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优点如下:
1、快速简便:全程约50分钟,可测100例左右样本。
2、取样量微:本法取手指或耳垂等末梢血20ul~50ul即可测红细胞中的SOD,只需2ml静脉血可测白细胞中的SOD及血小板中SOD,只需50mg左右组织就可测组织匀浆、胞浆中的SOD,0.2g组织可测线粒体及微粒体中的SOD。
3、灵敏度高:IC50=0.05g/ml,是邻苯三酚法的18倍。
4、稳定性好:试剂盒2~8℃存放6个月有效。
5、再现性好:变异系数CV=1.7%。
6、回收试验: X =103.3%。
7、受外界影响因素小:干扰因素少,重复性强。
8、测试面广:可测动物血液、组织、各种体液、灌流液等、各种培养细胞、细菌、植物组织、各种水产以及化妆品、保健品等,效果均佳。
特别提醒:本产品仅供科研研究使用,不得用于人体临床直接检测。
产品名称 | 检测方法 | 规格 | 货号 |
线粒体柠檬酸(MCA)含量测试盒微量法 | 微量法 | 100管/96样 | BJ-01611147-1 |
商品介绍:
测定意义: CA是线粒体三羧酸循环的第一个中间产物,由柠檬酸合酶催化乙酰CoA与草酰乙酸合成,其含量是三羧酸循环强度的主要指标之一。 配合测定丙酮酸含量、丙酮酸脱氢酶活性、乙酰CoA含量、柠檬酸合酶活性和CA含量,其中(1)丙酮酸含量和丙酮酸脱氢酶活性变化可以反映糖酵解进行程度,(2)综合分析丙酮酸含量、丙酮酸脱氢酶活性和乙酰CoA含量变化可以反映脂肪酸β-氧化途径提供的乙酰CoA情况,(3)乙酰CoA含量、柠檬酸合酶活性和CA含量变化可以反映三羧酸循环进行状况。 测定原理: CA在柠檬酸裂解酶的作用下,生成α-酮酸(草酰乙酸);在弱酸性条件下,α-酮酸进一步与苯肼反应,生成相应的α-酮酸苯腙;α-酮酸苯腙在330nm处有吸收峰,该波长下吸光度的变化程度可反映出CA的含量。 自备仪器和用品: 可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、可调式移液枪、微量石英比色皿/96孔板、研钵、蒸馏水。 |
测定步骤:
1、 酶标仪预热30min以上,调节波长至450nm。
2、 试剂三的稀释:将试剂三用蒸馏水稀释50倍,用多少配多少。(试剂三和蒸馏水1:49稀释。
3、 工作液配制:在试剂一加入100μl试剂二,充分混匀。配好的试剂4℃避光可保存一周。(若一次性测定样本较少,可按照实际用量将试剂一和试剂二按照20ml:0.1ml的比例混匀配制)
4、 将一瓶试剂四用5ml蒸馏水溶解(溶解后一周内用完)。
5、 样本测定(在96孔板中依次加入下列试剂)充分混匀,室温静置30min后,450nm处测定各管吸光值A。
注意事项:
待测样品-70℃可保存1个月。需注意反复冻融会导致SOD部分失活。
一个试剂盒如果不能在3次内使用完毕,其中的WST-8需要在使用时适当分装,以避免反复冻融导致的检测效果下降。
标准品稀释时所用的稀释液应尽量与样品一致。样品用试剂盒提供的SOD样品制备液制备时,标准品也宜使用SOD样品制备液进行稀释;当样品为血液等无需处理的样品时,宜使用试剂盒提供的SOD检测缓冲液稀释标准品。
抗氧化物会对本试剂盒的检测产生干扰,例如0.1mM ascorbic acid,5mM GSH都会使测定出来的吸光度显著升高。此时尽管样品没有颜色,如果设置了使用说明中的空白对照3,就可以消除样品中的抗氧化物的干扰。
实验方法学:
一、肝素的配制:
市售肝素冻干粉140单位/mg,1克瓶装,每瓶140,000单位,称取0.1克肝素冻干粉,加生理盐水5ml,配成2800单位/ml。取50~100μl湿润管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不会凝固。老鼠血易凝固,所以最好更浓一些。可以取0.1克肝素冻干粉,加3ml生理盐水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制备:取0.1克肝素冻干粉,加2.5ml生理盐水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,湿润管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),横向转动,每隔5~10分钟转动一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液样本的收集:
