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产品简介:
产品名称:NADP苹果酸脱氢酶(NADPMDH)测试盒微量法
规格:100管/96样
货号:BJ-016115-1
检测方法:微量法
产品分类:辅酶Ⅰ系列
贮存温度:2~8℃。
本试剂盒保质期:6个月
商品介绍:
测定意义: MDH (EC 1.1.1.37)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,线粒体中MDH是TCA循环的关键酶之一,催化苹果酸形成草酰乙酸;相反,胞浆中MDH催化草酰乙酸形成苹果酸。草酰乙酸是重要的中间产物, 连接多条重要的代谢途径。因此,MDH在细胞多种生理活动中扮演着重要的角色,包括线粒体的能量代谢、 苹果酸-天冬氨酸穿梭系统、活性氧代谢和抗病性等。根据不同的辅酶特异性,MDH分为NAD-依赖的MDH和NADP-依赖的MDH, NADP-MDH主要存在于真核细胞中。 测定原理: NADP-MDH催化NADPH还原草酰乙酸生成苹果酸,导致340nm处光吸收下降。 需自备的仪器和用品: 紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板和蒸馏水。 |
操作步骤:
本产品仅供科研研究使用,不得用于人体临床直接检测。实验开始前,各试剂均应平衡至室温(试剂不能直接在37℃溶解);试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量,如样品浓度过高时,应对样品进行稀释,以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围,计算时再乘以相应的稀释倍数。
1. 加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。
2. 弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100μl(在使用前一小时内配制),酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。
3. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,大约400μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。
4. 每孔加检测溶液B工作液(同检测A工作液) 100μl,酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。
5. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶标板加上覆膜37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。
7. 依序每孔加终止溶液50μl,终止反应,此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。
端粒酶相关蛋白1抗体多主葡萄壳菌Hs 746T(人胃癌)
谷氨酰转酶3抗体鞘氨单胞菌P19(小鼠畸胎瘤)
环指蛋白92抗体康宁木霉NCI-H292(人肺癌)
环指蛋白调节蛋白激酶C蛋白抗体构巢曲霉MFC(小鼠胃癌)
TRIM50蛋白抗体米根霉LS-174T(人结肠腺癌)
环指蛋白88抗体沉积物盐坑微菌HFL1(人肺成纤维)
锌指蛋白抑制NFκB蛋白抗体紫麦角菌NR8383(大鼠肺泡巨噬)
环指蛋白98抗体大豆慢生根瘤菌MG-63(人骨肉瘤)
环指蛋白16抗体食物芽孢杆菌Eca-109(人食管癌)
环指蛋白105抗体大肠埃希菌P815(小鼠肥大瘤)
环指蛋白125抗体嗜麦芽寡养单胞菌HSC-T6(大鼠肝星形)
因子II)重链抗体苏云金芽孢杆菌HMy2.CIR(人B淋巴母)
转移生长因子β受体3抗体(TGF-βRⅢ,TGFβRⅢ)黑曲霉HL-7702(人肝正常)
辣椒素受体抗体大肠埃希氏菌DLD-1(人结肠腺癌)
肿瘤坏死因子α诱导蛋白1抗体产气荚膜梭菌 素C型JeKo-1(人套淋巴瘤)
NADP苹果酸脱氢酶(NADPMDH)测试盒微量法铁调素(Hepc)试剂盒Anti-CINP Antibody麻疯病和帕金森氏病共同调节蛋白
子XIII B多肽(F13B)试剂盒 Anti-CIITA Antibody环指蛋白131
肌营养不良蛋白关联糖蛋白1(DAG1)试剂盒 Anti-CHUK Antibody(PB0148)磷脂酶A2激活蛋白
甘氨酰tRNA合成酶(GARS)试剂盒 Anti-CIP2A Antibody胸苷磷酸化酶
视黄结合蛋白4(RBP4)试剂盒Anti-CISD2 Antibodypiwi样2蛋白
大脑脂肪酸结合蛋白7(FABP7)试剂盒Anti-CISH Antibody早老素蛋白-2
窖蛋白(Cav-1)试剂盒 Anti-CKAP4 Antibody组蛋白赖氨酸去甲基化酶PHF8
特点:
(1)应用广泛
由于各种各样的无机物和有机物在紫外可见区都有吸收,因此均可借此法加以测定。到目前为止,几乎化学元素周期表上的所有元素(除少数放射性元素和惰性元素之外)均可采用此法。
(2)灵敏度高
由于相应学科的发展,使新的有机显色剂的合成和研究取得可喜的进展,从而对元素测定的灵敏度大大提高了一步。特别是由于多元络合物和各种表面活性剂的应用研究,使许多元素的摩尔吸光系数由原来的几万提高到几十万。相对于其它痕量分析方法而言,光度法的精密度和准确度一致*是比较高的。不但在实际工作中光度法被广泛采用,在标准参考物质的研制中,它更受重视,很多光度分析法已制定成为标准方法。
(3)选择性好
目前已有些元素只要利用控制适当的显色条件就可直接进行光度法测定,如钴、铀、镍、铜、银、铁等元素的测定,已有比较满意的方法了。
(4)准确度高
对于一般的分光光度法来说,其浓度测量的相对误差在1-3%范围内,如采用示差分光度法测量,则误差往往可减少到千分之几。
(5)适用浓度范围广
可从常量(1-50%)(尤其是使用示差法)到痕量(10-6-10-8%)(经预富集后)。
(6)分析成本低、操作简便、快速