其他品牌 品牌
经销商厂商性质
上海市所在地
服务流程:
公司产品仅用于科研接受订单及样品——RNA提取——RNA质量检测——样品cDNA合成——定量试验——数据分析——结果交付——售后服务。
产品名称 | 规格 | 货号 |
巨细胞病毒检测试剂盒(荧光PCR法) | 50T | YS-P014082 |
PCR反应鉴定——PCR反应条件:
循环步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
预变性 | 94℃ | 5 min | 1 |
变性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
终延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
组成及试剂配制:
1、酶标板:一块(96孔)
2、 标准品(冻干品): 2瓶,请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml,盖好后室温静置大约10分钟,同时反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为200 U/L,然后做系列倍比稀释(注:不要直接在板中进行倍比稀释),分别配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液:1×20ml。
4、 检测稀释液A:1×10ml。
5、 检测稀释液B:1×10ml。
PCR反应的特异性决定因素为:
①引物与模板DNA特异正确的结合;
②碱基配对原则;
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性;
④靶基因的特异性与保守性。
其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性,使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行,结合的特异性大大增加,被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区,其特异性程度就更高。
(2) 灵敏度高
PCR产物的生成量是以指数方式增加的,能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞;在病毒的检测中,PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位);在细菌学中zui小检出率为3个细菌。
(3) 简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶,一次性地将反应液加好后,即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应,一般在2~4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析,不一定要用同位素,无放射性污染、易推广。
(4) 对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或细菌及培养细胞,DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。
绵羊成纤维生长因子7(FGF7/KGF)S100B蛋白多肽
绵羊趋化因子C-C-元配体14(CCL14) 钙结合蛋白S100A1抗原
绵羊碳酸酐酶III(CA3)核质结合区结合蛋白1抗原
绵羊羧肽酶E(CPE)干生长因子抗原
绵羊核因子-κB亚p65(NF-κB p65)电压开启的钠离子通道SCN9A抗原
绵羊核转录因子Y亚γ(NFYC)CXC趋化因子14抗原
绵羊维酸受体α(RARα)CXC趋化因子16抗原
绵羊补体组分1Q受体1(C1qR1)臂板蛋白3A(多肽)
绵羊碱性成纤维生长因子(bFGF/FGF2) 臂板蛋白3F抗原
绵羊甘露糖受体(MR) 分泌型卷曲相关蛋白1抗原
绵羊成纤维生长因子受体底物2(FRS2)钠-葡萄糖共转运载体1抗原
绵羊XC趋化因子受体1(XCR1)新朊蛋白/朊蛋白相关蛋白/沙杜(Shadoo)蛋白抗原
绵羊III型胶原交联羧端肽(CTX-III) 大肠杆菌志贺样素Ⅱ型突变体(O139菌型)
绵羊胰岛素样生长因子结合蛋白1(IGFBP-1)大肠杆菌志贺样素菌体蛋白(O139菌型)
绵羊嗜中性粒防御素α1(DEFα1)蛋白酪氨酸磷酸酶2抗原
绵羊血小板衍生生长因子亚A(PDGFA)运动神经元存活蛋白结合蛋白1抗原
巨细胞病毒检测试剂盒(荧光PCR法)NOS-3 (eNOS) endotheli cell NOS 一氧化氮合成酶-3(抗原)可溶性淀粉 AR
NPY ( Neuropeptide Y) 神经肽 Y(抗原)可溶性淀粉 ACS
NR2B (Glutamate receptor) 谷氨酸受体(抗原)水溶性淀粉 水溶性,药用级
NT-3 神经生长因子-3(抗原)可溶性淀粉 药用级
NT-4,NT-5 神经生长因子4/5(抗原)二二丁 99%
NTN (Neurturin) 神经生长因子(抗原)二二丁 standard for GC, ≥99.5% (GC)
Bcl-xL(human, mo, rat, bovine, dog, pig, sheep, horse) Bcl-xL蛋白抗原二二丁 用于表面活性剂分析,99.5%
phospha-Bcl-xL (pSer62) peptide (human, mo, rat, bovine, dog, pig, sheep, horse) 磷酸化(Ser62)Bcl-xL蛋白抗原二二丁 CP
反应五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC最好随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基,特别是最末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列最好有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。