石蜡切片(FFPE)核酸提取试剂盒
石蜡切片(FFPE)核酸提取试剂盒
石蜡切片(FFPE)核酸提取试剂盒
石蜡切片(FFPE)核酸提取试剂盒

32次石蜡切片(FFPE)核酸提取试剂盒

参考价: 面议

具体成交价以合同协议为准
2021-11-21 19:54:13
506
属性:
规格:32次/盒 、50次/盒;货号:YS-P013212;品牌:YSRIBIO;
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产品属性
规格
32次/盒 、50次/盒
货号
YS-P013212
品牌
YSRIBIO
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上海研生实业有限公司

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产品简介

石蜡切片(FFPE)核酸提取试剂盒原理是由一对引物介导,能在动植物体外对特定基因(DNA)片断进行快速酶促扩增,经过n个热循环扩增,扩增产物中所含特定基因数是原始模板数的(1+E)n(0<E<1,扩增效率=倍,使得检测扩增产物中的特定基因成为可能。

详细介绍

服务流程:

接受订单及样品——RNA提取——RNA质量检测——样品cDNA合成——定量试验——数据分析——结果交付——售后服务。

产品名称规格
货号
石蜡切片(FFPE)核酸提取试剂盒32次/盒 、50次/盒YS-P013212

PCR反应鉴定——PCR反应条件:

循环步骤

温度

时间

循环数

预变性

94℃

5   min

1

变性

94℃

10   sec

30-40

退火

50-65℃

20   sec

30-40

延伸

72℃

30   sec/kb

30-40

终延伸

72℃

5   min

1

组成及试剂配制:

1、酶标板:一块(96孔)

2、 标准品(冻干品): 2瓶,请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml,盖好后室温静置大约10分钟,同时反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为200 U/L,然后做系列倍比稀释(注:不要直接在板中进行倍比稀释),分别配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。

3、 样品稀释液:1×20ml。

4、 检测稀释液A:1×10ml。

5、 检测稀释液B:1×10ml。
QQ截图20191211135002.jpg

PCR反应的特异性决定因素为:

①引物与模板DNA特异正确的结合;

②碱基配对原则;

③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性;

④靶基因的特异性与保守性。

其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性,使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行,结合的特异性大大增加,被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区,其特异性程度就更高。

(2) 灵敏度高

PCR产物的生成量是以指数方式增加的,能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞;在病毒的检测中,PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位);在细菌学中zui小检出率为3个细菌。

(3) 简便、快速

PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶,一次性地将反应液加好后,即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应,一般在2~4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析,不一定要用同位素,无放射性污染、易推广。

(4) 对标本的纯度要求低

不需要分离病毒或细菌及培养细胞,DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。

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磁珠法      病毒DNA/RNA提取试剂盒

离心柱法     病毒DNA/RNA提取试剂盒

phospho-ATG7(Ser95)    磷酸化自噬相关蛋白7抗体

phospho-ATG16A(Ser287)    磷酸化自噬相关蛋白16A抗体

phospho-ATG9A(Ser735)    磷酸化自噬相关蛋白9A抗体

phospho-ATG4D(Ser341)    磷酸化自噬相关蛋白4D抗体

phospho-ATG4D(Ser467)    磷酸化自噬相关蛋白4D抗体

phospho-TEM8 (Tyr382)    磷酸化血管内皮标志物8抗体

phospho-ATG4A(Ser100)    磷酸化自噬相关蛋白4A抗体

phospho-ATG4C(Ser166)    磷酸化自噬相关蛋白4C抗体

phospho-ATG16A(Ser213)    磷酸化自噬相关蛋白16A抗体

phospho-AKT3 (Ser472)    磷酸化蛋白激酶AKT3抗体

phospho-ADRB2 (Ser261)    磷酸化肾上腺素能受体β2抗体

phospho-AQP2(Ser261)    磷酸化水通道蛋白2抗体

phospho-ATG3 (Tyr18)    磷酸化自噬相关蛋白3抗体

ALDOB    醛缩酶2抗体

AMY2A    胰腺α淀粉酶抗体

ANKRD11    锚蛋白重复结构域蛋白11抗体

phospho-c-ABL1+2 (Tyr393+429)    磷酸化非受体酪氨酸激酶c-Abl抗体

phospho-ATF2 (Thr53)    磷酸化活化复制因子2抗体

AKR1D1    醛固酮还原酶家族1成员D1抗体

ARP4    肝血管生成素相关蛋白抗体

ABHD5    自水解酶结构域5蛋白抗体

ACOT8    酰基辅酶A硫酯酶8

Agpat2    溶血磷脂酸酰基转移酶β抗体

AFP4b    AFP4b蛋白抗体

APOC2    载脂蛋白C2抗体

Apolipoprotein A V    载脂蛋白A5抗体

APOA2    载脂蛋白A2抗体

AGPAT4    溶血磷脂酸酰基转移酶D抗体

石蜡切片(FFPE)核酸提取试剂盒APOE3    载脂蛋白E3抗体

ABI3    ABI基因家族2抗体

AARE    氧化蛋白质水解酶

反应五要素:

参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+

引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:

①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。

②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。

③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC最好随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。

④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。

⑤引物3'端的碱基,特别是最末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。

⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列最好有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。

⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。

引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。




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