抗体
双酮烯酰 99%邻联甲苯 CP,97%Anti-phosphos-PCNA (Tyr211) 化增殖核抗原抗体
二乙酯 CP邻联甲苯 分析标准品,用于环境分析,≥99%(GC)Anti-PCX/PODXL 足特异蛋白抗体
二乙酯 GR盐酸邻联甲苯 ARAnti-PDE4D 二酯4D抗体
超氧阴离子微量法检测试剂盒三氟磺钪 98%Anti-HHV8/ORF K2 类疱疹病8抗体人胸腺质淋巴生成素(TSLP)联免疫吸附测定试剂盒
四氢-2 2-二-4H--4-酮 95%Anti-HHV8/ORF50 人类疱疹病8抗体人尿激型纤溶原激活因子受体(PLAUR/uPAR)联免疫吸附测定试剂盒
三(4-溴) 98%Anti-HHV8/ORF50 人类疱疹病8抗体人血管内皮生长因子C(VEGF-C)联免疫吸附测定试剂盒
2-酰噻唑 97%Anti-HHV8/ORF50 人类疱疹病8抗体人血管内皮生长因子D(VEGF-D)联免疫吸附测定试剂盒
500ml透气不透液垫片 40mm口径 配套42mm口径盖Anti-HHV8/ORF K2 人类疱疹病8抗体人血管内皮生长因子受体2(VEGFR-2/KDR)联免疫吸附测定试剂盒
1,3-二 99%Anti-HIF-1 Alpha 缺氧诱导因子1α 抗体人结合蛋白(DBP)联免疫吸附测定试剂盒
3-吡 97%Anti-HIF-1 Beta/ARNT1 缺氧诱导因子1β 抗体人胰岛素(INS)联免疫吸附测定试剂盒
2-吡 98%Anti-HIF 2 Alpha 缺氧诱导因子2α 抗体人外质金属蛋白诱导因子(EMMPRIN/CD147)联免疫吸附测定试剂盒
碳钡 AR,99%Anti-HINT1 组氨三聚体核苷结合蛋白1抗体人CD34分子(CD34)联免疫吸附测定试剂盒
碳锶 AR,99%Anti-HIRA/DGGR1 组蛋白替换精蛋白DGGR1抗体人抗小核糖核蛋白/Sm抗体(snRNP/Sm)联免疫吸附测定试剂盒
2-环戊酮 97%Anti-Histone H3 组蛋白3抗体人色素b5(CYB5A)联免疫吸附测定试剂盒
碳钡 AR,99%Anti-Phospho-Histone H3 (Ser10) 化组蛋白3抗体β肽(CGβ)联免疫吸附测定试剂盒
碳钡 CP,98%Anti-Phospho-Histone H3 (Ser28) 化组蛋白3抗体人可溶性OX40L蛋白(sOX40L)联免疫吸附测定试剂盒
碳钡 SPAnti-Phospho-Histone H3 (Thr11) 化组蛋白3抗体人抗原提呈相关转运蛋白(TAP)联免疫吸附测定试剂盒
碳钡 99.95% metals basisAnti-Phospho-Histone H3 (Thr3) 化组蛋白3抗体人B-Raf原癌因丝氨/苏氨蛋白激(BRAF)联免疫吸附测定试剂盒