可调式易错PCR试剂盒
可调式易错PCR试剂盒
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可调式易错PCR试剂盒

100次可调式易错PCR试剂盒

参考价: 面议

具体成交价以合同协议为准
2021-11-19 15:36:35
350
属性:
规格:100次;货号:YS-P013268;品牌:YSRIBIO;
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产品属性
规格
100次
货号
YS-P013268
品牌
YSRIBIO
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上海研生实业有限公司

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产品简介

可调式易错PCR试剂盒原理是由一对引物介导,能在动植物体外对特定基因(DNA)片断进行快速酶促扩增,经过n个热循环扩增,扩增产物中所含特定基因数是原始模板数的(1+E)n(0<E<1,扩增效率=倍,使得检测扩增产物中的特定基因成为可能。

详细介绍

服务流程:

公司产品仅用于科研接受订单及样品——RNA提取——RNA质量检测——样品cDNA合成——定量试验——数据分析——结果交付——售后服务。

产品名称

规格

货号

可调式易错PCR试剂盒

100次

YS-P013268

PCR反应鉴定——PCR反应条件:

循环步骤

温度

时间

循环数

预变性

94℃

5   min

1

变性

94℃

10   sec

30-40

退火

50-65℃

20   sec

30-40

延伸

72℃

30   sec/kb

30-40

终延伸

72℃

5   min

1

组成及试剂配制:

1、酶标板:一块(96孔)

2、 标准品(冻干品): 2瓶,请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml,盖好后室温静置大约10分钟,同时反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为200 U/L,然后做系列倍比稀释(注:不要直接在板中进行倍比稀释),分别配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。

3、 样品稀释液:1×20ml。

4、 检测稀释液A:1×10ml。

5、 检测稀释液B:1×10ml。
QQ截图20191211135002.jpg

PCR反应的特异性决定因素为:

①引物与模板DNA特异正确的结合;

②碱基配对原则;

③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性;

④靶基因的特异性与保守性。

其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性,使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行,结合的特异性大大增加,被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区,其特异性程度就更高。

(2) 灵敏度高

PCR产物的生成量是以指数方式增加的,能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞;在病毒的检测中,PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位);在细菌学中zui小检出率为3个细菌。

(3) 简便、快速

PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶,一次性地将反应液加好后,即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应,一般在2~4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析,不一定要用同位素,无放射性污染、易推广。

(4) 对标本的纯度要求低

不需要分离病毒或细菌及培养细胞,DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。

人白介素2受体β(IL-2Rβ)卡比多巴(标准品)ATP结合蛋白家族5抗体

人白介素3介导核因子(NFIL3)醋酸氯地孕酮(标准品)N-甲基嘌呤DNA糖基化酶

人白三烯C4(LTC4)醋酸氯地孕酮AU5 tag标签抗体

人白三烯D4(LTD4)盐酸环沙星钙离子ATP酶通道蛋白抗体

人白三烯E4(LTE4) 盐酸环沙星(标准品)果桃α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶抗体

人白弹性蛋白酶(HLE) 顺苯磺阿曲库铵脂肪炎症因子Apelin抗体

人白调节素(LR) 醋酸可氢ATP酶通道蛋白抗体

人白共同抗原(LCA/CD45)醋酸可(标准品)ATP5A抗体

人白免疫球蛋白样受体亚家族B成员4(LILRB4)丹曲林钠即刻早期基因ARC抗体

人白血病抑制因子受体(LIFR)丹曲林钠(标准品)ADP核糖基化因子6抗体

人甘氨酰tRNA合成酶(GARS)  D-泛酸钙,维生素B5芳香化酶抗体

人肝配蛋白A受体1 (EPHA1)脱羧氯雷他定/地氯雷他定Artemin抗体

人斑型POZ蛋白(SPOP)脱羧氯雷他定/地氯雷他定(标准品)alpha 1肾上腺素能受体A抗体

人血小板膜糖蛋白IV (GP4/CD36)地塞米松磷酸钠血管紧张素Ⅱ-1型受体抗体

人神经特异性烯化酶(NSE)地塞米松磷酸钠(标准品)活化转录因子3抗体

IV D组磷脂酶A2(PLA2G4D)磷酸奥司他韦血管紧缩素样蛋白1抗体
可调式易错PCR试剂盒CCL1/TCA3/I-309  嗜酸粒趋化蛋白CCL1抗体聚(甲基乙烯基共聚马来酸) Mw ~216,000 to ~80,000, powder

CCL3/MIP-1 Alpha  巨噬炎性蛋白1α抗体四苯 99%

CCL4/MIP-1 Beta  巨噬炎性蛋白1β抗体软脂酸 分析标准品,>99%(GC)

CCL5/RANTES  T特异性趋化因子抗体苯基三氯化锡 分析标准品

CCL6/C10  嗜酸粒趋化蛋白CCL6抗体苯基三氯化锡 98%

CCL11/Eotaxin 1  嗜酸粒趋化蛋白抗体二甲基二烯基氯化铵/烯酰共聚物 10 wt. % in H2O

CCL12/MCP5  单核趋化蛋白5抗体对位红 分析标准品,用于食品分析

CCL13/MCP-4  单核趋化蛋白4抗体岩芹酸 分析标准品,>99%(GC)
反应五要素:

参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+

引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:

①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。

②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。

③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC最好随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。

④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。

⑤引物3'端的碱基,特别是最末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。

⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列最好有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。

⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。

引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。

 


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