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上海市所在地
产品属于：
产品名称：结肠癌细胞
产品英文：cx-1
货号：FS-01X9632
细胞培养条件：DMEM+10%FBS+1%P/S
生长状态：贴壁生长
产品规格：1×106
单位：T25/瓶
是否提供细胞STR鉴定：提供STR鉴定报告
保存培养温度（℃）37
运输温度（℃）：常温
细胞培养的优点：
| 1.研究的对象是活细胞 在实验过程中，根据要求可始终保持细胞活力，并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况，包括活细胞的形态、结构、生命活动等。 2.研究条件可以人为控制 pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件，可以根据实际需要进行人为的控制，同时，可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察，这些因素同样可以处于严格控制之下。 3.研究的样本可以达到比较均一性 通过细胞培养一定代数后，所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞，需要时，可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。 4.研究内容便于观察、检测和记录 采用各种研究技术：如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。 |
细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
注意事项：
| 1. 接收到细胞，肉眼观察细胞培养基颜色，显微镜观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议收到时的培养瓶拍一张照片，显微镜拍收到时的细胞100X,200X各一张）。 2.用75%的酒精消毒（建议配置75%的酒精的水是灭菌过的）。 3.严格无菌操作，打开细胞培养瓶。 4.将细胞培养瓶内的培养基用吸管*吸出（严禁直接倾倒），放入另一无菌容器中（建议换新的培养基培养细胞）。 5.用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%-EDTA1-1.5ml,显微镜下观察细胞变圆，轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落，加入终止液终止。 6.1000rpm，5min离心，重悬细胞。 7.换新的细胞培养瓶，37℃，5%CO2培养。 |
实验报告：
一、分离与培养：
1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，最后将组织剪成1mm3左右大小；
2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；
3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织*被消化；
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；
5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；
二、免疫荧光鉴定：
1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min；
2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗（Abbioscience公司），然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；
5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗（嘉美生物公司）， 37℃条件下放置1h；
6、用PBS冲洗3次，每次10min，最后在倒置荧光显微镜(Leica公司)下观察图像并拍照。
N-乙酰β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAGase)重组蛋白 Recombinant N-Acetyl Beta-D-Glucosaminidase (NAGase)
Pim-2原癌基因(PIM2)重组蛋白 Recombinant Pim-2 Oncogene (PIM2)
Pim-3原癌基因(PIM3)重组蛋白 Recombinant Pim-3 Oncogene (PIM3)
POTE锚蛋白域家族成员G(POTEG)重组蛋白 Recombinant POTE Ankyrin Domain Family, Member G (POTEG)
P选择素(SELP)重组蛋白 Recombinant Selectin, Platelet (SELP)
P-选择素糖蛋白配体1(PSGL1)重组蛋白 Recombinant P-Selectin Glycoprotein Ligand 1 (PSGL1)
RAD23同源物B(RAD23B)重组蛋白 Recombinant RAD23 Homolog B (RAD23B)
RAD51同源物(RAD51)重组蛋白 Recombinant RAD51 Homolog (RAD51)
RAS癌基因家族成员RAB37(RAB37)重组蛋白 Recombinant RAB37, Member RAS Oncogene Family (RAB37)
Ras相关C3肉毒菌毒素底物1(Rac1)重组蛋白 Recombinant Ras Related C3 Botulinum Toxin Substrate 1 (Rac1)
RNA结合基元蛋白20(RBM20)重组蛋白 Recombinant RNA Binding Motif Protein 20 (RBM20)
RNA结合基元蛋白24(RBM24)重组蛋白 Recombinant RNA Binding Motif Protein 24 (RBM24)
Runt相关转录因子2(RUNX2)重组蛋白 Recombinant Runt Related Transcription Factor 2 (RUNX2)
R-脊椎蛋白1(RSPO1)重组蛋白 Recombinant R-Spondin 1 (RSPO1)
R-脊椎蛋白3(RSPO3)重组蛋白 Recombinant R-Spondin 3 (RSPO3)
S100钙结合蛋白(S100)重组蛋白 Recombinant S100 Calcium Binding Protein (S100)
S100钙结合蛋白A11(S100A11)重组蛋白 Recombinant S100 Calcium Binding Protein A11 (S100A11)
S100钙结合蛋白A12(S100A12)重组蛋白 Recombinant S100 Calcium Binding Protein A12 (S100A12)
S100钙结合蛋白A13(S100A13)重组蛋白 Recombinant S100 Calcium Binding Protein A13 (S100A13)
S100钙结合蛋白B(S100B)重组蛋白 Recombinant S100 Calcium Binding Protein B (S100B)
Smad同源物7(Smad7)重组蛋白 Recombinant Mothers Against Decapentaplegic Homolog 7 (Smad7)
ADAMTS8 整合素样金属蛋白酶与8型抗体 细黄链霉菌
ADAMTS9 整合素样金属蛋白酶与9型抗体 藤黄色链霉菌
ARP4 血管生成素样蛋白4抗体 黄色长孢链霉菌
ADAMTS10 整合素样金属蛋白酶10型抗体 吸水链霉菌
APEX2 嘌呤嘧啶核酸内切酶2抗体 灰色链霉菌
AD7C-NTP 神经丝蛋白抗体 浅灰链霉菌
beta Amyloid 1-28 β淀粉样肽（1-28）抗体 球孢链霉菌
Aurora B 有丝分裂激酶B抗体 青色链霉菌
Aggrecanase-2 软骨蛋白聚糖抗体 链霉菌
ADAM10 去整合素样金属蛋白酶10抗体 灭蚊链霉菌
ASB9 含锚蛋白重复序列-细胞因子信号抑制物盒蛋白家族9抗体 烬灰链霉菌
结肠癌细胞ASB8 含锚蛋白重复序列-细胞因子信号抑制物盒蛋白家族8抗体 产色链霉菌
ABP1 植物生长激素ABP1抗体 双重轮丝链霉菌
ACTR1A 肌动蛋白相关蛋白1抗体 链霉菌
AHSP α红细胞分化相关因子抗体 白色链霉菌
ATP1 血管紧张素激活蛋白1抗体 白黄链霉菌
AFM Alpha清蛋白抗体 紫色小单孢菌(绛红小单孢菌)
AFAP1L2 AFAP1L2抗体 嗜热乳酸链球菌
