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测定步骤:
1、 酶标仪预热30min以上,调节波长至450nm。
2、 试剂三的稀释:将试剂三用蒸馏水稀释50倍,用多少配多少。(试剂三和蒸馏水1:49稀释。
3、 工作液配制:在试剂一加入100μl试剂二,充分混匀。配好的试剂4℃避光可保存一周。(若一次性测定样本较少,可按照实际用量将试剂一和试剂二按照20ml:0.1ml的比例混匀配制)
4、 将一瓶试剂四用5ml蒸馏水溶解(溶解后一周内用完)。
5、 样本测定(在96孔板中依次加入下列试剂)
选择抗凝的注意点:
①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致;
②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;
③、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.4~0.5ml血浆);
④、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后用于测定。
【友情提示】:本产品仅供科研研究使用,不得用于人体临床直接检测。避免给您带来不必要的损失,请仔细阅读购买说明!
产品名称 | 规格 | 检测方法 | 货号 |
100管/96样 | 微量法 | GOY-01S7011 |
商品介绍
测定意义 植物细胞壁中的果胶是植物初生细胞壁的主要成分,除了起结构支撑、物质运输等作用外,还具有抵抗逆境的作用。果胶甲酯化程度影响了细胞壁的坚韧程度及其抗性。 测定原理 果胶甲酯键经皂化处理后释放出甲醇,甲醇与2,4-戊二酮反应显色,在412nm下测定吸光值;同时半乳糖醛酸在70℃下与浓硫酸反应生成5-甲酰基-2-呋喃甲酸,5-甲酰基-2-呋喃甲酸与3,5-二甲基反应产生有色物质,在450nm下有最大吸光值。以甲醇生成量与半乳糖醛酸含量的比值代表果胶甲酯化程度。 自备实验用品及仪器 天平、低温离心机、酶标仪、96孔板、恒温水浴锅、蒸馏水、硫酸。 |
试剂的组成和配制:
提取液:液体 100mL×1 瓶,4℃保存;
试剂一:液体 5mL×1 瓶,4℃保存;
试剂二:液体 200μL×1 支,4℃保存;
试剂三:液体 4mL×1 瓶,4℃保存;
试剂四:粉剂×2 瓶,4℃保存。
所需的仪器和用品:
可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿(光径 1cm)、低温离心机、移液器、研钵、冰和蒸馏水
四、超氧化物歧化酶(SOD)的测定:
建议正式实验前选取 2 个样本做预测定,了解本批样品情况,熟悉实验流程,避免实验
样本和试剂浪费!
1、样本制备
① 组织样本:
取约 0.1g 组织(水分充足的样本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4ºC 或冰浴进行
匀浆(或使用各类常见匀浆器)。4ºC×12000rpm 离心 10min,取上清作为待测液。
【注】:若增加样本量,可按照组织质量(g):提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例进行提取
② 细菌/细胞样本:
先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;取约 500 万细菌或细胞加入 1mL
提取液,超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率 200W,超声 3s,间隔 10s,重复 30 次);
12000rpm 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。
【注】:若增加样本量,可按照细菌/细胞数量(10
4):提取液(mL)为 500~1000:1 的比例进行提取。 ③ 液体样本:直接检测;若浑浊,离心后取上清检测。
注意事项:
1、试剂二为酶,不可冷冻,使用时在冰上放置。
2、对照管只需要做一管。
3、若对照管吸光值大于 1,建议将试剂二用蒸馏水稀释 7 倍后使用(10μL 试剂二原液+60μL蒸馏水)。
4、SOD为什么有的样本测定管大于对照管,对照管数值在什么范围?对照管的范围是 0.4-1。对照管吸光值过低可能是(1)试剂二或试剂四没有现配现用;
(2)没有按顺序加试剂;(3)反应时间不够,可以延长反应时间(反应时间 30min可以延长到 40min)。对照管吸光值过高可能是试剂二未按操作说明书稀释相应倍数。
若出现测定管大于对照管,可能是样本中杂质的影响太大,为了降低杂质的影响一般
将样本提取上清液用蒸馏水或提取液稀释 10倍后再测,通常可以使测定正常。
1,2-环己二 99%四乙基氯化铵,一水 99%MMP-9/Gelatinase B ELISA Kit 大鼠基质金属蛋白9/明胶B
AR,99.95%1,4,8,11-四甲基-1,4,8,11-四氮杂-环一十四烷 98%TIMP-1 ELISA Kit 大鼠基质金属蛋白抑制因子1
PLA300-T2(二层单扶手车板式 )静音推车 910(L)×600(W)mm 上层(S)-(+)-1,2,3,4-四氢-1-萘 >99%, ee >98%bFGF ELISA Kit 大鼠碱性成纤维生长因子
小推车 单层四轮 长70cm 宽 48cm 高 85cm
(R)-(-)-1,2,3,4-四氢-1-萘 >99%, ee >98%MIP-5 ELISA Kit 大鼠巨噬炎症蛋白5
S-联萘酚 99%(S)-(+)-四氢糠 98%sICAM-1 ELISA Kit 大鼠可溶性间粘附分子1
(R)-(-)-联萘酚酯 98%四 97%sVCAM-1 ELISA Kit 大鼠可溶性血管粘附分子1
R-1,1'-联-2-萘酚 99%邻二甲苯异酸盐 98%IgA ELISA Kit 大鼠球蛋白A
(S)-(+)-联萘酚酯 97%1--4(三氟甲氧基)苯 98%IgE ELISA Kit 大鼠球蛋白E
果胶甲酯化程度微量法检测试剂盒补体片段4d(C4d)免疫试剂盒现货供应
广谱细胞角蛋白(P-CK)免疫试剂盒进口、分装
大鼠糖类抗原125(CA125)免疫试剂盒现货供应
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乙型肝炎病毒e抗体(HBeAb)免疫试剂盒进口、组装
鹅钙结合蛋白(CR)免疫试剂盒现货供应
兔子单核细胞趋化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)免疫试剂盒进口、组装
小鼠色素上皮衍生因子(PEDF)免疫试剂盒*直销
大鼠羧化不全骨钙素(ucOC)免疫试剂盒进口、分装