参数规格：
产品名称：贾第虫通用LAMP试剂盒
英文名称：Universal lamp kit for Giardia
货号：GOY-L64065
产品规格：50次
产品运输：低温运输
产品保存：-20℃保存
产品有效期：一年

储存条件：
仅用于科研14℃或－20℃样品收集、处理及保存方法

【友情提示】：本产品仅供科研研究使用，不得用于人体临床直接检测。避免给您带来不必要的损失，请仔细阅读购买说明！

商品介绍

试剂的组成和配制：

提取液：液体 100mL×1 瓶，4℃保存；

试剂一：液体 5mL×1 瓶，4℃保存；

试剂二：液体 200μL×1 支，4℃保存；

试剂三：液体 4mL×1 瓶，4℃保存；

试剂四：粉剂×2 瓶，4℃保存。

所需的仪器和用品：

可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿（光径 1cm）、低温离心机、移液器、研钵、冰和蒸馏水

四、超氧化物歧化酶（SOD）的测定：

建议正式实验前选取 2 个样本做预测定，了解本批样品情况，熟悉实验流程，避免实验

样本和试剂浪费！

1、样本制备

① 组织样本：

取约 0.1g 组织（水分充足的样本可取 0.25g），加入 1mL 提取液，在 4ºC 或冰浴进行

匀浆(或使用各类常见匀浆器)。4ºC×12000rpm 离心 10min，取上清作为待测液。

【注】：若增加样本量，可按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为 1：5~10 的比例进行提取

② 细菌/细胞样本：

先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；取约 500 万细菌或细胞加入 1mL

提取液，超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率 200W，超声 3s，间隔 10s，重复 30 次）；

12000rpm 4℃离心 10min，取上清，置冰上待测。

【注】：若增加样本量，可按照细菌/细胞数量（10

4）：提取液（mL）为 500~1000：1 的比例进行提取。 ③ 液体样本：直接检测；若浑浊，离心后取上清检测。

注意事项：

1、试剂二为酶，不可冷冻，使用时在冰上放置。

2、对照管只需要做一管。

3、若对照管吸光值大于 1，建议将试剂二用蒸馏水稀释 7 倍后使用（10μL 试剂二原液+60μL蒸馏水）。

4、SOD为什么有的样本测定管大于对照管，对照管数值在什么范围？对照管的范围是 0.4-1。对照管吸光值过低可能是（1）试剂二或试剂四没有现配现用；

（2)没有按顺序加试剂；（3）反应时间不够，可以延长反应时间（反应时间 30min可以延长到 40min）。对照管吸光值过高可能是试剂二未按操作说明书稀释相应倍数。

若出现测定管大于对照管，可能是样本中杂质的影响太大，为了降低杂质的影响一般

将样本提取上清液用蒸馏水或提取液稀释 10倍后再测，通常可以使测定正常。

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测定步骤：

1、 酶标仪预热30min以上，调节波长至450nm。

2、 试剂三的稀释：将试剂三用蒸馏水稀释50倍，用多少配多少。（试剂三和蒸馏水1：49稀释。

3、 工作液配制：在试剂一加入100μl试剂二，充分混匀。配好的试剂4℃避光可保存一周。（若一次性测定样本较少，可按照实际用量将试剂一和试剂二按照20ml：0.1ml的比例混匀配制）

4、 将一瓶试剂四用5ml蒸馏水溶解（溶解后一周内用完）。

5、 样本测定（在96孔板中依次加入下列试剂）

选择抗凝的注意点：

①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致，同时所取的全血的量也要尽量一致;

②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒，充分抗凝，防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;

③、抗凝全血收集的血浆相对较多（1ml抗凝全血能分离出0.4～0.5ml血浆）;

