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操作步骤:
实验开始前,各试剂均应平衡至室温(试剂不能直接在37℃溶解);试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量,如样品浓度过高时,应对样品进行稀释,以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围,计算时再乘以相应的稀释倍数。
1. 加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。
2. 弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100μl(在使用前一小时内配制),酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。
3. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,大约400μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。
4. 每孔加检测溶液B工作液(同检测A工作液) 100μl,酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。
5. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶标板加上覆膜37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。
7. 依序每孔加终止溶液50μl,终止反应,此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。
8. 用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。
商品属性:
产品名称 | |
规格 | 50管/24样 |
检测方法 | 可见分光光度法 |
货号 | GOY-01S6690 |
商品介绍:
测定意义
SBE(EC 2.4.1.18)主要存在于植物中,是参与支链淀粉合成的关键酶,测定SBE活性在淀粉生物合成、优质农作物品种选育和品质遗传改良研究中具有重要意义。
测定原理
淀粉和碘结合后在660nm有特征光吸收,SBE可切断支链淀粉侧支,从而降低了淀粉-碘复合物在660nm吸收值,一定时间内吸光度下降的百分率可以反映SBE活性。
需自备的的仪器和用品
可见分光光度计、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1 mL玻璃比色皿、研钵、冰、蒸馏水
实验方法学:
一、肝素的配制: 市售肝素冻干粉140单位/mg,1克瓶装,每瓶140,000单位,称取0.1克肝素冻干粉,加生理盐水5ml,配成2800单位/ml。取50~100μl湿润管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不会凝固。老鼠血易凝固,所以最好更浓一些。可以取0.1克肝素冻干粉,加3ml生理盐水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。 肝素抗凝管的制备:取0.1克肝素冻干粉,加2.5ml生理盐水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,湿润管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),横向转动,每隔5~10分钟转动一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。 | 二、血液样本的收集: 全血根据收集的条件,分成不抗凝和抗凝两种。同时,不抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血清;抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血浆。 1、不抗凝收集血清:将收集好的全血,静置1~2小时,直接低速离心分离出血清待用或保存。 2、抗凝收集血浆: 收集抗凝全血,轻轻颠倒充分抗凝后,可直接低速离心分离血浆(也可静置半小时左右再低速离心分离血浆)待用或保存。根据不同抗凝剂的性能特征,选择合适的抗凝剂。实验室常用的抗凝剂有肝素的各种盐、EDTA。 |
选择抗凝的注意点:
①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致;
②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;
③、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.4~0.5ml血浆);
④、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后
用于测定。
六亚甲基二异酸酯 99%甲酸异酯 98%CR ELISA Kit 大鼠钙结合蛋白
盐酸 95%铱 99.90%,325目HABP ELISA Kit 大鼠透明质酸结合蛋白
2-苯硫基乙 98%5--2- 98%BMP-6 ELISA Kit 大鼠骨形成蛋白6
醋酸A USP/EP3-苄盐酸盐 97%大鼠因子ELISA Kit 大鼠因子
天平台 980*750*800硝酸铟水合物 99.999% metals basismALB ELISA Kit 大鼠微量蛋白
上门维修费用健那绿B BS, Dye content 65 %AcSDKP ELISA Kit 大鼠N-乙酰基-丝氨酰-天门冬酰-赖氨酰-脯
PP风机 5#/2.2KWβ-乳糖 含80%β-乳糖和20% α-乳糖PA-IgG/M/A ELISA Kit 大鼠抗血小板抗体IgG/M/A
4-氯甲基-5-甲基-1,3-二氧杂环戊烯-2-酮 98%铅 99.99%,powderNTX)ELISA Kit 大鼠Ⅰ型胶原N末端肽
淀粉分支酶(SBE)可见分光光度法检测试剂盒Anti-TP II A/TOP2a/FITC 荧光素标记DNA拓普西异构ⅡA抗体IgG绵羊早期生长应答蛋白3(EGR3)联免疫吸附测定试剂盒
Anti-TRAIL/Apo2L /FITC 荧光素标记肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体/凋亡素2配体抗体IgG绵羊抗脂酰丝氨抗体(APSA)联免疫吸附测定试剂盒
Anti-Transthyretin /FITC 荧光素标记转状腺素蛋白抗体IgG绵羊肌球蛋白重链1(MYH1)联免疫吸附测定试剂盒
Anti-TREM1/FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠髓系触发受体1抗体IgG绵羊核孔蛋白133kda(NUP133)联免疫吸附测定试剂盒
Anti-TREM2/FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠髓系触发受体2抗体IgG绵羊肌-3-激(PI3K)联免疫吸附测定试剂盒
Anti-TREML1/TLT1/FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠髓系触发受体样转录因子1抗体IgG绵羊乙酰辅A(A-CoA)联免疫吸附测定试剂盒
Anti-TREML2/TLT2/FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠髓系触发受体样转录因子2抗体IgG绵羊抗角蛋白抗体(AKA)联免疫吸附测定试剂盒
Anti-TRF/FITC 荧光素标记抗转铁蛋白抗体IgG绵羊双皮质激素样激1(DCLK1)联免疫吸附测定试剂盒
Anti-TRF1/FITC 荧光素标记端粒结合蛋白1抗体IgG绵羊α-胞衬蛋白(SPTAN1)联免疫吸附测定试剂盒
Anti-TRF2/FITC 荧光素标记端粒结合蛋白2抗体IgG绵羊因子信号转导抑制因子3(SOCS3)联免疫吸附测定试剂盒
Anti-TRH/FITC 荧光素标记促状腺素释放激素抗体IgG绵羊肝脏/红酮激(PK)联免疫吸附测定试剂盒
Anti-TRIM32/FITC 荧光素标记TRIM32抗体IgG绵羊肝脏胶原凝集素1(CLL1)联免疫吸附测定试剂盒
Anti-TrK A/FITC 荧光素标记酪氨激A抗体IgG绵羊抗脂抗体(APA)联免疫吸附测定试剂盒
Anti-TrK A.B.C/TrK /FITC 荧光素标记酪氨激A.B.C抗体IgG绵羊质金属蛋白3(MMP-3)联免疫吸附测定试剂盒
Anti-Phospho-TrkA (Tyr785)/TrkB (Tyr816) /FITC 荧光素标记化酪氨激A抗体IgG绵羊雌激素受体α(ERα)联免疫吸附测定试剂盒