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商品介绍:
测定意义: 生物碱存在于自然界(主要为植物,但有的也存在于动物)中的一类含氮的碱性有机化合物,大多数有复杂的环状结构,氮素多包含在环内,有显著的生物活性,是中草药中重要的有效成分之一。 测定原理: 生物碱与溴甲酚绿指示剂反应,生成绿色化合物,在416nm处有最大吸收峰。 需自备的仪器和用品: 分光光度计、水浴锅、超声波清洗器、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵、80%乙醇、和蒸馏水。 |
特别提醒:本产品仅供科研研究使用,不得用于人体临床直接检测。
产品名称 | 检测方法 | 规格 | 货号 |
生物碱含量测试盒可见分光光度法 | 可见分光光度法 | 50管/48样 | BJ-01611353-2 |
测定步骤:
1、 酶标仪预热30min以上,调节波长至450nm。
2、 试剂三的稀释:将试剂三用蒸馏水稀释50倍,用多少配多少。(试剂三和蒸馏水1:49稀释。
3、 工作液配制:在试剂一加入100μl试剂二,充分混匀。配好的试剂4℃避光可保存一周。(若一次性测定样本较少,可按照实际用量将试剂一和试剂二按照20ml:0.1ml的比例混匀配制)
4、 将一瓶试剂四用5ml蒸馏水溶解(溶解后一周内用完)。
5、 样本测定(在96孔板中依次加入下列试剂)充分混匀,室温静置30min后,450nm处测定各管吸光值A。
注意事项:
待测样品-70℃可保存1个月。需注意反复冻融会导致SOD部分失活。
一个试剂盒如果不能在3次内使用完毕,其中的WST-8需要在使用时适当分装,以避免反复冻融导致的检测效果下降。
标准品稀释时所用的稀释液应尽量与样品一致。样品用试剂盒提供的SOD样品制备液制备时,标准品也宜使用SOD样品制备液进行稀释;当样品为血液等无需处理的样品时,宜使用试剂盒提供的SOD检测缓冲液稀释标准品。
抗氧化物会对本试剂盒的检测产生干扰,例如0.1mM ascorbic acid,5mM GSH都会使测定出来的吸光度显著升高。此时尽管样品没有颜色,如果设置了使用说明中的空白对照3,就可以消除样品中的抗氧化物的干扰。
实验方法学:
一、肝素的配制:
市售肝素冻干粉140单位/mg,1克瓶装,每瓶140,000单位,称取0.1克肝素冻干粉,加生理盐水5ml,配成2800单位/ml。取50~100μl湿润管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不会凝固。老鼠血易凝固,所以最好更浓一些。可以取0.1克肝素冻干粉,加3ml生理盐水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制备:取0.1克肝素冻干粉,加2.5ml生理盐水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,湿润管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),横向转动,每隔5~10分钟转动一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液样本的收集:
全血根据收集的条件,分成不抗凝和抗凝两种。同时,不抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血清;抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血浆。
1、不抗凝收集血清:将收集好的全血,静置1~2小时,直接低速离心分离出血清待用或保存。
2、抗凝收集血浆: 收集抗凝全血,轻轻颠倒充分抗凝后,可直接低速离心分离血浆(也可静置半小时左右再低速离心分离血浆)待用或保存。根据不同抗凝剂的性能特征,选择合适的抗凝剂。实验室常用的抗凝剂有肝素的各种盐。
选择抗凝的注意点:
①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致;
②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;
③、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.4~0.5ml血浆);
④、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后
优点如下:
1、快速简便:全程约50分钟,可测100例左右样本。
2、取样量微:本法取手指或耳垂等末梢血20ul~50ul即可测红细胞中的SOD,只需2ml静脉血可测白细胞中的SOD及血小板中SOD,只需50mg左右组织就可测组织匀浆、胞浆中的SOD,0.2g组织可测线粒体及微粒体中的SOD。
3、灵敏度高:IC50=0.05g/ml,是邻苯三酚法的18倍。
4、稳定性好:试剂盒2~8℃存放6个月有效。
5、再现性好:变异系数CV=1.7%。
6、回收试验: X =103.3%。
7、受外界影响因素小:干扰因素少,重复性强。
8、测试面广:可测动物血液、组织、各种体液、灌流液等、各种培养细胞、细菌、植物组织、各种水产以及化妆品、保健品等,效果均佳。
HDHD2B蛋白抗体青色糖单孢菌两性霉suB
造血干特异性相关结合蛋白1抗体暗色节菱孢*赤藓糖
I类组织相容性H-2抗原D-Dalpha链抗体豇豆慢生根瘤菌橙黄Ⅰ
HEAT重复内含蛋白5A蛋白抗体橙色杆状菌SP葡聚糖凝胶C-50
热休克蛋白70抗体印度毛壳没食子suan甲酯
羟类固脱氢酶17β抗体(17β-HSD8)草木樨中华根瘤菌二水氯化铜
透明质suan结合蛋白4抗体牧草红酵母L(-)钠
A型流感病H5N1凝集su抗体枯草芽孢杆菌酚试剂
A型流感病核衣壳蛋白抗体光滑青霉二十八烷
A型流感病核衣壳蛋白抗体土曲霉原变种镉粒
A型流感病核衣壳蛋白抗体秀珍菇虫草su
B型流感病蛋白抗体耶尔森氏菌属甘油三油suan酯
人类状瘤病16-E7抗体肠道致病性大肠埃希氏菌杨梅苷
跨膜蛋白mei丝ansuan1抗体亚罗酵母属味
肺癌癌基因蛋白3抗体白茅根
生物碱含量测试盒可见分光光度法弹性蛋白mei3B(ELA3B)试剂盒 Anti-BMX Antibody巢蛋白(神经上皮干蛋白)(抗原)
核RNA输出因子1(NXF1)试剂盒Anti-BNIP2 Antibody神经母特异性转移因子抗原
蛋白质二硫键异构酶(PDI)试剂盒Anti-BLZF1 Antibodyp53凋亡激蛋白1抗原
神经肽Y受体Y2(NPYR2)试剂盒Anti-BPIFA4P AntibodyP53凋亡激蛋白2抗原
胰蛋白mei(TRY)试剂盒 Anti-BRD3 Antibody神经束蛋白-155
多聚ADP核糖聚合酶4(PARP4)试剂盒Anti-BRCA1 Antibody神经生长因子-β(多肽片断抗原)
早老su2(PS2)试剂盒 Anti-BPIFA4P Antibody血管紧张suI抗原