淀粉分支酶(SBE)可见分光光度法

淀粉分支酶(SBE)可见分光光度法

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2022-04-27 11:46:46
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产品简介

淀粉分支酶(SBE)可见分光光度法检测试剂盒公司正在出售的产品:OGYE琼脂/土葡萄糖酵母琼脂
A-1 Broth A-1肉汤 1.00415.0500MERCK默克
李斯特氏显色培养(LA) 1000mL/瓶
吲哚培养基(又名肉汤) 10(g)
改良MC培养基 250(g)
TM培养基 250用于淋球的分离培养(Quelab方法)
亮绿琼脂 (Kauffma

详细介绍

操作步骤:

实验开始前,各试剂均应平衡至室温(试剂不能直接在37℃溶解);试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量,如样品浓度过高时,应对样品进行稀释,以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围,计算时再乘以相应的稀释倍数。

1.        加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。

2.        弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100μl(在使用前一小时内配制),酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。

3.        温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,大约400μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。

4.        每孔加检测溶液B工作液(同检测A工作液) 100μl,酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。

5.        温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。

6.        依序每孔加底物溶液90μl,酶标板加上覆膜37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。

7.       依序每孔加终止溶液50μl,终止反应,此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。

8.       用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。

28.png 

商品属性:

产品名称

淀粉分支酶(SBE)可见分光光度法检测试剂盒

规格

50管/24样

检测方法

可见分光光度法

货号

GOY-01S6690

商品介绍:

测定意义

SBE(EC 2.4.1.18)主要存在于植物中,是参与支链淀粉合成的关键酶,测定SBE活性在淀粉生物合成、优质农作物品种选育和品质遗传改良研究中具有重要意义。

测定原理

淀粉和碘结合后在660nm有特征光吸收,SBE可切断支链淀粉侧支,从而降低了淀粉-碘复合物在660nm吸收值,一定时间内吸光度下降的百分率可以反映SBE活性。

需自备的的仪器和用品

可见分光光度计、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1 mL玻璃比色皿、研钵、冰、蒸馏水

实验方法学:

一、肝素的配制:

市售肝素冻干粉140单位/mg1克瓶装,每瓶140000单位,称取0.1克肝素冻干粉,加生理盐水5ml,配成2800单位/ml。取50100μl湿润管壁,可抗凝人血35ml,血液不会凝固。老鼠血易凝固,所以最好更浓一些。可以取0.1克肝素冻干粉,加3ml生理盐水溶解后,取50100μl,可抗凝鼠血24ml

肝素抗凝管的制备:取0.1克肝素冻干粉,加2.5ml生理盐水。取100μl150μl滴入塑料或玻璃管中,湿润管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),横向转动,每隔510分钟转动一次,直至干燥后放入4℃保存,可使25ml血液不凝固。

二、血液样本的收集:

全血根据收集的条件,分成不抗凝和抗凝两种。同时,不抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血清;抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血浆。

1、不抗凝收集血清:将收集好的全血,静置12小时,直接低速离心分离出血清待用或保存。

2、抗凝收集血浆: 收集抗凝全血,轻轻颠倒充分抗凝后,可直接低速离心分离血浆(也可静置半小时左右再低速离心分离血浆)待用或保存。根据不同抗凝剂的性能特征,选择合适的抗凝剂。实验室常用的抗凝剂有肝素的各种盐、EDTA

选择抗凝的注意点:

①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致;

②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;

③、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.4~0.5ml血浆);

④、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后

用于测定。

六亚甲基二异酸酯 99%甲酸异酯 98%CR ELISA Kit  大鼠钙结合蛋白

盐酸 95%铱 99.90%,325目HABP ELISA Kit  大鼠透明质酸结合蛋白

2-苯硫基乙 98%5--2- 98%BMP-6 ELISA Kit  大鼠骨形成蛋白6

醋酸A USP/EP3-苄盐酸盐 97%大鼠因子ELISA Kit  大鼠因子

天平台 980*750*800硝酸铟水合物  99.999% metals basismALB ELISA Kit  大鼠微量蛋白

上门维修费用健那绿B BS, Dye content 65 %AcSDKP ELISA Kit  大鼠N-乙酰基-丝氨酰-天门冬酰-赖氨酰-脯

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4-氯甲基-5-甲基-1,3-二氧杂环戊烯-2-酮 98%铅 99.99%,powderNTX)ELISA Kit  大鼠Ⅰ型胶原N末端肽

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Anti-TREML2/TLT2/FITC  荧光素标记兔抗人、大、小鼠髓系触发受体样转录因子2抗体IgG绵羊抗角蛋白抗体(AKA)联免疫吸附测定试剂盒

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