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产品简介：
产品名称：NAD苹果酸脱氢酶(NADMDH)测试盒微量法
规格：100管/96样
货号：BJ-016114-1
检测方法：微量法
产品分类：辅酶Ⅰ系列
贮存温度：2～8℃。
本试剂盒保质期：6个月
本产品仅供科研研究使用，不得用于人体临床直接检测。
商品介绍：
测定意义： MDH (EC 1.1.1.37)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，线粒体中MDH是TCA循环的关键酶之一，催化苹果酸形成草酰乙酸；相反，胞浆中MDH催化草酰乙酸形成苹果酸。草酰乙酸是重要的中间产物， 连接多条重要的代谢途径。因此，MDH在细胞多种生理活动中扮演着重要的角色，包括线粒体的能量代谢、 苹果酸-天冬氨酸穿梭系统、活性氧代谢和抗病性等。根据不同的辅酶特异性，MDH分为NAD-依赖的MDH和NADP-依赖的MDH，细菌中通常只含有NAD-MDH，在真核细胞中，NAD-MDH分布于细胞质和线粒体中。 测定原理： NAD-MDH催化NADH还原草酰乙酸生成苹果酸，导致340nm处光吸收下降。 需自备的仪器和用品： 紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板和蒸馏水。 |
特点:
(1)应用广泛
由于各种各样的无机物和有机物在紫外可见区都有吸收,因此均可借此法加以测定。到目前为止,几乎化学元素周期表上的所有元素(除少数放射性元素和惰性元素之外)均可采用此法。
(2)灵敏度高
由于相应学科的发展,使新的有机显色剂的合成和研究取得可喜的进展,从而对元素测定的灵敏度大大提高了一步。特别是由于多元络合物和各种表面活性剂的应用研究,使许多元素的摩尔吸光系数由原来的几万提高到几十万。相对于其它痕量分析方法而言,光度法的精密度和准确度一致*是比较高的。不但在实际工作中光度法被广泛采用,在标准参考物质的研制中,它更受重视,很多光度分析法已制定成为标准方法。
(3)选择性好
目前已有些元素只要利用控制适当的显色条件就可直接进行光度法测定,如钴、铀、镍、铜、银、铁等元素的测定,已有比较满意的方法了。
(4)准确度高
对于一般的分光光度法来说,其浓度测量的相对误差在1-3%范围内,如采用示差分光度法测量,则误差往往可减少到千分之几。
(5)适用浓度范围广
可从常量(1-50%)(尤其是使用示差法)到痕量(10-6-10-8%)(经预富集后)。
(6)分析成本低、操作简便、快速
操作步骤:
实验开始前，各试剂均应平衡至室温（试剂不能直接在37℃溶解）；试剂或样品稀释时，均需混匀，混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量，如样品浓度过高时，应对样品进行稀释，以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围，计算时再乘以相应的稀释倍数。
1. 加样：分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl，余孔分别加标准品或待测样品100μl，注意不要有气泡，加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀，酶标板加上盖或覆膜，37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性，每次实验请使用新的标准品溶液。
2. 弃去液体，甩干，不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100μl（在使用前一小时内配制），酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。
3. 温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分钟，大约400μl/每孔，甩干（也可轻拍将孔内液体拍干）。
4. 每孔加检测溶液B工作液（同检测A工作液） 100μl，酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。
5. 温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分钟，350μl/每孔，甩干（也可轻拍将孔内液体拍干）。
6. 依序每孔加底物溶液90μl，酶标板加上覆膜37℃避光显色（30分钟内，此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色，后3-4孔梯度不明显，即可终止）。
7. 依序每孔加终止溶液50μl，终止反应，此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性，底物反应时间到后应尽快加入终止液。
转化酸性卷曲含蛋白质2秦氏蜜环菌PK-15（猪肾）
小鼠抗促甲状腺素抗体草生毛霉HCT 116（人结肠癌）
脑源性tau蛋白激酶抗体芽孢杆菌属LoVo（人大肠癌）
破伤风素重链抗体龙舌兰盘孢HIC（人小肠癌）
酮基移换酶样蛋白1抗体链孢囊菌Lec1（仓鼠卵巢）
膜型丝蛋白酶2抗体黑曲霉小鼠骨髓间充质干（EGFP标记）
抑癌蛋白TCHP抗体玫瑰暗黄链霉菌HUVEC-12, 人脐静脉血管内皮系
T急性淋巴性白血病1蛋白/淋巴瘤蛋白5抗体地中海中慢生根瘤菌*LLC（小鼠肺癌）
胚胎干相关蛋白TXNDC9抗体扣囊复膜孢酵母ME-180（人颈表皮癌）
转录因子9抗体鼠李糖乳杆菌HT-1080（人纤维肉瘤）
转录因子THOC2抗体红城红球菌GNM（人口腔鳞癌颈淋巴结转移癌）
β4抗体根瘤菌HuH-7（人肝癌）
转移生长因子β3（TGFβ3）抗体热带假丝酵母DH82（犬巨噬）
转化生长因子β（TGFβ）抗体大肠埃希氏菌定量质控菌株*GBC-SD（人胆囊癌）
转化生长因子β2（TGFβ2）抗体群结腐霉ES-2（人卵巢透明癌）
NAD苹果酸脱氢酶(NADMDH)测试盒微量法促生长释放(GHRH)试剂盒 Anti-CHRM2 Antibodyp53激活蛋白2
金属硫蛋白1E (MT1E)试剂盒Anti-CHRM2 Antibody蛋白酶调解因子10
乙脱氢酶1(ADH1)试剂盒 Anti-CHRM2 Antibody环指蛋白3
碳酸酐酶II(CA2)试剂盒Anti-CHRNA1 Antibody酮酸脱氢酶激酶亚型2
甲状腺过氧化物酶(TPO)试剂盒Anti-CHRNA3 AntibodyRho相关结构域BTB蛋白质1
基质金属蛋白酶原10 (Pro-MMP-10)试剂盒Anti-CHRNA1 Antibody猪瘟病
二肽基肽酶VI (DPP6)试剂盒 Anti-CHRM3 Antibody腺样癌特异性相关抗原EMC1
