购买客户请先与我司细胞销售人员核实订购的产品名称、种属、货号、数量、协商细胞价格并预约发货期与提取方式。向销售人员索取细胞说明书并认真阅读以方便你的实验操作。产品仅用于科研

培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
操作方法：
1. 从-80℃拿出，迅速插入冰中，5分钟后待菌块融化，加入目的DNA（质粒或连接产物）并用手EP管底轻轻混匀(避免用枪吸打)，冰中静置25分钟。
2. 42℃水浴热激45秒，迅速放回冰中并静置2分钟，晃动会降低转化效率。
3. 向离心管中加入700 μl不含抗生素的无菌培养基 (2YT或LB)，混匀后37℃，200 rpm复苏60分钟。
4. 5000 rpm离心一分钟收菌，留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT或LB培养基上。
5.将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。如果进行蓝白斑筛选操作，将平板放37℃培养至少15小时。

 PCDH1 人原钙黏素1 规格： 48T/96T

 Protamine 人* 规格： 48T/96T

 iNOS 人诱导型一氧化氮合成酶 规格： 48T/96T

 FFA 人游离脂肪酸 规格： 48T/96T

 FEP 人游离原卟啉 规格： 48T/96T

 f-Hb 人游离血红蛋白 规格： 48T/96T

 Free-T3 人游离三碘甲状腺原氨酸 规格： 48T/96T

 fPSA 人游离前列腺特异性抗原 规格： 48T/96T

 FT4 人游离甲状腺素 规格： 48T/96T

 F-TESTO 人游离睾酮 规格： 48T/96T

 FP-S 人游离蛋白S 规格： 48T/96T

 FE3 人游离雌三醇 规格： 48T/

shēng huà shì jì 皮粉（含铬） 容量： RT，避光 5克

shēng huà shì jì 铍试剂II 容量： RT 25克

shēng huà shì jì 铍试剂Ⅰ 容量： RT 1克

shēng huà shì jì 硼酸三正丁酯 容量： 25克

OrigamiB(DE3) 感受态细胞 100ul*50shēng huà shì jì 硼酸铅 容量： RT 10克

shēng huà shì jì 硼酸镁 容量： 500克

shēng huà shì jì 硼酸铵 容量： 5克

shēng huà shì jì 硼酸 容量： 保存：-20℃ 25毫克

shēng huà shì jì 硼 容量： 5克

shēng huà shì jì 硼 容量： RT 25克

shēng huà shì jì 培养皿刷 容量： 2～8℃ 1KU

shēng huà shì jì 滂胺天蓝 容量： 1克

shēng huà shì jì 派洛宁Y 容量： 25克

shēng huà shì jì 派洛宁B 容量： 100克

shēng huà shì jì 哌-N，N-双（2-乙磺酸钠） 容量： 保存：-20℃ 250毫克

shēng huà shì jì 嗪-N,N-双（2-乙磺酸） 容量： 1克

shēng huà shì jì 嗪-N，N-双（2-羟基乙磺酸）钠盐 容量：

96T

注意事项:

1. 产品仅用于科研感受态细胞在冰中缓慢融化，插入冰中8分钟内加入目标DNA，不可在冰中放置时间过长，长时间存放会降低转化效率。
2. 混入质粒或连接产物时应轻柔操作。
3. 转化高浓度的质粒或高效率的连接产物可相应减少Z终用于涂板的菌量。
操作步骤：
1．取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100可以根据实际情况分装使用。以下实验以50μl感受态细胞为例。
2．待感受态细胞融化后，向感受态细胞悬液中加入目的DNA（根据实际情况加入适量的DNA，通常100        μl感受态细胞能够被1         ng超螺旋质粒DNA所饱和），用移液器轻轻吹打混匀，冰浴30分钟。
3．42℃热击45秒，迅速将离心管转移到冰浴中，冰上静置2-3分钟
4．每个离心管中加入450μl无菌的SOC或LB培养基（不含抗生素），混匀后置于37℃摇床，150rpm振荡培养45分钟使菌体复苏
 5．根据实验需求，取适量已转化的感受态细胞，加到含相应抗生素的或LB固体琼脂培养基上，用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开，将平板置于37℃直至液体被吸收，倒置培养，37℃培养12-16小时。