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DH5α 感受态细胞100ul*100-生命科学仪器
¥1000DH5α 感受态细胞100ul*20-生命科学仪器
¥1000JM109 感受态细胞 100ul*20-生命科学仪器
¥1000Mach1-T1 感受态细胞 100ul*100-生命科学仪器
¥1000Mach1-T1 感受态细胞 100ul*20-生命科学仪器
¥1000*0F`感受态细胞 100ul*50-生命科学仪器
¥1000*0F`感受态细胞 100ul*10-生命科学仪器
¥1000*0 电击感受态细胞 50ul*20-生命科学仪器
¥1000*0 电击感受态细胞 50ul*5-生命科学仪器
¥1000*0 感受态细胞 100ul*100-生命科学仪器
¥1000*0 感受态细胞 100ul*20-生命科学仪器
¥1000DH5α 电击感受态细胞 50ul*20-生命科学仪器
¥1000购买客户请先与我司细胞销售人员核实订购的产品名称、种属、货号、数量、协商细胞价格并预约发货期与提取方式。向销售人员索取细胞说明书并认真阅读以方便你的实验操作。产品仅用于科研
产品名称 | Origami(DE3) 感受态细胞 100ul*50 |
包装 | 100ul*50 |
分类 | 表达感受态细胞 |
培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
操作方法:
1. 从-80℃拿出,迅速插入冰中,5分钟后待菌块融化,加入目的DNA(质粒或连接产物)并用手EP管底轻轻混匀(避免用枪吸打),冰中静置25分钟。
2. 42℃水浴热激45秒,迅速放回冰中并静置2分钟,晃动会降低转化效率。
3. 向离心管中加入700 μl不含抗生素的无菌培养基 (2YT或LB),混匀后37℃,200 rpm复苏60分钟。
4. 5000 rpm离心一分钟收菌,留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT或LB培养基上。
5.将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。如果进行蓝白斑筛选操作,将平板放37℃培养至少15小时。
TF 人组织因子 规格: 48T/96T
t-PA 人组织型纤溶酶原激活剂 规格: 48T/96T
LTBP2 人组织内转化生长因子β结合蛋白2 规格: 48T/96T
TPS 人组织多肽特异性抗原 规格: 48T/96T
TPA 人组织多肽抗原 规格: 48T/96T
HD 人组织蛋白去乙酰化酶 规格: 48T/96T
Cath Ab 人组织蛋白酶抗体 规格: 48T/96T
cath-K 人组织蛋白酶K 规格: 48T/96T
cath-D 人组织蛋白酶D 规格: 48T/96T
histon-H2b 人组蛋白H2b 规格: 48T/96T
HIS 人组胺 规格: 48T/96T
tPSA 人总前列腺特异抗原 规格: 48T/96T
CENP-B 人着丝粒蛋白B 规格: 48T/96T
TF 人转移因子 规格: 48T/96T
shēng huà shì jì 葡萄糖酪胨琼脂 容量: 100克
shēng huà shì jì 葡萄糖蛋白胨培养基 容量:
shēng huà shì jì 葡萄糖半固体培养基 容量: RT 5米
shēng huà shì jì 葡萄糖铵培养基 容量: RT 1米
shēng huà shì jì 葡萄糖-6-磷酸脱氢酶测试盒 容量: RT 1000支/盒
shēng huà shì jì 葡萄球菌增菌肉汤 容量: 2~8℃ 100毫克
shēng huà shì jì 葡萄球菌选择性琼脂110号 容量: 100克
shēng huà shì jì 葡萄球菌选择性琼脂 容量: 1克
Origami(DE3) 感受态细胞 100ul*50shēng huà shì jì 葡糖酸内酯 容量: 100克
shēng huà shì jì 葡聚糖凝胶QAE-A50 容量: 10000U
shēng huà shì jì 葡聚糖凝胶QAE-A25 容量: 保存:-20℃ 2000U
shēng huà shì jì 葡聚糖凝胶LH-60 容量: 250毫克
shēng huà shì jì 葡聚糖凝胶LH-20 容量: 50毫克
shēng huà shì jì 葡聚糖凝胶G-75 容量: 25毫克
shēng huà shì jì 葡聚糖凝胶G-50 容量: 2~8℃ 500毫克
shēng huà shì jì 葡聚糖凝胶G-25 容量: 10KU
shēng huà shì jì 葡聚糖凝胶G-200 容量: 250毫克
shēng huà shì jì 葡聚糖凝胶G-150 容量: 2~8℃ 50毫克
注意事项:
1. 产品仅用于科研感受态细胞在冰中缓慢融化,插入冰中8分钟内加入目标DNA,不可在冰中放置时间过长,长时间存放会降低转化效率。
2. 混入质粒或连接产物时应轻柔操作。
3. 转化高浓度的质粒或高效率的连接产物可相应减少Z终用于涂板的菌量。
操作步骤:
1.取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100可以根据实际情况分装使用。以下实验以50μl感受态细胞为例。
2.待感受态细胞融化后,向感受态细胞悬液中加入目的DNA(根据实际情况加入适量的DNA,通常100 μl感受态细胞能够被1 ng超螺旋质粒DNA所饱和),用移液器轻轻吹打混匀,冰浴30分钟。
3.42℃热击45秒,迅速将离心管转移到冰浴中,冰上静置2-3分钟
4.每个离心管中加入450μl无菌的SOC或LB培养基(不含抗生素),混匀后置于37℃摇床,150rpm振荡培养45分钟使菌体复苏
5.根据实验需求,取适量已转化的感受态细胞,加到含相应抗生素的或LB固体琼脂培养基上,用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开,将平板置于37℃直至液体被吸收,倒置培养,37℃培养12-16小时。