④、抗凝收集的血浆冷冻保存后，解冻时可能会出现絮状浑浊，如有则需要离心去掉浑浊后用于测定。

1. 血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。
3. 细胞上清液：3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。
5. 保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
实验注意事项：
1）RT-PCR可以检测组织、细胞、血液、细菌等很多材料，不同的样本有不同要求，实验前请充分沟通确认实验方案和样本情况；
2）客户尽可能提供实验的背景信息、物种、基因准确的名称和ID号；
3）客户尽量不要提供DNA或RNA样品。
4）样本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
实时荧光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类，探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加，非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。运用该技术可以对DNA、RNA样品进行定量（包括定量和相对定量）和定性分析。
主要服务：DNA或RNA的定量分析、基因表达差异分析、基因分型。
主要技术：引物设计、RNA提取、cDNA合成、qPCR
细胞样品细白表达流式细胞仪检测试剂盒　HIST1H1T ELISA Kit　20 ul

载玻片细胞样品细白表达荧光显微镜检测试剂盒　HMBOX1 ELISA Kit　100 ul

载玻片细胞样品细表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒　HIST1H2AC ELISA Kit　100 ul

冰冻切片组织细表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒　HS3ST1 ELISA Kit　100 ul

石蜡切片组织细白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒　HS1BP3 ELISA Kit　100 ul

细胞样品细胞蛋白表达比色法定量检测试剂盒　HS2ST1 ELISA Kit　100 ul

细胞样品细胞蛋白表达荧光定量检测试剂盒　HSBP1 ELISA Kit　20 ul

蛋白表达西方杂交分析试剂盒　HSD11B2 ELISA Kit　100 ul

蛋白免疫共沉淀分析试剂盒　HSCB ELISA Kit　100 ul

蛋白表达ELISA定量检测试剂盒　HSD17B2 ELISA Kit　300 ul

性染色体分离（Ericsson法）试剂盒　HSD17B4 ELISA Kit　100 ul

性染色体分离（percoll法）试剂盒　HSD17B6 ELISA Kit　20 ul

性染色体分离（流式仪法）试剂盒　HIST2H2AA4 ELISA Kit　100 ul

细胞氧化应激活性氧（ROS）细胞流式仪检测试剂盒　HMCN1 ELISA Kit　100 ul

细胞氧化应激活性氧超氧阴离子细胞流式仪检测试剂盒　Histone-H3 ELISA Kit　300 ul

细胞BWW培养液　HIST3H2A ELISA Kit　400 ul
贾第虫通用LAMP试剂盒多肽N-酰氨基半糖转移酶10MIP-3 Alpha  巨噬细胞炎性蛋白-3α100 ul

多肽N-酰氨基半糖转移酶11MIP-3 Beta  巨噬细胞炎性蛋白-3β300 ul

多肽N-酰氨基半糖转移酶12MIP-4  巨噬细胞炎性蛋白-4100 ul

多肽N-酰氨基半糖转移酶1MIP-5  巨噬细胞炎性蛋白-520 ul

晶状体球蛋白γ3/γC-crystallin/白内障相关蛋白MCP-1  巨噬细胞趋化蛋白-1100µg

γ-微管蛋白复合物GCP3mouse MMP-9  血清金属基质蛋白酶-9100 ul

胍基酸N甲基转移酶RANS  趋化因子100 ul

α-葡萄糖苷酶CG-CSF  粒细胞-集落刺激因子100 ul

生长激素释放因子受体GM-CSF  粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子100 ul
实验过程：
一、试剂准备
1. DNA模板
2．对应目的基因的特异引物（在PCR反应中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制，而不能从无到有，凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根据你的模板链设计。因此，扩增不同的基因需要设计不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步骤
1．在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
   10×PCR buffer             5μl
     dNTP mixl                 4μl
     引物1（10pM）               2μl
     引物2（10PM）              2μ
     Taq酶（2U/μl）            1μl
     DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl
     加ddH2O至               50 μl
  视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2．调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，后在72℃ 保温7min。
3．结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4．PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μlLuFang进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测
三、注意事项
１．PCR反应应该在一个没有DNA污染的干净环境中进行。好设立一个的PCR实验室。
２．纯化模板所选用的方法对污染的风险有影响。一般而言，只要能够得到可靠的结果，纯化的方法越简单越好。
３．所有试剂都应该没有核酸和核酸酶的污染。操作过程中均应戴手套。