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OrigamiB(DE3)pLysS 感受态细胞 100ul*50-生命科学仪器
¥1000OrigamiB(DE3)pLysS 感受态细胞 100ul*10-生命科学仪器
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产品名称 | JM109 感受态细胞 100ul*20 |
包装 | 100ul*20 |
分类 | 克隆感受态细胞 |
培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
操作方法:
1. 从-80℃拿出,迅速插入冰中,5分钟后待菌块融化,加入目的DNA(质粒或连接产物)并用手EP管底轻轻混匀(避免用枪吸打),冰中静置25分钟。
2. 42℃水浴热激45秒,迅速放回冰中并静置2分钟,晃动会降低转化效率。
3. 向离心管中加入700 μl不含抗生素的无菌培养基 (2YT或LB),混匀后37℃,200 rpm复苏60分钟。
4. 5000 rpm离心一分钟收菌,留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT或LB培养基上。
5.将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。如果进行蓝白斑筛选操作,将平板放37℃培养至少15小时。
OPG 大鼠骨保护素 规格: 48T/96T
GAD-Ab 大鼠*脱羧酶自身抗体 规格: 48T/96T
OFQ/N 大鼠孤腓肽 规格: 48T/96T
Lebtospira 大鼠钩端螺旋体IgG 规格: 48T/96T
T 大鼠睾酮 规格: 48T/96T
u-T4 大鼠高敏甲状腺素 规格: 48T/96T
U-TSH 大鼠高灵敏度促甲状腺激素 规格: 48T/96T
HGF 大鼠肝细胞生长因子 规格: 48T/96T
SCFR 大鼠干细胞因子受体 规格: 48T/96T
SCF/MGF 大鼠干细胞因子/肥大细胞生长因子 规格: 48T/96T
IP-10/CXCL10 大鼠干扰素诱导蛋白10 规格: 48T/96T
CR 大鼠钙结合蛋白 规格: 48T/96T
CAM 大鼠钙调素 规格: 48T/96T
CaN 大鼠钙调磷酸酶 规格: 48T/96T
CAMK 2 大鼠钙/钙调素依赖性蛋白激酶2 规格: 48T/96T
CPSA 大鼠复合前列腺特异性抗原 规格: 48T/96T
sIgA 大鼠分泌型免疫球蛋白A 规格: 48T/96T
SP-A 大鼠肺表面活性物质相关蛋白A 规格: 48T/96T
DPPⅣ 大鼠二肽基肽酶Ⅳ 规格: 48T/96T
CA 大鼠儿茶酚胺 规格: 48T/96T
DAT 大鼠多巴胺转运蛋白 规格: 48T/96T
D2R 大鼠多巴胺D2受体 规格: 48T/96T
D1R 大鼠多巴胺D1受体 规格: 48T/96T
D1R 大鼠多巴胺D1受体 规格: 48T/96T
DA 大鼠多巴胺 规格: 48T/96T
TE 大鼠端粒酶 规格: 48T/96T
M-AChR 大鼠毒蕈碱型乙酰*受体 规格: 48T/96T
AZT 大鼠* 规格: 48T/96T
AIF 大鼠凋亡诱导因子 规格:
3-氨基-2-甲基吡啶 3430-10-2
5-溴-2-甲基吡啶 3430-13-5
3-氨基-6-甲基吡啶 3430-14-6
3-溴-5-甲基吡啶 3430-16-8
2-溴-3-甲基吡啶 3430-17-9
2,5-二溴-3-甲基吡啶 3430-18-0
3-氨基-5-甲基吡啶 3430-19-1
4-甲基-3-溴吡啶 3430-22-6
3,5-二溴-4-甲基吡啶 3430-23-7
3-氨基-4-甲基吡啶 3430-27-1
3-氯-4-氟环己醇 34328-61-5
2-哌啶甲醇 3433-37-2
S-叔丁基亚磺酰胺 343338-28-3
2-溴溴苄 3433-80-5
D-* 344-25-2
5-溴-2-硝基三氟甲苯 344-38-7
2-氯-3-硝基吡啶 34515-82-7
5-溴茚酮 34598-49-7
2,5-二溴硝基苯 3460-18-2
4-溴苯甲砜 3466-32-8
2,7-二甲氧基萘 3469-26-9
4-碘吡唑 3469-69-0
6-羟基-1-四氢萘酮 3470-50-6
JM109 感受态细胞 100ul*20醋酸甲脒 3473-63-0
2-氟苯胺 348-54-9
3,4-二氟溴苯 348-61-8
碳酸锌 3486-35-9
8T/96T
注意事项:
1. 产品仅用于科研感受态细胞在冰中缓慢融化,插入冰中8分钟内加入目标DNA,不可在冰中放置时间过长,长时间存放会降低转化效率。
2. 混入质粒或连接产物时应轻柔操作。
3. 转化高浓度的质粒或高效率的连接产物可相应减少Z终用于涂板的菌量。
操作步骤:
1.取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100可以根据实际情况分装使用。以下实验以50μl感受态细胞为例。
2.待感受态细胞融化后,向感受态细胞悬液中加入目的DNA(根据实际情况加入适量的DNA,通常100 μl感受态细胞能够被1 ng超螺旋质粒DNA所饱和),用移液器轻轻吹打混匀,冰浴30分钟。
3.42℃热击45秒,迅速将离心管转移到冰浴中,冰上静置2-3分钟
4.每个离心管中加入450μl无菌的SOC或LB培养基(不含抗生素),混匀后置于37℃摇床,150rpm振荡培养45分钟使菌体复苏
5.根据实验需求,取适量已转化的感受态细胞,加到含相应抗生素的或LB固体琼脂培养基上,用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开,将平板置于37℃直至液体被吸收,倒置培养,37℃培养12-16小时。