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特别提醒:本产品仅供科研研究使用,不得用于人体临床直接检测。
产品名称 | 检测方法 | 规格 | 货号 |
NADP苹果酸酶(NADPME)测试盒微量法 | 微量法 | 100管/96样 | BJ-0161120-1 |
商品介绍:
测定意义: ME广泛存在于微生物、培养细胞、动物和植物胞浆中,尤其在植物组织中活性较高。ME催化苹果酸氧化脱羧的可逆反应,产生丙酮酸和CO2,以及伴随NAD(P)+的还原反应,是苹果酸代谢的关键酶。ME活性与生物合成和抗氧化密切相关。近年来植物ME活性测定较多,已经成为抗氧化研究的热点。根据fu酶专一性和对底物特异性的不同,可将ME分为NAD-ME(EC1.1.1.38)和NADP-ME(EC1.1.1.40)。 测定原理: NADP-ME催化NADP+还原成NADPH,在340nm下测定NADPH增加速率。 需自备的仪器和用品: 紫外分光光度计/酶标仪、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板和蒸馏水。 |
优点如下:
1、快速简便:全程约50分钟,可测100例左右样本。
2、取样量微:本法取手指或耳垂等末梢血20ul~50ul即可测红细胞中的SOD,只需2ml静脉血可测白细胞中的SOD及血小板中SOD,只需50mg左右组织就可测组织匀浆、胞浆中的SOD,0.2g组织可测线粒体及微粒体中的SOD。
3、灵敏度高:IC50=0.05g/ml,是邻苯三酚法的18倍。
4、稳定性好:试剂盒2~8℃存放6个月有效。
5、再现性好:变异系数CV=1.7%。
6、回收试验: X =103.3%。
7、受外界影响因素小:干扰因素少,重复性强。
8、测试面广:可测动物血液、组织、各种体液、灌流液等、各种培养细胞、细菌、植物组织、各种水产以及化妆品、保健品等,效果均佳。
测定步骤:
1、 酶标仪预热30min以上,调节波长至450nm。
2、 试剂三的稀释:将试剂三用蒸馏水稀释50倍,用多少配多少。(试剂三和蒸馏水1:49稀释。
3、 工作液配制:在试剂一加入100μl试剂二,充分混匀。配好的试剂4℃避光可保存一周。(若一次性测定样本较少,可按照实际用量将试剂一和试剂二按照20ml:0.1ml的比例混匀配制)
4、 将一瓶试剂四用5ml蒸馏水溶解(溶解后一周内用完)。
5、 样本测定(在96孔板中依次加入下列试剂)充分混匀,室温静置30min后,450nm处测定各管吸光值A。
注意事项:
待测样品-70℃可保存1个月。需注意反复冻融会导致SOD部分失活。
一个试剂盒如果不能在3次内使用完毕,其中的WST-8需要在使用时适当分装,以避免反复冻融导致的检测效果下降。
标准品稀释时所用的稀释液应尽量与样品一致。样品用试剂盒提供的SOD样品制备液制备时,标准品也宜使用SOD样品制备液进行稀释;当样品为血液等无需处理的样品时,宜使用试剂盒提供的SOD检测缓冲液稀释标准品。
抗氧化物会对本试剂盒的检测产生干扰,例如0.1mM ascorbic acid,5mM GSH都会使测定出来的吸光度显著升高。此时尽管样品没有颜色,如果设置了使用说明中的空白对照3,就可以消除样品中的抗氧化物的干扰。
色an酸羟化酶抗体细枝孢大鼠肾足突*培养基
肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体抗体嗜麦芽黄单胞菌大鼠颈上皮*培养基
转甲状腺su蛋白/前白蛋白抗体樟疫霉小鼠肝实质*培养基
端粒体复制结合因子1抗体简青霉大鼠角膜上皮*培养基
酪an酸激酶A抗体Enterobacter sp.大鼠脑静脉血管平滑肌*培养基
肿瘤坏死因子受体相关因子1抗体鼠李糖乳杆菌大鼠小梁网*培养基
肿瘤坏死因子受体相关因子2抗体平流层芽孢杆菌大鼠内脏脂肪*培养基
微管相关蛋白抗体黄曲霉小鼠淋巴管内皮*培养基
Tar DNA 结合蛋白43抗体植物乳杆菌植物亚种大鼠小脑颗粒*培养基
粘合su(固生蛋白)抗体玉米黑粉菌大鼠肾实质*培养基
三叶肽因子3抗体香菇大鼠平滑肌*培养基
组织因子途径抑制剂-2抗体葡萄座腔菌大鼠神经小胶质*培养基
转移生长因子α抗体(TGFα)亚褐钹孔菌大鼠脑动脉血管内皮*培养基
转化生长因子β1抗体(TGFβ1)*百脉根根瘤菌大鼠肠粘膜上皮*培养基
转移生长因子β2抗体(TGFβ2)多主葡萄壳菌小鼠肝内胆管上皮*培养基
NADP苹果酸酶(NADPME)测试盒微量法Toll样受体2(TLR2)试剂盒Anti-CUL2 Antibody磷酸化周期检查控制蛋白质
鞘磷脂(SM/SPH)试剂盒 Anti-CUL3 Antibody磷酸化减数分裂重组蛋白家族REC8
转录激活因子6(ATF6)试剂盒 Anti-CUL4B AntibodyATP依赖解旋酶RENT1
26S蛋白mei体(26S-PSM)试剂盒 Anti-CUL2 AntibodyRas相关雌调节生长抑制蛋白
阿黑皮su原(POMC)试剂盒Anti-CUL4A Antibody核酮糖1,5二磷酸羧化酶
抗乙酰受体(Anti-AChR)试剂盒Anti-CX3CL1 Antibody急性髓白血病1蛋白
血小板型磷酸果糖激酶(PFKP)试剂盒Anti-CXCL1 Antibody指状蛋白RET
实验方法学:
一、肝素的配制:
市售肝素冻干粉140单位/mg,1克瓶装,每瓶140,000单位,称取0.1克肝素冻干粉,加生理盐水5ml,配成2800单位/ml。取50~100μl湿润管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不会凝固。老鼠血易凝固,所以最好更浓一些。可以取0.1克肝素冻干粉,加3ml生理盐水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制备:取0.1克肝素冻干粉,加2.5ml生理盐水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,湿润管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),横向转动,每隔5~10分钟转动一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液样本的收集:
全血根据收集的条件,分成不抗凝和抗凝两种。同时,不抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血清;抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血浆。
1、不抗凝收集血清:将收集好的全血,静置1~2小时,直接低速离心分离出血清待用或保存。
2、抗凝收集血浆: 收集抗凝全血,轻轻颠倒充分抗凝后,可直接低速离心分离血浆(也可静置半小时左右再低速离心分离血浆)待用或保存。根据不同抗凝剂的性能特征,选择合适的抗凝剂。实验室常用的抗凝剂有肝素的各种盐。
选择抗凝的注意点:
①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致;
②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;
③、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.4~0.5ml血浆);
④、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后