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DH5α 感受态细胞100ul*100-生命科学仪器
¥1000DH5α 感受态细胞100ul*20-生命科学仪器
¥1000JM109 感受态细胞 100ul*20-生命科学仪器
¥1000Mach1-T1 感受态细胞 100ul*100-生命科学仪器
¥1000Mach1-T1 感受态细胞 100ul*20-生命科学仪器
¥1000*0F`感受态细胞 100ul*50-生命科学仪器
¥1000*0F`感受态细胞 100ul*10-生命科学仪器
¥1000*0 电击感受态细胞 50ul*20-生命科学仪器
¥1000*0 电击感受态细胞 50ul*5-生命科学仪器
¥1000*0 感受态细胞 100ul*100-生命科学仪器
¥1000*0 感受态细胞 100ul*20-生命科学仪器
¥1000DH5α 电击感受态细胞 50ul*20-生命科学仪器
¥1000购买客户请先与我司细胞销售人员核实订购的产品名称、种属、货号、数量、协商细胞价格并预约发货期与提取方式。向销售人员索取细胞说明书并认真阅读以方便你的实验操作。产品仅用于科研
产品名称 | OrigamiB(DE3)pLysS 感受态细胞 100ul*50 |
包装 | 100ul*50 |
分类 | 表达感受态细胞 |
培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
操作方法:
1. 从-80℃拿出,迅速插入冰中,5分钟后待菌块融化,加入目的DNA(质粒或连接产物)并用手EP管底轻轻混匀(避免用枪吸打),冰中静置25分钟。
2. 42℃水浴热激45秒,迅速放回冰中并静置2分钟,晃动会降低转化效率。
3. 向离心管中加入700 μl不含抗生素的无菌培养基 (2YT或LB),混匀后37℃,200 rpm复苏60分钟。
4. 5000 rpm离心一分钟收菌,留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT或LB培养基上。
5.将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。如果进行蓝白斑筛选操作,将平板放37℃培养至少15小时。
HBXIP 人乙型肝炎病毒X蛋白相互作用蛋白 规格: 48T/96T
HBXIP 人乙型肝炎病毒X蛋白结合蛋白 规格: 48T/96T
OrigamiB(DE3)pLysS 感受态细胞 100ul*50 HBsAg 人乙型肝炎表面抗原 规格: 48T/96T
HPA 人乙酰肝素酶 规格: 48T/96T
ChE 人乙酰*酯酶 规格: 48T/96T
AChRab 人乙酰*受体抗体 规格: 48T/96T
ACH 人乙酰* 规格: 48T/96T
AD 人乙胺碘呋酮 规格: 48T/96T
PL 人胰脂肪酶 规格: 48T/96T
Pancreastatin 人胰抑制素 规格: 48T/96T
人胰腺癌标志物CA242ELISA Kit,48T/96T 人胰腺癌标志物CA242ELISA Kit,48T/96T 规格: 48T/96T
PK 人* 规格: 48T/96T
GLP-1 人胰高血糖素样肽1 规格: 48T/96T
GC 人胰高血糖素 规格: 48T/96T
PP 人胰多肽 规格: 48T/96T
Amylin 人胰淀素 规格: 48T/96T
PAMY 人胰* 规格: 48T/96T
IA-2A 人胰岛细胞抗原2抗体/蛋白*磷酸
shēng huà shì jì 偶氮氯膦Ⅲ 容量: 25克
shēng huà shì jì 偶氮氯膦Ⅰ 容量: 5克
shēng huà shì jì 偶氮二甲酰胺 容量: 5克
shēng huà shì jì 偶氮苯 容量: 1升
shēng huà shì jì 诺纳德P40 容量: 500克
shēng huà shì jì 牛胰岛素 容量: RT 25克
shēng huà shì jì 牛血纤维蛋白原 容量: RT 25克
shēng huà shì jì 牛血清白蛋白标准溶液 容量: 1公斤
shēng huà shì jì 牛血清白蛋白(第五组份) 容量: RT 25克
shēng huà shì jì 牛血清白蛋白 容量: 100克
shēng huà shì jì 牛肉浸膏 容量: 500克
shēng huà shì jì 牛肉粉 容量: 500克
酶抗体 规格: 48T/96T
注意事项:
1. 产品仅用于科研感受态细胞在冰中缓慢融化,插入冰中8分钟内加入目标DNA,不可在冰中放置时间过长,长时间存放会降低转化效率。
2. 混入质粒或连接产物时应轻柔操作。
3. 转化高浓度的质粒或高效率的连接产物可相应减少Z终用于涂板的菌量。
操作步骤:
1.取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100可以根据实际情况分装使用。以下实验以50μl感受态细胞为例。
2.待感受态细胞融化后,向感受态细胞悬液中加入目的DNA(根据实际情况加入适量的DNA,通常100 μl感受态细胞能够被1 ng超螺旋质粒DNA所饱和),用移液器轻轻吹打混匀,冰浴30分钟。
3.42℃热击45秒,迅速将离心管转移到冰浴中,冰上静置2-3分钟
4.每个离心管中加入450μl无菌的SOC或LB培养基(不含抗生素),混匀后置于37℃摇床,150rpm振荡培养45分钟使菌体复苏
5.根据实验需求,取适量已转化的感受态细胞,加到含相应抗生素的或LB固体琼脂培养基上,用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开,将平板置于37℃直至液体被吸收,倒置培养,37℃培养12-16小时。