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操作步骤:
实验开始前，各试剂均应平衡至室温（试剂不能直接在37℃溶解）；试剂或样品稀释时，均需混匀，混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量，如样品浓度过高时，应对样品进行稀释，以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围，计算时再乘以相应的稀释倍数。
1. 加样：分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl，余孔分别加标准品或待测样品100μl，注意不要有气泡，加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀，酶标板加上盖或覆膜，37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性，每次实验请使用新的标准品溶液。
2. 弃去液体，甩干，不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100μl（在使用前一小时内配制），酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。
3. 温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分钟，大约400μl/每孔，甩干（也可轻拍将孔内液体拍干）。
4. 每孔加检测溶液B工作液（同检测A工作液） 100μl，酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。
5. 温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分钟，350μl/每孔，甩干（也可轻拍将孔内液体拍干）。
6. 依序每孔加底物溶液90μl，酶标板加上覆膜37℃避光显色（30分钟内，此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色，后3-4孔梯度不明显，即可终止）。
7. 依序每孔加终止溶液50μl，终止反应，此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性，底物反应时间到后应尽快加入终止液。
8. 用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度（OD值）。
商品属性：
产品名称 | |
规格 | 100管/48样 |
检测方法 | 微量法 |
货号 | GOY-01S6984 |
商品介绍：
测定意义
糖原磷酸化酶（Glycogen phosphorylase，GP，EC 2.4.1.1)）是糖原分解代谢的关键酶，使糖原分子从非还原端逐个断开α-1，4-糖苷键移去葡萄糖基，释放1-磷酸葡萄糖，直至临近糖原分子α-1，6-糖苷键分支点前4个葡萄糖基处。GP分为有活性的糖原磷酸化酶a（GPa）和无活性的糖原磷酸化酶b（GPb）两种形式。GPb在一定浓度的腺苷酸（5，-AMP）存在下可被激活。
测定原理：
GP催化糖原和无机磷产生葡萄糖残基生成糖原和1-磷酸葡萄糖，磷酸葡萄糖变位酶和6-磷酸葡萄糖脱氢酶进一步依次催化NADP还原生成NADPH，在340nm下测定NADPH上升速率，即可反映GP活性。添加一定浓度的腺苷酸（5，-AMP）时测定GP（GPa和GPb）活性，未添加腺苷酸（5，-AMP）时测定GPa活性，GP活性－GPa活性得到GPb活性。
需自备的仪器和用品：
紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。
实验方法学：
一、肝素的配制： 市售肝素冻干粉140单位/mg，1克瓶装，每瓶140，000单位，称取0.1克肝素冻干粉，加生理盐水5ml，配成2800单位/ml。取50～100μl湿润管壁，可抗凝人血3～5ml，血液不会凝固。老鼠血易凝固，所以最好更浓一些。可以取0.1克肝素冻干粉，加3ml生理盐水溶解后，取50～100μl,可抗凝鼠血2～4ml。 肝素抗凝管的制备：取0.1克肝素冻干粉，加2.5ml生理盐水。取100μl～150μl滴入塑料或玻璃管中，湿润管壁，低于80℃小烤箱中（可以用烤面包的小烤箱），横向转动，每隔5～10分钟转动一次，直至干燥后放入4℃保存，可使2～5ml血液不凝固。 | 二、血液样本的收集： 全血根据收集的条件，分成不抗凝和抗凝两种。同时，不抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血清；抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血浆。 1、不抗凝收集血清:将收集好的全血,静置1～2小时，直接低速离心分离出血清待用或保存。 2、抗凝收集血浆: 收集抗凝全血，轻轻颠倒充分抗凝后，可直接低速离心分离血浆(也可静置半小时左右再低速离心分离血浆)待用或保存。根据不同抗凝剂的性能特征，选择合适的抗凝剂。实验室常用的抗凝剂有肝素的各种盐、EDTA。 |
选择抗凝的注意点：
①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致，同时所取的全血的量也要尽量一致;
②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒，充分抗凝，防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;
③、抗凝全血收集的血浆相对较多（1ml抗凝全血能分离出0.4～0.5ml血浆）;
④、抗凝收集的血浆冷冻保存后，解冻时可能会出现絮状浑浊，如有则需要离心去掉浑浊后
用于测定。
L-天冬双苄酯对甲苯磺酸盐 98%氟甲基-1,1,1,3,3,3-六氟异基 98%Anti-PTPN4/MEG1/FITC 荧光素标记蛋白非受体型4抗体IgG
N-乙酰甘乙酯 98%N,N`-二苯基硫脲 CP,98%Anti-PPAR-delta /FITC 荧光素标记D型-过氧化活化增生受体抗体IgG
L- 98%基乙酸 99%Anti-PPAR alpha/FITC 荧光素标记α型-过氧化活化增生受体抗体IgG
(3H-1,2,3-三唑并[4,5-b]吡-3-氧基)三-1-吡咯烷基六氟盐 0.98Anti-PPAR Gamma /FITC 荧光素标记过氧化活化增生受体γ抗体IgG
N-乙酰-L-脯 98%0.99Anti-PPIG/FITC 荧光素标记亲环蛋白（亲环素）PPIG抗体IgG
S-乙酰半胱盐酸 99%乙酸异烯酯 99%Anti-PR/FITC 荧光素标记孕受体抗体IgG
L-2-丁酸 99%硫化锌 99.99% metals basis,3.8-4.2μm,powderanti-pRb/p105-Rb /FITC 荧光素标记化成视网膜瘤抑癌蛋白抗体IgG
7--4-甲基 98% 二溴 99%Anti-PRCP/FITC 荧光素标记脯氨酰羧肽抗体IgG
糖原磷酸化酶b（GPb）微量法检测试剂盒皮动蛋白(CTTN)免疫试剂盒现货供应
溴脱氧核苷(BrdU)免疫试剂盒*直销
大鼠血栓素A2(TXA2)免疫试剂盒现货供应
Trenbolone(仑诺)免疫试剂盒*直销
受体型酪蛋白样N(PTPRN)免疫试剂盒*直销
小鼠抗小核糖核蛋白/Sm(snRNP/Sm)抗体免疫试剂盒现货供应
抗外切体复合物成分RRP45(EXOSC9)抗体免疫试剂盒进口、组装
小鼠Wnt-10b蛋白(WNT10B)免疫试剂盒进口、组装
小鼠血管紧张素原(aGT)免疫试剂盒进口、分装
大鼠血红素氧合2(HO-2)免疫试剂盒进口、分装
