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特别提醒:本产品仅供科研研究使用,不得用于人体临床直接检测。
产品名称 | 检测方法 | 规格 | 货号 |
糖原磷酸化酶a(GPa)测试盒紫外分光光度法 | 紫外分光光度法 | 50管/48样 | BJ-01611378-2 |
商品介绍:
测定意义: 糖原磷酸化酶(Glycogen phosphorylase,GP,EC 2.4.1.1))是糖原分解代谢的关键酶,使糖原分子从非还原端逐个断开α-1,4-糖苷键移去葡萄糖基,释放1-磷酸葡萄糖,直至临近糖原分子α-1,6-糖苷键分支点前4个葡萄糖基处。GP分为有活性的糖原磷酸化酶a(GPa)和无活性的糖原磷酸化酶b(GPb)两种形式。糖原的分解主要在GPa的催化下进行。 测定原理: 未添加激活剂时,GPa催化糖原和无机磷产生葡萄糖残基生成糖原和1-磷酸葡萄糖,磷酸葡萄糖变位酶和6-磷酸葡萄糖脱氢酶进一步依次催化NADP还原生成NADPH,在340nm下测定NADPH上升速率,即可反映GPa活性。 需自备的仪器和用品: 紫外分光光度计、台式离心机、可调式移液器、1 mL石英比色皿、研钵、冰和蒸馏水。 |
优点如下:
1、快速简便:全程约50分钟,可测100例左右样本。
2、取样量微:本法取手指或耳垂等末梢血20ul~50ul即可测红细胞中的SOD,只需2ml静脉血可测白细胞中的SOD及血小板中SOD,只需50mg左右组织就可测组织匀浆、胞浆中的SOD,0.2g组织可测线粒体及微粒体中的SOD。
3、灵敏度高:IC50=0.05g/ml,是邻苯三酚法的18倍。
4、稳定性好:试剂盒2~8℃存放6个月有效。
5、再现性好:变异系数CV=1.7%。
6、回收试验: X =103.3%。
7、受外界影响因素小:干扰因素少,重复性强。
8、测试面广:可测动物血液、组织、各种体液、灌流液等、各种培养细胞、细菌、植物组织、各种水产以及化妆品、保健品等,效果均佳。
测定步骤:
1、 酶标仪预热30min以上,调节波长至450nm。
2、 试剂三的稀释:将试剂三用蒸馏水稀释50倍,用多少配多少。(试剂三和蒸馏水1:49稀释。
3、 工作液配制:在试剂一加入100μl试剂二,充分混匀。配好的试剂4℃避光可保存一周。(若一次性测定样本较少,可按照实际用量将试剂一和试剂二按照20ml:0.1ml的比例混匀配制)
4、 将一瓶试剂四用5ml蒸馏水溶解(溶解后一周内用完)。
5、 样本测定(在96孔板中依次加入下列试剂)充分混匀,室温静置30min后,450nm处测定各管吸光值A。
注意事项:
待测样品-70℃可保存1个月。需注意反复冻融会导致SOD部分失活。
一个试剂盒如果不能在3次内使用完毕,其中的WST-8需要在使用时适当分装,以避免反复冻融导致的检测效果下降。
标准品稀释时所用的稀释液应尽量与样品一致。样品用试剂盒提供的SOD样品制备液制备时,标准品也宜使用SOD样品制备液进行稀释;当样品为血液等无需处理的样品时,宜使用试剂盒提供的SOD检测缓冲液稀释标准品。
抗氧化物会对本试剂盒的检测产生干扰,例如0.1mM ascorbic acid,5mM GSH都会使测定出来的吸光度显著升高。此时尽管样品没有颜色,如果设置了使用说明中的空白对照3,就可以消除样品中的抗氧化物的干扰。
支架蛋白抗体阴沟肠杆菌吲达帕
非洲爪蟾IGC抗体枯草芽孢杆菌盐suan妥洛特
干扰su诱导跨膜蛋白1抗体汉塔成对杆菌香橼LAMP鉴定试剂盒
干扰suβ抗体纺锤状链霉菌小鼠γ干扰su(IFN-γ)Elisa测定试剂盒
γ-干扰su/γ-IFN单克隆抗体稻平脐蠕孢大鼠组织多肽抗原(TPA)Elisa测定试剂盒
干扰su-γ/IFN-γ抗体贝酵母大鼠双氢睾酮(DHT)Elisa测定试剂盒
干扰su-γ/IFN-γ抗体伯克霍尔德氏菌属大鼠白介su2可溶性受体β链(IL-2sRβ)Elisa测定试剂盒
胰岛su样生长因子I受体抗体酿酒酵母白介su8抗体流式免疫组化
胰岛su样生长因子1受体抗体枯草芽孢杆菌蛋白mei激活受体-1抗体流式免疫组化
胰岛su样生长因子结合蛋白2抗体厚孢根霉三甲狀腺suT3抗体流式免疫组化
胰岛su样生长因子结合蛋白5抗体枯草芽孢杆菌多聚左旋赖ansuan
胰岛su样生长因子1抗体HymenobacterNa-苯甲酰-L-精ansuan乙酯盐suan
胰岛su样生长因子-II抗体瑞士乳杆菌木瓜蛋白mei
白介su10抗体豇豆慢生根瘤菌邻-α-D-吡喃葡萄糖苷
白介su13抗体酿酒酵母复合酶稳定剂AES
糖原磷酸化酶a(GPa)测试盒紫外分光光度法抗角蛋白(AKA)试剂盒 Anti-CHD1L Antibody蓬乱蛋白1
II型前胶原氨基端原肽(PIINP)试剂盒Anti-CHEK1 Antibody鸟苷三磷suan酶-发动蛋白2
微管关联蛋白(MAPτ)试剂盒Anti-CHML Antibody发育调节蛋白多肽抗原
AMP活化蛋白激酶α1(PRKAα1)试剂盒Anti-CHID1 Antibody转录因子E2F-1
神经肽Y受体Y1(NPYR1)试剂盒Anti-CHP1 Antibody转录因子E2F-2抗原
Rac-GTP酶激活蛋白1(Rac-GAP1)试剂盒Anti-CHD4 Antibody转录因子E2F-4抗原
信号su7A(SEMA7A)试剂盒Anti-CHP2 Antibody转录因子E2F-6抗原
实验方法学:
一、肝素的配制:
市售肝素冻干粉140单位/mg,1克瓶装,每瓶140,000单位,称取0.1克肝素冻干粉,加生理盐水5ml,配成2800单位/ml。取50~100μl湿润管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不会凝固。老鼠血易凝固,所以最好更浓一些。可以取0.1克肝素冻干粉,加3ml生理盐水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制备:取0.1克肝素冻干粉,加2.5ml生理盐水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,湿润管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),横向转动,每隔5~10分钟转动一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液样本的收集:
全血根据收集的条件,分成不抗凝和抗凝两种。同时,不抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血清;抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血浆。
1、不抗凝收集血清:将收集好的全血,静置1~2小时,直接低速离心分离出血清待用或保存。
2、抗凝收集血浆: 收集抗凝全血,轻轻颠倒充分抗凝后,可直接低速离心分离血浆(也可静置半小时左右再低速离心分离血浆)待用或保存。根据不同抗凝剂的性能特征,选择合适的抗凝剂。实验室常用的抗凝剂有肝素的各种盐。
选择抗凝的注意点:
①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致;
②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;
③、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.4~0.5ml血浆);
④、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后