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OrigamiB(DE3)pLysS 感受态细胞 100ul*50-生命科学仪器
¥1000OrigamiB(DE3)pLysS 感受态细胞 100ul*10-生命科学仪器
¥1000OrigamiB(DE3) 感受态细胞 100ul*50-生命科学仪器
¥1000OrigamiB(DE3) 感受态细胞 100ul*10-生命科学仪器
¥1000Origami2(DE3) 感受态细胞 100ul*50-生命科学仪器
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¥1000Origami(DE3) 感受态细胞 100ul*50-生命科学仪器
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¥1000Rosetta-gami(DE3)pLysS 感受态细胞-生命科学仪器
¥1000Rosetta 2(DE3) 感受态细胞 100ul*50-生命科学仪器
¥1000Rosetta-gami B(DE3) 感受态细胞 100ul*50-生命科学仪器
¥1000Rosetta-gami B(DE3) 感受态细胞 100ul*10-生命科学仪器
¥1000购买客户请先与我司细胞销售人员核实订购的产品名称、种属、货号、数量、协商细胞价格并预约发货期与提取方式。向销售人员索取细胞说明书并认真阅读以方便你的实验操作。产品仅用于科研
产品名称 | *0 电击感受态细胞 50ul*5 |
包装 | 50ul*5 |
分类 | 克隆感受态细胞 |
培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
操作方法:
1. 从-80℃拿出,迅速插入冰中,5分钟后待菌块融化,加入目的DNA(质粒或连接产物)并用手EP管底轻轻混匀(避免用枪吸打),冰中静置25分钟。
2. 42℃水浴热激45秒,迅速放回冰中并静置2分钟,晃动会降低转化效率。
3. 向离心管中加入700 μl不含抗生素的无菌培养基 (2YT或LB),混匀后37℃,200 rpm复苏60分钟。
4. 5000 rpm离心一分钟收菌,留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT或LB培养基上。
5.将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。如果进行蓝白斑筛选操作,将平板放37℃培养至少15小时。
bFGF-9 小鼠碱性成纤维细胞生长因子9 规格: 48T/96T
bFGF-6 小鼠碱性成纤维细胞生长因子6 规格: 48T/96T
bFGF-4 小鼠碱性成纤维细胞生长因子4 规格: 48T/96T
bFGF 小鼠碱性成纤维细胞生长因子 规格: 48T/96T
TAb 小鼠甲状腺素抗体 规格: 48T/96T
T4 小鼠甲状腺素 规格: 48T/96T
TG 小鼠甲状腺球蛋白 规格: 48T/96T
TPO 小鼠甲状腺过氧化物酶 规格: 48T/96T
PTHrP 小鼠甲状旁腺激素相关蛋白 规格: 48T/96T
PTH 小鼠甲状旁腺激素 规格: 48T/96T
AFP 小鼠甲种胎儿球蛋白/甲胎蛋白 规格: 48T/96T
Methylase 小鼠甲基化酶 规格: 48T/96T
SDF-1β/CXCL12 小鼠基质细胞衍生因子1β 规格: 48T/96T
SDF-1a/CXCL12 小鼠基质细胞衍生因子1a 规格: 48T/96T
TIMP-4 小鼠基质金属蛋白酶抑制因子4 规格:
2-氯-6-羟基* 38025-90-0
4-氨基四氢吡喃 38041-19-9
二氟乙酸 381-73-7
3-氯-2-氰基吡啶 38180-46-0
2-氯-5-氟* 38186-88-8
*0 电击感受态细胞 50ul*52-氨基-5-溴* 38191-34-3
5-溴-2-羟基嘧啶 38353-06-9
三氟乙酸乙酯 383-63-1
3-氯-2,4-二氟硝基苯 3847-58-3
2-肟氰乙酸乙酯 3849-21-6
2,6-二氯* 38496-18-3
2,6-二氟苯甲酸 385-00-2
3-氟-2-硝基* 385-01-3
2-氟-6-硝基苯甲酸 385-02-4
2-氯-6-甲氧基-3-硝基吡啶 38533-61-8
2,3-二氟溴苯 38573-88-5
1,3-环戊二酮 3859-41-4
2,3,4-三氟苯胺 3862-73-5
3,4-二氟苯胺 3863-11-4
6-三氟甲基吡啶-3-醛 386704-12-7
喹啉-8-甲醛 38707-70-9
4-氟吲哚 387-43-9
7-氟吲哚 387-44-0
48T/96T
注意事项:
1. 产品仅用于科研感受态细胞在冰中缓慢融化,插入冰中8分钟内加入目标DNA,不可在冰中放置时间过长,长时间存放会降低转化效率。
2. 混入质粒或连接产物时应轻柔操作。
3. 转化高浓度的质粒或高效率的连接产物可相应减少Z终用于涂板的菌量。
操作步骤:
1.取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100可以根据实际情况分装使用。以下实验以50μl感受态细胞为例。
2.待感受态细胞融化后,向感受态细胞悬液中加入目的DNA(根据实际情况加入适量的DNA,通常100 μl感受态细胞能够被1 ng超螺旋质粒DNA所饱和),用移液器轻轻吹打混匀,冰浴30分钟。
3.42℃热击45秒,迅速将离心管转移到冰浴中,冰上静置2-3分钟
4.每个离心管中加入450μl无菌的SOC或LB培养基(不含抗生素),混匀后置于37℃摇床,150rpm振荡培养45分钟使菌体复苏
5.根据实验需求,取适量已转化的感受态细胞,加到含相应抗生素的或LB固体琼脂培养基上,用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开,将平板置于37℃直至液体被吸收,倒置培养,37℃培养12-16小时。