购买客户请先与我司细胞销售人员核实订购的产品名称、种属、货号、数量、协商细胞价格并预约发货期与提取方式。向销售人员索取细胞说明书并认真阅读以方便你的实验操作。产品仅用于科研

培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
操作方法：
1. 从-80℃拿出，迅速插入冰中，5分钟后待菌块融化，加入目的DNA（质粒或连接产物）并用手EP管底轻轻混匀(避免用枪吸打)，冰中静置25分钟。
2. 42℃水浴热激45秒，迅速放回冰中并静置2分钟，晃动会降低转化效率。
3. 向离心管中加入700 μl不含抗生素的无菌培养基 (2YT或LB)，混匀后37℃，200 rpm复苏60分钟。
4. 5000 rpm离心一分钟收菌，留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT或LB培养基上。
5.将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。如果进行蓝白斑筛选操作，将平板放37℃培养至少15小时。

 OLAb 兔氧化低密度脂蛋白抗体 规格： 48T/96T

 Fbg 兔血纤蛋白原 规格： 48T/96T

 TXB2 兔血栓素B2 规格： 48T/96T

 CH50 兔血清总补体 规格： 48T/96T

 NO 兔血清一氧化氮 规格： 48T/96T

 GMP-140 兔血浆α颗粒膜蛋白 规格： 48T/96T

 VWF 兔血管性血友病因子/瑞斯托霉素辅因子 规格： 48T/96T

 ANG-2 兔血管生成素2 规格： 48T/96T

 VCAM-1/CD106 兔血管内皮细胞粘附分子1 规格： 48T/96T

 VEGF 兔血管内皮细胞生长因子 规格： 48T/96T

 ANG-Ⅱ 兔血管紧张素Ⅱ 规格： 48T/96T

 cT 兔心肌特异性肌钙蛋白T 规格： 48T/96T

 Rosetta-gami B(DE3) 感受态细胞 100ul*50cTn-Ⅰ 兔心肌肌钙蛋白Ⅰ 规格： 48T/96T

 TAFI 兔纤溶抑制因子 规格： 48T/96T

 PAP 兔纤溶酶抗纤溶酶复合物 规格： 48T/96T

 GHbA1c 兔糖化血红蛋白A1c 规格： 48T/96T

 Renin 兔肾素 规格： 48T/96T

 PEDF 兔色素上皮衍生因子 规格： 48T/96T

 LF/LTF 兔乳铁传递蛋白/乳铁蛋白 规格：

shēng huà shì jì * 容量： 1克

shēng huà shì jì 氢氧化钾 容量： 500克

shēng huà shì jì 氢氧化铬 容量： 25克

shēng huà shì jì 氢氧化镉 容量： 100毫克

shēng huà shì jì 氢氧化锆 容量： 100克

shēng huà shì jì 氢氧化钙 容量： 500克

shēng huà shì jì 氢氧化钡 容量： RT 5克

shēng huà shì jì 氢氧化铵 容量： 100克

shēng huà shì jì  容量： 100克

shēng huà shì jì 氢-钾ATP酶测试盒 容量： RT 50支/包

shēng huà shì jì 酸 容量： 500克

shēng huà shì jì  容量： 保存：-20℃ 10片

shēng huà shì jì *钠 容量： RT 5克

shēng huà shì jì *敏感纸片 容量： RT 100张/包

shēng huà shì jì ***溶液 容量： 25克

48T/96T

 LZM 兔* 规格： 48T/96T

注意事项:

1. 产品仅用于科研感受态细胞在冰中缓慢融化，插入冰中8分钟内加入目标DNA，不可在冰中放置时间过长，长时间存放会降低转化效率。
2. 混入质粒或连接产物时应轻柔操作。
3. 转化高浓度的质粒或高效率的连接产物可相应减少Z终用于涂板的菌量。
操作步骤：
1．取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100可以根据实际情况分装使用。以下实验以50μl感受态细胞为例。
2．待感受态细胞融化后，向感受态细胞悬液中加入目的DNA（根据实际情况加入适量的DNA，通常100        μl感受态细胞能够被1         ng超螺旋质粒DNA所饱和），用移液器轻轻吹打混匀，冰浴30分钟。
3．42℃热击45秒，迅速将离心管转移到冰浴中，冰上静置2-3分钟
4．每个离心管中加入450μl无菌的SOC或LB培养基（不含抗生素），混匀后置于37℃摇床，150rpm振荡培养45分钟使菌体复苏
 5．根据实验需求，取适量已转化的感受态细胞，加到含相应抗生素的或LB固体琼脂培养基上，用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开，将平板置于37℃直至液体被吸收，倒置培养，37℃培养12-16小时。