牛呼肠孤病毒染料法荧光定量RT-PCR 试剂盒
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牛呼肠孤病毒染料法荧光定量RT-PCR 试剂盒

50次牛呼肠孤病毒染料法荧光定量RT-PCR 试剂盒

参考价: 面议

具体成交价以合同协议为准
2021-11-20 15:51:15
534
属性:
规格:50次;货号:YS-P013535;品牌:YSRIBIO;
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50次
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YS-P013535
品牌
YSRIBIO
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上海研生实业有限公司

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产品简介

牛呼肠孤病毒染料法荧光定量RT-PCR 试剂盒原理是由一对引物介导,能在动植物体外对特定基因(DNA)片断进行快速酶促扩增,经过n个热循环扩增,扩增产物中所含特定基因数是原始模板数的(1+E)n(0<E<1,扩增效率=倍,使得检测扩增产物中的特定基因成为可能。

详细介绍

服务流程:

公司产品仅用于科研接受订单及样品——RNA提取——RNA质量检测——样品cDNA合成——定量试验——数据分析——结果交付——售后服务。

产品名称

规格

货号

牛呼肠孤病毒染料法荧光定量RT-PCR 试剂盒

50次

YS-P013535

PCR反应鉴定——PCR反应条件:

循环步骤

温度

时间

循环数

预变性

94℃

5   min

1

变性

94℃

10   sec

30-40

退火

50-65℃

20   sec

30-40

延伸

72℃

30   sec/kb

30-40

终延伸

72℃

5   min

1

组成及试剂配制:

1、酶标板:一块(96孔)

2、 标准品(冻干品): 2瓶,请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml,盖好后室温静置大约10分钟,同时反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为200 U/L,然后做系列倍比稀释(注:不要直接在板中进行倍比稀释),分别配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。

3、 样品稀释液:1×20ml。

4、 检测稀释液A:1×10ml。

5、 检测稀释液B:1×10ml。
QQ截图20191211135002.jpg

PCR反应的特异性决定因素为:

①引物与模板DNA特异正确的结合;

②碱基配对原则;

③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性;

④靶基因的特异性与保守性。

其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性,使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行,结合的特异性大大增加,被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区,其特异性程度就更高。

(2) 灵敏度高

PCR产物的生成量是以指数方式增加的,能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞;在病毒的检测中,PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位);在细菌学中zui小检出率为3个细菌。

(3) 简便、快速

PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶,一次性地将反应液加好后,即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应,一般在2~4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析,不一定要用同位素,无放射性污染、易推广。

(4) 对标本的纯度要求低

不需要分离病毒或细菌及培养细胞,DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。

猪上皮膜抗原(EMA)  辛-β-D-硫代吡喃葡萄糖苷磷酸化GATA结合蛋白3抗体

猪结蛋白(Des) D-绵子糖五水;蜜三糖五水延伸因子G2抗体

猪乳酸脱氢酶C(LDHC)  D-山梨葡糖淀粉酶抗体

猪非受体酪氨酸激酶2(TNK2) n-辛-β-D-吡喃葡萄糖苷(OGP)谷氨酰6-磷酸果糖转移酶抗体

猪黑色素瘤转移表面黏附分子(MMSAM)L-核糖谷胱甘肽S转移酶θ抗体

猪表皮脂肪酸结合蛋白5(FABP5)L-核糖(标准品)谷胱甘肽S转移酶θ2抗体

猪胃内因子(GIF)2-脱氧-L-核糖γ-谷氨酰转肽酶6抗体

猪脱氢表雄酮硫酸酯(DHEA-S) 4-伞形酮-β-D-木糖苷颗粒酶A抗体

猪乳酸脱氢酶B(LDHB)  2-脱氧-D-核糖颗粒酶D/B/E/N/G/F/H抗体

D-乳酸脱氢酶(D-LDH)  D-半乳糖(标准品)粒-巨噬集落激因子3受体抗体

猪芳硫酸酯酶B(ASB)  D-半乳糖血型糖蛋白A/涎糖蛋白抗体

猪组织多肽抗原(TPA)盐酸肼;双盐酸肼G蛋白修补结构域蛋白3抗体

猪免疫球蛋白A Fc段受体(FcαR/CD89) 羟磷灰石G蛋白偶联受体GPR63蛋白抗体

猪胸腺肽β4(TMSβ4)羟纤维素(粘度11250-21000mPas)磷酸化珠蛋白转录因子1抗体

猪前列腺素E合酶2(PTGES2)羟纤维素G蛋白偶联受体109A抗体

猪去肾上腺素(NA/NE) 羟纤维素(30000 mpa.s)G蛋白偶联受体15抗体
牛呼肠孤病毒染料法荧光定量RT-PCR 试剂盒Phospho-Ret (Tyr1062)  磷酸化指状蛋白RET抗体单组份无吡啶卡尔费休滴定剂 5m/ml,测水量较高样品

Resistin (rat, mouse)  抵抗素抗体(大鼠,小鼠)单组份无吡啶卡尔费休滴定剂 2mml,测含水量较低样品

Resistin (human, dog)  抵抗素抗体(人,犬)异 >99.0%(GC)

RELMa  抵抗素样分子α抗体异 >93.0%(GC)

RelB  核转录因子NFKB-RelB蛋白抗体异 CP,98.0%

Phospho-RelB (Ser552)  磷酸化核转录因子NFKB-RelB蛋白抗体二异 98%

Reprimo  质内的糖化蛋白抗体三异 95%

C-REL  淋巴衍生C-型凝集素抗体(±)-樟脑(合成) 96%
反应五要素:

参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+

引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:

①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。

②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。

③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC最好随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。

④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。

⑤引物3'端的碱基,特别是最末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。

⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列最好有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。

⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。

引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。


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