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培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
操作方法：
1. 从-80℃拿出，迅速插入冰中，5分钟后待菌块融化，加入目的DNA（质粒或连接产物）并用手EP管底轻轻混匀(避免用枪吸打)，冰中静置25分钟。
2. 42℃水浴热激45秒，迅速放回冰中并静置2分钟，晃动会降低转化效率。
3. 向离心管中加入700 μl不含抗生素的无菌培养基 (2YT或LB)，混匀后37℃，200 rpm复苏60分钟。
4. 5000 rpm离心一分钟收菌，留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT或LB培养基上。
5.将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。如果进行蓝白斑筛选操作，将平板放37℃培养至少15小时。

shēng huà shì jì *发酵培养基 容量： 1米

shēng huà shì jì *乙酯盐酸盐 容量： 1克

shēng huà shì jì *锌 容量： 1公斤

shēng huà shì jì *培养基 容量： 25毫升

shēng huà shì jì *钠 容量： RT，避光 5克

shēng huà shì jì *镁 容量： RT 25克

shēng huà shì jì *甲酯盐酸盐 容量： 250毫克

shēng huà shì jì *钙 容量： 100克

shēng huà shì jì 干酪素钠 容量： RT 100克

shēng huà shì jì 干酪素 容量： 100克

shēng huà shì jì 盖玻片 容量： 2～8℃ 250毫克

shēng huà shì jì 钙镁试剂 容量： RT 10克

shēng huà shì jì 钙黄绿素二钠盐 容量： 2～8℃ 1克

shēng huà shì jì 钙黄绿素 容量： 500克

shēng huà shì jì 钙调神经磷酸酶测试盒 容量： 300支/包

shēng huà shì jì 钙测试盒(带标准) 容量： RT 10个

shēng huà shì jì 钙（危险品） 容量： 100克

shēng huà shì jì 改良亚硫酸盐琼脂 容量： 2～8℃ 25毫升

shēng huà shì jì 改良沙氏琼脂培养基 容量： RT 100克

shēng huà shì jì 改良罗氏培养基基础 容量： 2～8℃，避光 100克

shēng huà shì jì 改良绿色酵母菌和真菌肉汤 容量： 2～

aStable 感受态细胞 100ul*10+/H+交换体3 规格： 48T/96T

 PAL 人L苯*解氨酶 规格： 48T/96T

 Jo1/HRS 人Jo1抗体 规格： 48T/96T

 IRAP 人ICE蛋白酶激活因子 规格： 48T/96T

人H-ras ELISA Kit，48T/96T 人H-ras ELISA Kit，48T/96T 规格： 48T/96T

人H-ras ELISA Kit，48T/96T 人H-ras ELISA Kit，48T/96T 规格： 48T/96T

 GAP 人GTP酶活化蛋白 规格： 48T/96T

 Flt-3L 人FMS样*激酶3配体 规格： 48T/96T

 Flt3 人FMS样*激酶3 规格： 48T/96T

 E-Selectin/CD62E 人E选择素 规格： 48T/96T

 E-Cad 人E钙粘着蛋白/上皮性钙黏附蛋白 规格： 48T/96T

 EJ/GlyRS 人EJ抗体/抗甘氨酰tRNA合成酶抗体 规格： 48T/96T

 D2D 人D二聚体 规格： 48T/96T

 D2D 人D二聚体 规格： 48T/96T

 DBP 人DNA结合蛋白 规格： 48T/96T

 DKK1 人Dickkopf 1 规格： 48T/96T

 CNP 人C型钠尿肽 规格： 48T/96T

 C-Peptide 人C肽 规格： 48T/96T

 CRP 人C反应蛋白 规格： 48T/96T

 CP 人C多肽 规格： 48T/96T

 CXCR3 人CXC趋化因子受体3 规格： 48T/96T

 CXCR1 人CXC趋化因子受体1 规格： 48T/96T

 CX3CR1 人CX3C趋化因子受体1 规格： 48T/96T

人c-sis ELISA Kit，48T/96T 人c-sis ELISA Kit，48T/96T 规格： 48T/96T

8℃ 5毫升

注意事项:
1. 产品仅用于科研感受态细胞在冰中缓慢融化，插入冰中8分钟内加入目标DNA，不可在冰中放置时间过长，长时间存放会降低转化效率。
2. 混入质粒或连接产物时应轻柔操作。
3. 转化高浓度的质粒或高效率的连接产物可相应减少Z终用于涂板的菌量。
操作步骤：
1．取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100可以根据实际情况分装使用。以下实验以50μl感受态细胞为例。
2．待感受态细胞融化后，向感受态细胞悬液中加入目的DNA（根据实际情况加入适量的DNA，通常100        μl感受态细胞能够被1         ng超螺旋质粒DNA所饱和），用移液器轻轻吹打混匀，冰浴30分钟。
3．42℃热击45秒，迅速将离心管转移到冰浴中，冰上静置2-3分钟
4．每个离心管中加入450μl无菌的SOC或LB培养基（不含抗生素），混匀后置于37℃摇床，150rpm振荡培养45分钟使菌体复苏
 5．根据实验需求，取适量已转化的感受态细胞，加到含相应抗生素的或LB固体琼脂培养基上，用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开，将平板置于37℃直至液体被吸收，倒置培养，37℃培养12-16小时。