全血根据收集的条件,分成不抗凝和抗凝两种。同时,不抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血清;抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血浆。
1、不抗凝收集血清:将收集好的全血,静置1~2小时,直接低速离心分离出血清待用或保存。
2、抗凝收集血浆: 收集抗凝全血,轻轻颠倒充分抗凝后,可直接低速离心分离血浆(也可静置半小时左右再低速离心分离血浆)待用或保存。根据不同抗凝剂的性能特征,选择合适的抗凝剂。实验室常用的抗凝剂有肝素的各种盐。
选择抗凝的注意点:
①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致;
②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;
③、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.4~0.5ml血浆);
④、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后
白介su-1受体相关激酶2臭曲霉酸涩变种神经元凋亡抑制蛋白(NAIP)elisa定量检测试剂盒
白介su-1受体拮抗剂抗原葡萄座腔菌兔转录激活因子-1(ATF-1)elisa定量检测试剂盒
整合suα7抗原解脂亚罗酵母兔β内啡肽受体(β-EPR)elisa定量检测试剂盒
粘附分子整合suβ1抗原球状枝孢兔端粒酶相关蛋白1(TEP1)elisa定量检测试剂盒
粘附分子整合suα5抗原Bacillus safensis Satomi et al. 猴周期su依赖性激酶5(CDK5)elisa定量检测试剂盒
整合suαV抗原啤酒酵母猴嗜酸性白血球相关之RNA水解酵su家族成员12(EAR12)elisa定量检测试剂盒
蛋白质酪an酸激酶JAK-1抗原球孢白僵菌兔血管紧张suIII(ANG III)elisa定量检测试剂盒
蛋白质酪an酸激酶JAK-2抗原金针菇8号兔鞘磷脂脂质蛋白1(PLP1)elisa定量检测试剂盒
磷酸化蛋白酪an酸激酶JAK-2抗原麦克默多生孢八叠球菌猴脱氧核糖核酸酶I(DNase-I)elisa定量检测试剂盒
c-Jun氨基末端激酶1/3多肽抗原樟疫霉接触蛋白1(CNTN1)elisa定量检测试剂盒
磷酸化氨基末端激酶1/2/3(pJNK1/2/3)抗原免疫球蛋白G Fc段低亲和力受体IIIa(FcγR3A)elisa定量检测试剂盒
Ki-67 Antigen柳属半明小黑腐皮壳菌猴纤维蛋白原相关蛋白1(FGL1)elisa定量检测试剂盒
肠道内富含的Kruppel样因子抗原大肠埃希菌猴GATA结合蛋白4(GATA4)elisa定量检测试剂盒
磷酸化肠道内富含的Kruppel样因子5抗原酿酒酵母猴二肽基肽酶VI (DPP6)elisa定量检测试剂盒
磷酸化肠道内富含的Kruppel样因子5抗原小孢毛霉周期su依赖性激酶4(CDK4)elisa定量检测试剂盒
线粒体柠檬酸(MCA)含量测试盒微量法Apelin 13(AP13)试剂盒 Anti-MAP2K3 Antibody囊泡相关膜蛋白3
S100钙结合蛋白B (S100B)试剂盒 Anti-MAP2K3 Antibody空泡分选蛋白18
GATA结合蛋白3(GATA3)试剂盒Anti-MAP2K4 Antibody磷酸化波形蛋白
基质金属蛋白mei抑制因子3(TIMP-3)试剂盒Anti-MAP2K4 Antibody磷酸化波形蛋白
甲状旁腺(PTH)试剂盒Anti-MAP2K7 Antibody鸟苷酸转换因子VAV1
硒蛋白1(SEP1)试剂盒Anti-MAP2K6 Antibody磷酸化鸟苷酸转换因子VAV1
血小板激活因子(PAF)试剂盒Anti-MAP2K6 Antibody磷酸化鸟苷酸转换因子VAV1