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培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
操作方法：
1. 从-80℃拿出，迅速插入冰中，5分钟后待菌块融化，加入目的DNA（质粒或连接产物）并用手EP管底轻轻混匀(避免用枪吸打)，冰中静置25分钟。
2. 42℃水浴热激45秒，迅速放回冰中并静置2分钟，晃动会降低转化效率。
3. 向离心管中加入700 μl不含抗生素的无菌培养基 (2YT或LB)，混匀后37℃，200 rpm复苏60分钟。
4. 5000 rpm离心一分钟收菌，留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT或LB培养基上。
5.将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。如果进行蓝白斑筛选操作，将平板放37℃培养至少15小时。

bFGF 大鼠碱性成纤维生长因子 规格： 48T/96T

 TAb 大鼠甲状腺素抗体 规格： 48T/96T

 T4 大鼠甲状腺素 规格： 48T/96T

 TG 大鼠甲状腺球蛋白 规格： 48T/96T

 TPO 大鼠甲状腺过氧化物酶 规格： 48T/96T

 PTHrP 大鼠甲状旁腺激素相关蛋白 规格： 48T/96T

 PTH 大鼠甲状旁腺激素 规格： 48T/96T

 AFP 大鼠甲种胎儿球蛋白/甲胎蛋白 规格： 48T/96T

 Methylase 大鼠甲基化酶 规格： 48T/96T

 SDF-1β/CXCL12 大鼠基质细胞衍生因子1β 规格： 48T/96T

 SDF-1a/CXCL12 大鼠基质细胞衍生因子1a 规格： 48T/96T

 TIMP-4 大鼠基质金属蛋白酶抑制因子4 规格： 48T/96T

 TIMP-3 大鼠基质金属蛋白酶抑制因子3 规格： 48T/96T

 TIMP-2 大鼠基质金属蛋白酶抑制因子2 规格： 48T/96T

 TIMP-1 大鼠基质金属蛋白酶抑制因子1 规格： 48T/96T

 MMP-9 大鼠基质金属蛋白酶9/明胶酶B 规格： 48T/96T

 MMP-8 大鼠基质金属蛋白酶8/中性粒细胞胶原酶 规格： 48T/96T

 MMP-7 大鼠基质金属蛋白酶7 规格： 48T/96T

 MMP-5 大鼠基质金属蛋白酶5 规格： 48T/96T

Mach1-T1 感受态细胞 100ul*20 MMP-4 大鼠基质金属蛋白酶4 规格： 48T/96T

 MMP-3 大鼠基质金属蛋白酶3 规格： 48T/96T

 MMP-2 大鼠基质金属蛋白酶2/明胶酶A 规格： 48T/96T

 MMP-13 大鼠基质金属蛋白酶13 规格： 48T/96T

 MMP-10 大鼠基质金属蛋白酶10 规格： 48T/96T

 MMP-1 大鼠基质金属蛋白酶1 规格： 48T/96T

 Myosin 大鼠肌球蛋白 规格： 48T/96T

 MYO/MB 大鼠肌红蛋白 规格： 48T/96T

 MYO/MB 大鼠肌红蛋白 规格： 48T/96T

 Tn-Ⅰ 大鼠肌钙蛋白Ⅰ 规格： 48T/96T

  ACV-RAb 大鼠活化素A受体抗体 规格： 48

2,2,2-三氟乙 354-38-1

对氨基酸甲酯 3544-25-0

5-溴烟腈 35590-37-5

N-芴甲氧羰基-L-* 35661-39-3

Fmoc-L-苯* 35661-40-6

Fmoc-L-* 35661-60-0

N-alpha-苄氧羰基-L-2,3-二氨基丙酸 35761-26-3

2-甲基噻唑 3581-87-1

三氟甲磺酸酐 358-23-6

苄基氯甲基醚 3587-60-8

CBZ-DL-苯* 3588-57-6

2-溴* 35905-85-2

2,2-二氟乙醇 359-13-7

樟脑磺酸 35963-20-3

丙脒盐酸盐 3599-89-1

N-羟基氨基甲酸叔丁酯 36016-38-3

鸟苷-5'-三磷酸三钠盐 36051-31-7

6-氨基*甲酯 36052-24-1

5-溴-2,4-二氯嘧啶 36082-50-5

4-氨基-5-咪唑甲酰胺 360-97-4

N-苄基哌啶酮 3612-20-2

氯甲酰乙酸乙酯 36239-09-5

2-氯-3-吡啶甲醛 36404-88-3

3-氰基-1,2,4-三氮唑 3641-10-9

4-溴-1-氟-2-硝基苯 364-73-8

4-氟-3-硝基苯胺 364-76-1

T/96T

注意事项:
1. 产品仅用于科研感受态细胞在冰中缓慢融化，插入冰中8分钟内加入目标DNA，不可在冰中放置时间过长，长时间存放会降低转化效率。
2. 混入质粒或连接产物时应轻柔操作。
3. 转化高浓度的质粒或高效率的连接产物可相应减少Z终用于涂板的菌量。
操作步骤：
1．取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100可以根据实际情况分装使用。以下实验以50μl感受态细胞为例。
2．待感受态细胞融化后，向感受态细胞悬液中加入目的DNA（根据实际情况加入适量的DNA，通常100        μl感受态细胞能够被1         ng超螺旋质粒DNA所饱和），用移液器轻轻吹打混匀，冰浴30分钟。
3．42℃热击45秒，迅速将离心管转移到冰浴中，冰上静置2-3分钟
4．每个离心管中加入450μl无菌的SOC或LB培养基（不含抗生素），混匀后置于37℃摇床，150rpm振荡培养45分钟使菌体复苏
 5．根据实验需求，取适量已转化的感受态细胞，加到含相应抗生素的或LB固体琼脂培养基上，用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开，将平板置于37℃直至液体被吸收，倒置培养，37℃培养12-16小时。