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上海市所在地
产品属于:
产品名称:恒河猴肾细胞
产品英文:MA-104
货号:FS-01X9748
细胞培养条件:MEM+10%FBS+1%P/S
生长状态:贴壁生长
产品规格:1×106
单位:T25/瓶
是否提供细胞STR鉴定:不提供STR鉴定报告
保存培养温度(℃)37
运输温度(℃):常温
细胞培养的优点:
1.研究的对象是活细胞 在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。 2.研究条件可以人为控制 pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。 3.研究的样本可以达到比较均一性 通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。 4.研究内容便于观察、检测和记录 采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。 |
细胞培养操作规程:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
注意事项:
1. 接收到细胞,肉眼观察细胞培养基颜色,显微镜观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议收到时的培养瓶拍一张照片,显微镜拍收到时的细胞100X,200X各一张)。 2.用75%的酒精消毒(建议配置75%的酒精的水是灭菌过的)。 3.严格无菌操作,打开细胞培养瓶。 4.将细胞培养瓶内的培养基用吸管*吸出(严禁直接倾倒),放入另一无菌容器中(建议换新的培养基培养细胞)。 5.用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%-EDTA1-1.5ml,显微镜下观察细胞变圆,轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落,加入终止液终止。 6.1000rpm,5min离心,重悬细胞。 7.换新的细胞培养瓶,37℃,5%CO2培养。 |
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,最后将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
人抗胃壁细胞抗体(AGPA/PCA)ELISA试剂盒 英文名称:Human anti-gastric parietal cell antibody,AGPA/PCA ELISA Kit规格:96T/48T
人抗网硬蛋白抗体(ARA)ELISA试剂盒 英文名称:Human anti-Reticulin antibody,ARA ELISA Kit规格:96T/48T
人抗突变型瓜波形蛋白抗体(MCV)ELISA试剂盒 英文名称:Human anti-myelin antibody IgA,AMA IgA ELISA Kit规格:96T/48T
人抗髓磷脂抗体IgA(AMA IgA)ELISA试剂盒 英文名称:Human anti-myelin antibody IgA,AMA IgA ELISA Kit规格:96T/48T
人抗腮腺管抗体(anti-parotid duct Ab)ELISA试剂盒 英文名称:Human anti-parotid duct antibody ELISA Kit规格:96T/48T
人抗软骨抗体(anti-cartilage-Ab)ELISA试剂盒 英文名称:Human anti-cartilage-antibody ELISA Kit规格:96T/48T
人抗人绒毛膜促性腺抗体(AhCGAb)ELISA试剂盒 英文名称:Human anti-chorionic gonadotropin-antibody,AhCGAb ELISA Kit规格:96T/48T
人抗染色体抗体(anti-chromosome Ab)ELISA试剂盒 英文名称:Human anti-chorionic gonadotropin-antibody,AhCGAb ELISA Kit规格:96T/48T
人抗脑组织抗体(ABAb)ELISA试剂盒 英文名称:Human anti-brain tissue antibody,ABAb ELISA Kit规格:96T/48T
人抗麦胶蛋白/麦溶蛋白抗体(AGA)ELISA试剂盒 英文名称:Human anti-gliadin antibody,AGA ELISA Kit规格:96T/48T
人抗磷脂酰丝抗体(APSA)ELISA试剂盒 英文名称:Human Anti-phosphatidyl serine antibody,APSA ELISA Kit规格:96T/48T
人抗磷壁抗体(TA)ELISA试剂盒 英文名称:Human anti-teichoic acid antibody,TA ELISA Kit规格:96T/48T
人抗淋巴细胞毒抗体(ALA/LCA)ELISA试剂盒 英文名称:Human anti-lymphocytotoxic antibody,ALA/LCA ELISA Kit规格:96T/48T
人抗巨噬细胞抗体(anti-macrophage Ab)ELISA试剂盒 英文名称:Human anti-macrophage antibody ELISA Kit规格:96T/48T
人抗甲状腺过氧化物抗体(TPO-Ab)ELISA试剂盒 英文名称:Human anti-Thyroid-Peroxidase antibody,TPO-Ab ELISA Kit规格:96T/48T
人抗红细胞抗体(RBC)ELISA试剂盒 英文名称:Human anti-red cell antibody ELISA Kit规格:96T/48T
人28S抗核糖体抗体(28S rRNP)ELISA试剂盒 英文名称:Human 28S ribosome RNP antibody,28S rRNP ELISA Kit规格:96T/48T
人抗核仁抗体(ANA)ELISA试剂盒 英文名称:Human anti-nucleolus antibody,ANA ELISA Kit规格:96T/48T
恒河猴肾细胞NOL8 核仁蛋白8抗体规格: 0.2ml
NUP88 核孔复合体蛋白88抗体规格: 0.2ml
OCC1 结肠癌过度表达蛋白1抗体规格: 0.2ml
OCIAD2 卵巢癌免疫反应抗原抗体规格: 0.2ml
OLFM4 凋亡蛋白OLFM44抗体规格: 0.2ml
ORAV1 口腔癌高表达的蛋白1抗体规格: 0.2ml
ORP4/OSBP2 氧化固结合蛋白4抗体规格: 0.2ml
PAGE1 前列腺相关P抗原家族成员1抗体规格: 0.2ml