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优点如下:
1、快速简便:全程约50分钟,可测100例左右样本。
2、取样量微:本法取手指或耳垂等末梢血20ul~50ul即可测红细胞中的SOD,只需2ml静脉血可测白细胞中的SOD及血小板中SOD,只需50mg左右组织就可测组织匀浆、胞浆中的SOD,0.2g组织可测线粒体及微粒体中的SOD。
3、灵敏度高:IC50=0.05g/ml,是邻苯三酚法的18倍。
4、稳定性好:试剂盒2~8℃存放6个月有效。
5、再现性好:变异系数CV=1.7%。
6、回收试验: X =103.3%。
7、受外界影响因素小:干扰因素少,重复性强。
8、测试面广:可测动物血液、组织、各种体液、灌流液等、各种培养细胞、细菌、植物组织、各种水产以及化妆品、保健品等,效果均佳。
特别提醒:本产品仅供科研研究使用,不得用于人体临床直接检测。
产品名称 | 检测方法 | 规格 | 货号 |
糖原合成酶(GCS)测试盒紫外分光光度法 | 紫外分光光度法 | 50管/48样 | BJ-01611377-2 |
商品介绍:
测定意义: GCS(EC 2.4.1.11)催化UDPG和葡萄糖残基生成糖原和UTP,以α-1,4-糖苷键相连延长糖链,是肝和肌肉糖原合成酶的限速酶,是胰岛素作用的主要靶酶,对糖代谢的调节和血糖稳态的维持具有重要作用。 测定原理: GCS催化UDPG和葡萄糖残基生成糖原和UTP,丙酮酸激酶和乳酸脱氢酶进一步依次催化NADH氧化生成NAD+,在340nm下测定NADH下降速率,即可反映GCS活性。 需自备的仪器和用品: 紫外分光光度计、台式离心机、可调式移液器、1mL微量石英比色皿、研钵、冰和蒸馏水。 |
测定步骤:
1、 酶标仪预热30min以上,调节波长至450nm。
2、 试剂三的稀释:将试剂三用蒸馏水稀释50倍,用多少配多少。(试剂三和蒸馏水1:49稀释。
3、 工作液配制:在试剂一加入100μl试剂二,充分混匀。配好的试剂4℃避光可保存一周。(若一次性测定样本较少,可按照实际用量将试剂一和试剂二按照20ml:0.1ml的比例混匀配制)
4、 将一瓶试剂四用5ml蒸馏水溶解(溶解后一周内用完)。
5、 样本测定(在96孔板中依次加入下列试剂)充分混匀,室温静置30min后,450nm处测定各管吸光值A。
注意事项:
待测样品-70℃可保存1个月。需注意反复冻融会导致SOD部分失活。
一个试剂盒如果不能在3次内使用完毕,其中的WST-8需要在使用时适当分装,以避免反复冻融导致的检测效果下降。
标准品稀释时所用的稀释液应尽量与样品一致。样品用试剂盒提供的SOD样品制备液制备时,标准品也宜使用SOD样品制备液进行稀释;当样品为血液等无需处理的样品时,宜使用试剂盒提供的SOD检测缓冲液稀释标准品。
抗氧化物会对本试剂盒的检测产生干扰,例如0.1mM ascorbic acid,5mM GSH都会使测定出来的吸光度显著升高。此时尽管样品没有颜色,如果设置了使用说明中的空白对照3,就可以消除样品中的抗氧化物的干扰。
实验方法学:
一、肝素的配制:
市售肝素冻干粉140单位/mg,1克瓶装,每瓶140,000单位,称取0.1克肝素冻干粉,加生理盐水5ml,配成2800单位/ml。取50~100μl湿润管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不会凝固。老鼠血易凝固,所以最好更浓一些。可以取0.1克肝素冻干粉,加3ml生理盐水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制备:取0.1克肝素冻干粉,加2.5ml生理盐水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,湿润管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),横向转动,每隔5~10分钟转动一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液样本的收集:
全血根据收集的条件,分成不抗凝和抗凝两种。同时,不抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血清;抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血浆。
1、不抗凝收集血清:将收集好的全血,静置1~2小时,直接低速离心分离出血清待用或保存。
2、抗凝收集血浆: 收集抗凝全血,轻轻颠倒充分抗凝后,可直接低速离心分离血浆(也可静置半小时左右再低速离心分离血浆)待用或保存。根据不同抗凝剂的性能特征,选择合适的抗凝剂。实验室常用的抗凝剂有肝素的各种盐。
选择抗凝的注意点:
①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致;
②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;
③、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.4~0.5ml血浆);
④、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后
FBXL11蛋白抗体猴头菌激活的脱氧核糖核suan酶抗体流式免疫组化
免疫球蛋白超家族成员21抗体镰刀菌半胱suan蛋白mei蛋白-13抗体流式免疫组化
白介su9抗体草suan青霉兔抗瓜ansuan环肽抗体流式免疫组化
乙酰乳suan合成酶蛋白抗体冠突曲霉CD17抗体流式免疫组化
异柠檬suan脱氢酶1抗体埃切假丝酵母抗L-瓜ansuan抗体流式免疫组化
IKK激酶相互作用蛋白抗体酿酒酵母食欲su受体抗体流式免疫组化
磷suan化核因子NFκB抑制蛋白激酶i抗体乳菇属鼠抗人前列腺特异性抗原抗体流式免疫组化
白介su8抗体泌液克里格范瑞吉酵母D-赖ansuan盐suan盐
Iroquois同源蛋白5抗体大樱桃叶细菌性穿孔病*D-甲硫ansuan
整合suαE抗体Integrin αE头状丝孢酵母L-正缬ansuan
间粘附分子-2抗体胶孢镰孢肌酐酶
整合suβ3抗体浅紫灰链霉菌产色变种S-腺苷高半胱ansuan水解酶
整合suα4抗体酱油曲霉环磷suan腺苷
白介su15抗体杂色曲霉甲基-β-环糊精
磷suan化白介su-1受体相关激酶1抗体猪丹丝菌苯甲suan酐
糖原合成酶(GCS)测试盒紫外分光光度法黑su瘤抑制性活性蛋白1(MIA1)试剂盒 Anti-CEP55 Antibody防御suβ1抗原
型球蛋白A(sIgA)试剂盒 Anti-CEP78 Antibody防御suβ1抗原(人)
钙视网膜蛋白(CR)试剂盒Anti-CEP95 Antibody防御suβ2抗原(小鼠)
血小板因子4变种1(PF4V1)试剂盒Anti-CEP95 Antibody防御suβ2抗原(大鼠)
天门冬ansuan氨基转移酶(AST)试剂盒 Anti-CEP76 Antibody凋亡相关蛋白激酶1抗原
XIII A1多肽(F13A1)试剂盒 Anti-CER1 Antibody鸭甲型肝炎A病抗原
促有丝分裂因子(MF/MPF)试剂盒 Anti-CERKL Antibody结蛋白抗原