OrigamiB(DE3)pLysS 感受态细胞 100ul*50-生命科学仪器
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OrigamiB(DE3)pLysS 感受态细胞 100ul*50-生命科学仪器

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2019-09-24 09:41:26
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上海莼试生物技术有限公司

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产品简介

OrigamiB(DE3)pLysS 感受态细胞 100ul*50运输;收到细胞后请镜下观察细胞生长状态,如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作,如悬浮的细胞较多,请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。

详细介绍

购买客户请先与我司细胞销售人员核实订购的产品名称、种属、货号、数量、协商细胞价格并预约发货期与提取方式。向销售人员索取细胞说明书并认真阅读以方便你的实验操作。产品仅用于科研

产品名称OrigamiB(DE3)pLysS 感受态细胞 100ul*50
包装100ul*50
分类表达感受态细胞

培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
操作方法:
1. 从-80℃拿出,迅速插入冰中,5分钟后待菌块融化,加入目的DNA(质粒或连接产物)并用手EP管底轻轻混匀(避免用枪吸打),冰中静置25分钟。
2. 42℃水浴热激45秒,迅速放回冰中并静置2分钟,晃动会降低转化效率。
3. 向离心管中加入700 μl不含抗生素的无菌培养基 (2YT或LB),混匀后37℃,200 rpm复苏60分钟。
4. 5000 rpm离心一分钟收菌,留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT或LB培养基上。
5.将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。如果进行蓝白斑筛选操作,将平板放37℃培养至少15小时。

 HBXIP 人乙型肝炎病毒X蛋白相互作用蛋白 规格: 48T/96T

 HBXIP 人乙型肝炎病毒X蛋白结合蛋白 规格: 48T/96T

OrigamiB(DE3)pLysS 感受态细胞 100ul*50 HBsAg 人乙型肝炎表面抗原 规格: 48T/96T

 HPA 人乙酰肝素酶 规格: 48T/96T

 ChE 人乙酰*酯酶 规格: 48T/96T

 AChRab 人乙酰*受体抗体 规格: 48T/96T

 ACH 人乙酰* 规格: 48T/96T

 AD 人乙胺碘呋酮 规格: 48T/96T

 PL 人胰脂肪酶 规格: 48T/96T

 Pancreastatin 人胰抑制素 规格: 48T/96T

人胰腺癌标志物CA242ELISA Kit,48T/96T 人胰腺癌标志物CA242ELISA Kit,48T/96T 规格: 48T/96T

 PK 人* 规格: 48T/96T

 GLP-1 人胰高血糖素样肽1 规格: 48T/96T

 GC 人胰高血糖素 规格: 48T/96T

 PP 人胰多肽 规格: 48T/96T

 Amylin 人胰淀素 规格: 48T/96T

 PAMY 人胰* 规格: 48T/96T

 IA-2A 人胰岛细胞抗原2抗体/蛋白*磷酸

shēng huà shì jì 偶氮氯膦Ⅲ 容量: 25克

shēng huà shì jì 偶氮氯膦Ⅰ 容量: 5克

shēng huà shì jì 偶氮二甲酰胺 容量: 5克

shēng huà shì jì 偶氮苯 容量: 1升

shēng huà shì jì 诺纳德P40 容量: 500克

shēng huà shì jì 牛胰岛素 容量: RT 25克

shēng huà shì jì 牛血纤维蛋白原 容量: RT 25克

shēng huà shì jì 牛血清白蛋白标准溶液 容量: 1公斤

shēng huà shì jì 牛血清白蛋白(第五组份) 容量: RT 25克

shēng huà shì jì 牛血清白蛋白 容量: 100克

shēng huà shì jì 牛肉浸膏 容量: 500克

shēng huà shì jì 牛肉粉 容量: 500克

酶抗体 规格: 48T/96T

注意事项:

1. 产品仅用于科研感受态细胞在冰中缓慢融化,插入冰中8分钟内加入目标DNA,不可在冰中放置时间过长,长时间存放会降低转化效率。
2. 混入质粒或连接产物时应轻柔操作。
3. 转化高浓度的质粒或高效率的连接产物可相应减少Z终用于涂板的菌量。
操作步骤:
1.取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100可以根据实际情况分装使用。以下实验以50μl感受态细胞为例。
2.待感受态细胞融化后,向感受态细胞悬液中加入目的DNA(根据实际情况加入适量的DNA,通常100        μl感受态细胞能够被1         ng超螺旋质粒DNA所饱和),用移液器轻轻吹打混匀,冰浴30分钟。
3.42℃热击45秒,迅速将离心管转移到冰浴中,冰上静置2-3分钟
4.每个离心管中加入450μl无菌的SOC或LB培养基(不含抗生素),混匀后置于37℃摇床,150rpm振荡培养45分钟使菌体复苏
 5.根据实验需求,取适量已转化的感受态细胞,加到含相应抗生素的或LB固体琼脂培养基上,用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开,将平板置于37℃直至液体被吸收,倒置培养,37℃培养12-16小时。

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