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特别提醒:本产品仅供科研研究使用,不得用于人体临床直接检测。
产品名称 | 检测方法 | 规格 | 货号 |
丙酮酸羧化酶(PC)测试盒微量法 | 微量法 | 100管/96样 | BJ-01611376-1 |
商品介绍:
测定意义: 丙酮酸羧化酶(pyruvate carboxylase,PC,EC 6.4.1.1)广泛存在于动物、霉菌和酵母的线粒体中,催化丙酮酸、ATP、CO2和水生成草酰乙酸、ADP和Pi,是糖异生过程的第一个限速酶,在保证血糖的动态平衡方面起着重要的作用。 测定原理: PC催化丙酮酸、ATP、CO2和水生成草酰乙酸、ADP和Pi,苹果酸脱氢酶进一步催化草酰乙酸和NADH生成苹果酸和NAD+,在340nm下测定NADH氧化速率,即可反映PC活性 需自备的仪器和用品: 分光光度计/酶标仪、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。 |
优点如下:
1、快速简便:全程约50分钟,可测100例左右样本。
2、取样量微:本法取手指或耳垂等末梢血20ul~50ul即可测红细胞中的SOD,只需2ml静脉血可测白细胞中的SOD及血小板中SOD,只需50mg左右组织就可测组织匀浆、胞浆中的SOD,0.2g组织可测线粒体及微粒体中的SOD。
3、灵敏度高:IC50=0.05g/ml,是邻苯三酚法的18倍。
4、稳定性好:试剂盒2~8℃存放6个月有效。
5、再现性好:变异系数CV=1.7%。
6、回收试验: X =103.3%。
7、受外界影响因素小:干扰因素少,重复性强。
8、测试面广:可测动物血液、组织、各种体液、灌流液等、各种培养细胞、细菌、植物组织、各种水产以及化妆品、保健品等,效果均佳。
测定步骤:
1、 酶标仪预热30min以上,调节波长至450nm。
2、 试剂三的稀释:将试剂三用蒸馏水稀释50倍,用多少配多少。(试剂三和蒸馏水1:49稀释。
3、 工作液配制:在试剂一加入100μl试剂二,充分混匀。配好的试剂4℃避光可保存一周。(若一次性测定样本较少,可按照实际用量将试剂一和试剂二按照20ml:0.1ml的比例混匀配制)
4、 将一瓶试剂四用5ml蒸馏水溶解(溶解后一周内用完)。
5、 样本测定(在96孔板中依次加入下列试剂)充分混匀,室温静置30min后,450nm处测定各管吸光值A。
注意事项:
待测样品-70℃可保存1个月。需注意反复冻融会导致SOD部分失活。
一个试剂盒如果不能在3次内使用完毕,其中的WST-8需要在使用时适当分装,以避免反复冻融导致的检测效果下降。
标准品稀释时所用的稀释液应尽量与样品一致。样品用试剂盒提供的SOD样品制备液制备时,标准品也宜使用SOD样品制备液进行稀释;当样品为血液等无需处理的样品时,宜使用试剂盒提供的SOD检测缓冲液稀释标准品。
抗氧化物会对本试剂盒的检测产生干扰,例如0.1mM ascorbic acid,5mM GSH都会使测定出来的吸光度显著升高。此时尽管样品没有颜色,如果设置了使用说明中的空白对照3,就可以消除样品中的抗氧化物的干扰。
内皮凝集suHL1抗体茯苓表告依春
干扰suα抗体闪光须霉麦冬
白介su-17F抗体米曲霉丁香叶
白介su6抗体(N端)谷ansuan棒杆菌石吊兰
白介su6抗体香草兰根疾
干扰suepsilon 1蛋白抗体鞘氨单胞菌属枸橼suan
磷suan化KB抑制蛋白激酶γ抗体葡萄座腔菌氨
磷suan化白介su1受体1抗体苏云金芽胞杆菌库尔斯塔克亚种苄ansuan
白介su3抗体Marivirga tractuosa卡
异戊烯焦磷suan1抗体蜡状芽孢杆菌盐suan赛洛唑啉
磷suan化胰岛su受体底物-1抗体食树脂新鞘氨菌小鼠转化生长因子α(TGF-α)Elisa测定试剂盒
磷suan化胰岛su受体底物-1抗体光孢黄丛枝珊瑚菌转录因子E2F-1抗体流式免疫组化
胰岛su诱导基因1抗体约利曼漆斑菌抗“衰老关键蛋白”抗体流式免疫组化anti-Fibulin 1
FC段γ受体3/免疫球蛋白G Fc段受体III抗体金黄亚种葡萄糖转运蛋白2抗体流式免疫组化
磷suan化白介su-1受体相关激酶4抗体Pseudarthrobacter层粘蛋白α5抗体流式免疫组化
丙酮酸羧化酶(PC)测试盒微量法乙酰fu酶A乙酰转移酶2(ACAT2)试剂盒 Anti-CEBPZ Antibody心肌肌钙蛋白
胰岛su样生长因子结合蛋白2(IGFBP-2)试剂盒Anti-CELA3B Antibody间隙连接蛋白32抗原
突触足蛋白(SYNPO)试剂盒Anti-CEBPG Antibody间隙连接蛋白36抗原
Bcl-2样蛋白1(BCL2L1/BCL-X)试剂盒Anti-CELSR1 Antibody间隙连接蛋白40(多肽)
凝溶胶蛋白(GS)试剂盒 Anti-CELF1 Antibody趋化因子(C-X3-C 基元)配体1抗原
纤蛋白原(FG)试剂盒 Anti-CELSR2 AntibodyCX3C趋化因子受体1抗原
成熟促进因子(MPF)试剂盒 Anti-CELSR3/Flamingo homolog 1 Antibody周期suA抗原
实验方法学:
一、肝素的配制:
市售肝素冻干粉140单位/mg,1克瓶装,每瓶140,000单位,称取0.1克肝素冻干粉,加生理盐水5ml,配成2800单位/ml。取50~100μl湿润管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不会凝固。老鼠血易凝固,所以最好更浓一些。可以取0.1克肝素冻干粉,加3ml生理盐水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制备:取0.1克肝素冻干粉,加2.5ml生理盐水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,湿润管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),横向转动,每隔5~10分钟转动一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液样本的收集:
全血根据收集的条件,分成不抗凝和抗凝两种。同时,不抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血清;抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血浆。
1、不抗凝收集血清:将收集好的全血,静置1~2小时,直接低速离心分离出血清待用或保存。
2、抗凝收集血浆: 收集抗凝全血,轻轻颠倒充分抗凝后,可直接低速离心分离血浆(也可静置半小时左右再低速离心分离血浆)待用或保存。根据不同抗凝剂的性能特征,选择合适的抗凝剂。实验室常用的抗凝剂有肝素的各种盐。
选择抗凝的注意点:
①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致;
②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;
③、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.4~0.5ml血浆);
④、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后