其他品牌 品牌
经销商厂商性质
上海市所在地
选择抗凝的注意点:
①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致;
②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;
③、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.4~0.5ml血浆);
④、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后
用于测定。
商品属性:
产品名称 | |
规格 | 100管/96样 |
检测方法 | 微量法 |
货号 | GOY-01S6982 |
商品介绍:
测定意义
糖原磷酸化酶(Glycogen phosphorylase,GP,EC 2.4.1.1))是糖原分解代谢的关键酶,使糖原分子从非还原端逐个断开α-1,4-糖苷键移去葡萄糖基,释放1-磷酸葡萄糖,直至临近糖原分子α-1,6-糖苷键分支点前4个葡萄糖基处。GP分为有活性的糖原磷酸化酶a(GPa)和无活性的糖原磷酸化酶b(GPb)两种形式。糖原的分解主要在GPa的催化下进行。
测定原理:
未添加激活剂时,GPa催化糖原和无机磷产生葡萄糖残基生成糖原和1-磷酸葡萄糖,磷酸葡萄糖变位酶和6-磷酸葡萄糖脱氢酶进一步依次催化NADP还原生成NADPH,在340nm下测定NADPH上升速率,即可反映GPa活性。
需自备的仪器和用品:
紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。
实验方法学:
一、肝素的配制: 市售肝素冻干粉140单位/mg,1克瓶装,每瓶140,000单位,称取0.1克肝素冻干粉,加生理盐水5ml,配成2800单位/ml。取50~100μl湿润管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不会凝固。老鼠血易凝固,所以最好更浓一些。可以取0.1克肝素冻干粉,加3ml生理盐水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。 肝素抗凝管的制备:取0.1克肝素冻干粉,加2.5ml生理盐水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,湿润管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),横向转动,每隔5~10分钟转动一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。 | 二、血液样本的收集: 全血根据收集的条件,分成不抗凝和抗凝两种。同时,不抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血清;抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血浆。 1、不抗凝收集血清:将收集好的全血,静置1~2小时,直接低速离心分离出血清待用或保存。 2、抗凝收集血浆: 收集抗凝全血,轻轻颠倒充分抗凝后,可直接低速离心分离血浆(也可静置半小时左右再低速离心分离血浆)待用或保存。根据不同抗凝剂的性能特征,选择合适的抗凝剂。实验室常用的抗凝剂有肝素的各种盐、EDTA。 |
操作步骤:
实验开始前,各试剂均应平衡至室温(试剂不能直接在37℃溶解);试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量,如样品浓度过高时,应对样品进行稀释,以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围,计算时再乘以相应的稀释倍数。
1. 加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。
2. 弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100μl(在使用前一小时内配制),酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。
3. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,大约400μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。
4. 每孔加检测溶液B工作液(同检测A工作液) 100μl,酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。
5. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶标板加上覆膜37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。
7. 依序每孔加终止溶液50μl,终止反应,此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。
8. 用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。
锌指/环指蛋白1抗体Anti-MTTP AntibodyG(5´)ppp(5´)G 帽结构类似物25 OD规格
锌指/环指蛋白2抗体Anti-MTUS1 Antibody克必隆常态转化液20 次规格
锌指蛋白3/环指蛋白3抗体Anti-MUC1 AntibodycDNA *链合成试剂盒10 次规格
锌指蛋白230抗体Anti-MUC1 AntibodyDH5α 化学感受态0.1mL×10图片
锌指脂蛋白-1b抗体Anti-MUC1 AntibodyM15 感受态0.1 mL×10图片
zeta相关蛋白70抗体Anti-MUC1 Antibody单全转录组扩增试剂盒 24 次价格
白血病相关新基因抗体Anti-MUC1 Antibody(原货号PB0154)DNA 粘转平试剂盒20 次规格
锌指蛋白307抗体Anti-MUC2 AntibodyBL21(DE3) 化学感受态0.1mL×10价格
糖原磷酸化酶a(GPa)微量法检测试剂盒八聚体转录因子(OTF2A)免疫试剂盒进口、组装
大鼠牙本质磷蛋白(DPP)免疫试剂盒进口、分装
抗胰岛素受体抗体(AIRA)免疫试剂盒进口、组装
兔氧化低密度脂蛋白抗体(OLAb)免疫试剂盒*直销
葡萄糖-6-/葡萄糖-6-酯(G-6-Pase)免疫试剂盒进口、分装
兔葡萄糖-6--1-脱氢(G6PD)免疫试剂盒现货供应
小鼠CD44分子(CD44)免疫试剂盒*直销
小鼠单核细胞趋化蛋白3(MCP-3/CCL7)免疫试剂盒现货供应
大鼠血小板衍生生长因子B(PDGF-B)免疫试剂盒进口、组装
小鼠粘蛋白/粘液素5AC(MUC5AC) 免疫试剂盒进口、分装