T7体外转录试剂盒
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50次T7体外转录试剂盒

参考价: 面议

具体成交价以合同协议为准
2021-11-19 15:34:24
363
属性:
规格:50次;货号:YS-P013270;品牌:YSRIBIO;
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产品属性
规格
50次
货号
YS-P013270
品牌
YSRIBIO
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上海研生实业有限公司

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产品简介

T7体外转录试剂盒原理是由一对引物介导,能在动植物体外对特定基因(DNA)片断进行快速酶促扩增,经过n个热循环扩增,扩增产物中所含特定基因数是原始模板数的(1+E)n(0<E<1,扩增效率=倍,使得检测扩增产物中的特定基因成为可能。

详细介绍

组成及试剂配制:
1、酶标板:一块(96孔)

2、 标准品(冻干品): 2瓶,请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml,盖好后室温静置大约10分钟,同时反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为200 U/L,然后做系列倍比稀释(注:不要直接在板中进行倍比稀释),分别配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。

3、 样品稀释液:1×20ml。

4、 检测稀释液A:1×10ml。

5、 检测稀释液B:1×10ml。
服务流程:

公司产品仅用于科研接受订单及样品——RNA提取——RNA质量检测——样品cDNA合成——定量试验——数据分析——结果交付——售后服务。

产品名称

规格

货号

T7体外转录试剂盒

50次

YS-P013270

PCR反应鉴定——PCR反应条件:

循环步骤

温度

时间

循环数

预变性

94℃

5   min

1

变性

94℃

10   sec

30-40

退火

50-65℃

20   sec

30-40

延伸

72℃

30   sec/kb

30-40

终延伸

72℃

5   min

1

 

QQ截图20191211135002.jpg 

PCR反应的特异性决定因素为:

①引物与模板DNA特异正确的结合;

②碱基配对原则;

③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性;

④靶基因的特异性与保守性。

其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性,使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行,结合的特异性大大增加,被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区,其特异性程度就更高。

(2) 灵敏度高

PCR产物的生成量是以指数方式增加的,能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞;在病毒的检测中,PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位);在细菌学中zui小检出率为3个细菌。

(3) 简便、快速

PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶,一次性地将反应液加好后,即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应,一般在2~4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析,不一定要用同位素,无放射性污染、易推广。

(4) 对标本的纯度要求低

不需要分离病毒或细菌及培养细胞,DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。

反应五要素:

参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+

引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:

①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。

②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。

③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC最好随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。

④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。

⑤引物3'端的碱基,特别是最末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。

⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列最好有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。

⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。

引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。

人肝配蛋白A3 (EFNA3)炔雌ADP核糖基化因子结合蛋白2抗体

人磷脂酶D2(PLD2)乙硫异烟,硫异烟精氨酸加压素受体2抗体

人吡啶酚(PYD)乙硫异烟,硫异烟(标准品)凋亡相关斑点样蛋白ASC抗体

人吡哆激酶(PDXK) 依曲韦林丝状肌动蛋白结合蛋白抗体

人酮酸脱氢酶β(PDHβ)法莫替丁抗凝血酶3抗体

人密封蛋白(OCLN)法莫替丁(标准品)人血清白蛋白单克隆抗体

人信号素7A(SEMA7A)非布索坦载脂蛋白A4抗体

人质膜膜泡关联蛋白 (PLVAP)非布索坦(标准品)磷酸化Rho鸟苷酸交换因子2抗体

人间羟肾上腺素(MN) 非那西丁磷酸化丝状肌动蛋白结合蛋白抗体

人胰岛素样生长因子1受体3(IGF1R3)非那西丁(标准品)肌动蛋白相关蛋白2/3亚型1A抗体

人羟酰谷胱甘肽水解酶(HAGH)盐酸芬戈莫德锚蛋白重复结构域蛋白32抗体

人表面活性物质关联蛋白J(SPJ)盐酸芬戈莫德(标准品)共济失调7样蛋白3B抗体

人表面膜免疫球蛋白A(mIgA)氟芬那酸,氟灭酸感染性蛋白蛋白1抗体

人表面膜免疫球蛋白D(mIgD) 氟芬那酸,氟灭酸(标准品)含锚蛋白重复序列-因子信号抑制物盒蛋白家族5抗体

人表面膜免疫球蛋白M(mIgM) 氟马西尼/氟马泽尼植物生长激素ABP1抗体

人表皮角蛋白(EK)  氟马西尼/氟马泽尼(标准品)磷酸化活化复制因子2抗体
T7体外转录试剂盒CCL19/MIP-3 beta  巨噬炎性蛋白19抗体全氟辛酸 分析标准品, 用于环境分析

CCL26/Eotaxin 3  嗜酸粒趋化蛋白3抗体2,4,6-三磺酸 5 % (w/v) 水溶液

CCL27/CTACK  皮肤T虏获趋化因子抗体2-基硫 96%

Dectin-1/CLECSF12  C型凝集素结构域家族7成员A姥鲛烷 98%

CCR-1  表面趋化因子受体1抗体4-(1-吡咯烷)苯甲 97%

Dectin-2  C型凝集素结构域家族6成员A抗体聚苯乙烯,1000 分析标准品

CCR-2/5/CD192  表面趋化因子受体2/5抗体聚(4-苯乙烯磺酸-共聚-马来酸)钠盐 摩尔比率3:1

CCR-2A  表面趋化因子受体2A抗体聚(4-苯乙烯磺酸-共聚-马来酸)钠盐 摩尔比率1:1


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