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OrigamiB(DE3)pLysS 感受态细胞 100ul*50-生命科学仪器
¥1000OrigamiB(DE3)pLysS 感受态细胞 100ul*10-生命科学仪器
¥1000OrigamiB(DE3) 感受态细胞 100ul*50-生命科学仪器
¥1000OrigamiB(DE3) 感受态细胞 100ul*10-生命科学仪器
¥1000Origami2(DE3) 感受态细胞 100ul*50-生命科学仪器
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¥1000Origami(DE3) 感受态细胞 100ul*50-生命科学仪器
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¥1000Rosetta 2(DE3) 感受态细胞 100ul*50-生命科学仪器
¥1000Rosetta-gami B(DE3) 感受态细胞 100ul*50-生命科学仪器
¥1000Rosetta-gami B(DE3) 感受态细胞 100ul*10-生命科学仪器
¥1000购买客户请先与我司细胞销售人员核实订购的产品名称、种属、货号、数量、协商细胞价格并预约发货期与提取方式。向销售人员索取细胞说明书并认真阅读以方便你的实验操作。产品仅用于科研
产品名称 | *0F`感受态细胞 100ul*10 |
包装 | 100ul*10 |
分类 | 克隆感受态细胞 |
培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
操作方法:
1. 从-80℃拿出,迅速插入冰中,5分钟后待菌块融化,加入目的DNA(质粒或连接产物)并用手EP管底轻轻混匀(避免用枪吸打),冰中静置25分钟。
2. 42℃水浴热激45秒,迅速放回冰中并静置2分钟,晃动会降低转化效率。
3. 向离心管中加入700 μl不含抗生素的无菌培养基 (2YT或LB),混匀后37℃,200 rpm复苏60分钟。
4. 5000 rpm离心一分钟收菌,留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT或LB培养基上。
5.将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。如果进行蓝白斑筛选操作,将平板放37℃培养至少15小时。
AMA 大鼠抗心肌抗体 规格: 48T/96T
dsDNA 大鼠抗双链DNA抗体/天然DNA抗体 规格: 48T/96T
dsDNA 大鼠抗双链DNA抗体/天然DNA抗体 规格: 48T/96T
ASMA 大鼠抗平滑肌抗体 规格: 48T/96T
ATR 大鼠抗*受体 规格: 48T/96T
AT-Ⅲ 大鼠抗*Ⅲ抗体 规格: 48T/96T
AECA 大鼠抗内皮细胞抗体 规格: 48T/96T
TRACP-5b 大鼠抗酒石酸酸性磷酸酶5b 规格: 48T/96T
AsAb 大鼠抗精抗体 规格: 48T/96T
ATGA/TGAB 大鼠抗甲状腺球蛋白抗体 规格: 48T/96T
TPO-Ab 大鼠抗甲状腺过氧化物酶抗体 规格: 48T/96T
TPO-Ab 大鼠抗甲状腺过氧化物酶抗体 规格: 48T/96T
EMA IgA 大鼠抗肌内膜抗体IgA 规格: 48T/96T
gp210 大鼠抗核膜糖蛋白210抗体 规格: 48T/96T
AMA 大鼠抗单核细胞抗体 规格: 48T/96T
TRAb 大鼠抗促甲状腺素受体抗体 规格: 48T/96T
αFodrin IgG/IgA 大鼠抗α-胞衬蛋白抗体IgG/IgA 规格: 48T/96T
大鼠抗IVIgG抗体ELISA Kit,48T/96T 大鼠抗IVIgG抗体ELISA Kit,48T/96T 规格: 48T/96T
大鼠抗IgE受体抗体ELISA Kit,48T/96T 大鼠抗IgE受体抗体ELISA Kit,48T/96T 规格: 48T/96T
MIF 大鼠巨噬细胞移动抑制因子 规格: 48T/96T
MIP-5 大鼠巨噬细胞炎症蛋白5 规格: 48
4-氯吡咯并嘧啶 3680-69-1
3-溴丙基甲基醚 36865-41-5
3,4-二胺基苄氧基三氟化物 368-71-8
间三氟甲基苯腈 368-77-4
3,4-二氟硝基苯 369-34-6
3-溴-4-氯吡啶 36953-42-1
*0F`感受态细胞 100ul*104-氟茴香硫醚 371-15-3
5-溴嘧啶-2-羧酸 37131-87-6
4-氟苯胺 371-40-4
4-氟* 371-41-5
对氟苯硫酚 371-42-6
2-氟乙醇 371-62-0
氰乙酸 372-09-8
T/96T
注意事项:
1. 产品仅用于科研感受态细胞在冰中缓慢融化,插入冰中8分钟内加入目标DNA,不可在冰中放置时间过长,长时间存放会降低转化效率。
2. 混入质粒或连接产物时应轻柔操作。
3. 转化高浓度的质粒或高效率的连接产物可相应减少Z终用于涂板的菌量。
操作步骤:
1.取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100可以根据实际情况分装使用。以下实验以50μl感受态细胞为例。
2.待感受态细胞融化后,向感受态细胞悬液中加入目的DNA(根据实际情况加入适量的DNA,通常100 μl感受态细胞能够被1 ng超螺旋质粒DNA所饱和),用移液器轻轻吹打混匀,冰浴30分钟。
3.42℃热击45秒,迅速将离心管转移到冰浴中,冰上静置2-3分钟
4.每个离心管中加入450μl无菌的SOC或LB培养基(不含抗生素),混匀后置于37℃摇床,150rpm振荡培养45分钟使菌体复苏
5.根据实验需求,取适量已转化的感受态细胞,加到含相应抗生素的或LB固体琼脂培养基上,用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开,将平板置于37℃直至液体被吸收,倒置培养,37℃培养12-16小时。