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优点如下:
1、快速简便:全程约50分钟,可测100例左右样本。
2、取样量微:本法取手指或耳垂等末梢血20ul~50ul即可测红细胞中的SOD,只需2ml静脉血可测白细胞中的SOD及血小板中SOD,只需50mg左右组织就可测组织匀浆、胞浆中的SOD,0.2g组织可测线粒体及微粒体中的SOD。
3、灵敏度高:IC50=0.05g/ml,是邻苯三酚法的18倍。
4、稳定性好:试剂盒2~8℃存放6个月有效。
5、再现性好:变异系数CV=1.7%。
6、回收试验: X =103.3%。
7、受外界影响因素小:干扰因素少,重复性强。
8、测试面广:可测动物血液、组织、各种体液、灌流液等、各种培养细胞、细菌、植物组织、各种水产以及化妆品、保健品等,效果均佳。
特别提醒:本产品仅供科研研究使用,不得用于人体临床直接检测。
产品名称 | 检测方法 | 规格 | 货号 |
丙酮酸脱氢酶(PDH)测试盒可见分光光度法 | 可见分光光度法 | 50管/48样 | BJ-01611143-2 |
商品介绍:
测定意义PDH(EC 4.1.1.1)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,是丙酮酸脱氢酶复合体(PDHC)催化丙酮酸氧化脱羧的限速酶,催化丙酮酸脱梭生成羟乙ji-TPP,把糖酵解和三羧酸循环连接起来。测定原理PDH催化丙酮酸脱氢,同时还原WST-8产生黄色物质,从而导致450nm光吸收的增加。 需自备的仪器和用品可见分光光度计、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1 mL玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。 |
测定步骤:
1、 酶标仪预热30min以上,调节波长至450nm。
2、 试剂三的稀释:将试剂三用蒸馏水稀释50倍,用多少配多少。(试剂三和蒸馏水1:49稀释。
3、 工作液配制:在试剂一加入100μl试剂二,充分混匀。配好的试剂4℃避光可保存一周。(若一次性测定样本较少,可按照实际用量将试剂一和试剂二按照20ml:0.1ml的比例混匀配制)
4、 将一瓶试剂四用5ml蒸馏水溶解(溶解后一周内用完)。
5、 样本测定(在96孔板中依次加入下列试剂)充分混匀,室温静置30min后,450nm处测定各管吸光值A。
注意事项:
待测样品-70℃可保存1个月。需注意反复冻融会导致SOD部分失活。
一个试剂盒如果不能在3次内使用完毕,其中的WST-8需要在使用时适当分装,以避免反复冻融导致的检测效果下降。
标准品稀释时所用的稀释液应尽量与样品一致。样品用试剂盒提供的SOD样品制备液制备时,标准品也宜使用SOD样品制备液进行稀释;当样品为血液等无需处理的样品时,宜使用试剂盒提供的SOD检测缓冲液稀释标准品。
抗氧化物会对本试剂盒的检测产生干扰,例如0.1mM ascorbic acid,5mM GSH都会使测定出来的吸光度显著升高。此时尽管样品没有颜色,如果设置了使用说明中的空白对照3,就可以消除样品中的抗氧化物的干扰。
实验方法学:
一、肝素的配制:
市售肝素冻干粉140单位/mg,1克瓶装,每瓶140,000单位,称取0.1克肝素冻干粉,加生理盐水5ml,配成2800单位/ml。取50~100μl湿润管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不会凝固。老鼠血易凝固,所以最好更浓一些。可以取0.1克肝素冻干粉,加3ml生理盐水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制备:取0.1克肝素冻干粉,加2.5ml生理盐水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,湿润管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),横向转动,每隔5~10分钟转动一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液样本的收集:
全血根据收集的条件,分成不抗凝和抗凝两种。同时,不抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血清;抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血浆。
1、不抗凝收集血清:将收集好的全血,静置1~2小时,直接低速离心分离出血清待用或保存。
2、抗凝收集血浆: 收集抗凝全血,轻轻颠倒充分抗凝后,可直接低速离心分离血浆(也可静置半小时左右再低速离心分离血浆)待用或保存。根据不同抗凝剂的性能特征,选择合适的抗凝剂。实验室常用的抗凝剂有肝素的各种盐。
选择抗凝的注意点:
①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致;
②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;
③、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.4~0.5ml血浆);
④、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后
丝an酸蛋白mei/线粒体丝an酸蛋白mei多肽抗原葡萄穗霉猪蛋白质二硫键异构酶(PDI)elisa定量检测试剂盒
离子钙接头蛋白抗原 华丽侧耳(佛罗里达侧耳)猪骨粘连蛋白(ON)elisa定量检测试剂盒
小肠型脂肪酸结合蛋白抗原水稻节杆菌猪去甲肾上腺su(NA/NE)elisa定量检测试剂盒
干扰su诱导跨膜蛋白1抗原青春双歧杆菌猪蛋白激酶抑制剂γ(PKIγ)elisa定量检测试剂盒
干扰su-α抗原(人)枯草芽孢杆菌猪红激因子(ESF)elisa定量检测试剂盒
干扰su-gamma受体1抗原乳酸链球菌猪唾液酸(SA)elisa定量检测试剂盒
胰岛su样生长因子结合蛋白-2(多肽)金黄杆菌属猪天门冬an酸氨基转移酶(AST)elisa定量检测试剂盒
胰岛su样生长因子结合蛋白-3抗原泛酸枝芽胞杆菌猪三叶因子1(TFF1)elisa定量检测试剂盒
胰岛su样生长因子2 mRNA 结合蛋白3抗原鲁氏毛霉猴趋化su样因子超家族成员5(CKLFSF5)elisa定量检测试剂盒
KB抑制蛋白β(多肽)空泡单胞菌猴血小板膜糖蛋白IV (GP4/CD36)elisa定量检测试剂盒
KB抑制蛋白α抗原假单胞菌猪半胱天冬酶3(P3)elisa定量检测试剂盒
白介su12抗原(白介su-12)豇豆慢生根瘤菌猪高尔基蛋白73(GP-73)elisa定量检测试剂盒
白介su12抗原(人)拉考夫梅奇酵母 猪信号传导转录激活因子1(STAT1)elisa定量检测试剂盒
白介su-12受体β2抗原假诺卡氏菌猪钙腔蛋白(CALU)elisa定量检测试剂盒
白介su13抗原木霉属猪胱天蛋白mei10(P10)elisa定量检测试剂盒
丙酮酸脱氢酶(PDH)测试盒可见分光光度法苯酸诺龙/苯酸去(NP)试剂盒Anti-MAD1L1 Antibody(PB0258)转录辅助因子退变样蛋白3
脑多巴神经营养因子(CDNF)试剂盒 Anti-MADCAM1 Antibody转录辅助因子退变样蛋白1
糖缺失性转铁蛋白(CDT)试剂盒 Anti-MAD2L1 Antibody病抑制蛋白Viperin
胰腺癌标志物(CA242)试剂盒Anti-MAdCAM1 Antibody血管假性血友病因子/血管性血友病因子
血清样蛋白P(SAP)试剂盒 Anti-MAFA Antibody血管内皮生长因子B167
白分化抗原CD109(CD109)试剂盒 Anti-MAF Antibody血管内皮生长因子B
血小板衍生生长因子受体α(PDGFRα)试剂盒Anti-MAFA Antibody01群稻叶型霍乱弧