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优点如下:
1、快速简便:全程约50分钟,可测100例左右样本。
2、取样量微:本法取手指或耳垂等末梢血20ul~50ul即可测红细胞中的SOD,只需2ml静脉血可测白细胞中的SOD及血小板中SOD,只需50mg左右组织就可测组织匀浆、胞浆中的SOD,0.2g组织可测线粒体及微粒体中的SOD。
3、灵敏度高:IC50=0.05g/ml,是邻苯三酚法的18倍。
4、稳定性好:试剂盒2~8℃存放6个月有效。
5、再现性好:变异系数CV=1.7%。
6、回收试验: X =103.3%。
7、受外界影响因素小:干扰因素少,重复性强。
8、测试面广:可测动物血液、组织、各种体液、灌流液等、各种培养细胞、细菌、植物组织、各种水产以及化妆品、保健品等,效果均佳。
特别提醒:本产品仅供科研研究使用,不得用于人体临床直接检测。
产品名称 | 检测方法 | 规格 | 货号 |
NADH氧化酶(NOX)测试盒微量法 | 微量法 | 100管/96样 | BJ-016117-1 |
商品介绍:
测定意义: NOX(EC 1.6.99.3)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,可在氧气存在下,直接将NADH氧化为NAD。该酶不仅参与NAD的再生,而且与免疫反应密切相关。 测定原理: NOX能够将NADH氧化为NAD,NADH的氧化与2,6二氯酚靛蓝(DCPIP)的还原相偶联,蓝色的DCPIP被还原为无色的DCPIP,在600nm下测定蓝色DCPIP的还原速率计算出NADH氧化酶活性的大小。 需自备的仪器和用品: 可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰、蒸馏水 |
测定步骤:
1、 酶标仪预热30min以上,调节波长至450nm。
2、 试剂三的稀释:将试剂三用蒸馏水稀释50倍,用多少配多少。(试剂三和蒸馏水1:49稀释。
3、 工作液配制:在试剂一加入100μl试剂二,充分混匀。配好的试剂4℃避光可保存一周。(若一次性测定样本较少,可按照实际用量将试剂一和试剂二按照20ml:0.1ml的比例混匀配制)
4、 将一瓶试剂四用5ml蒸馏水溶解(溶解后一周内用完)。
5、 样本测定(在96孔板中依次加入下列试剂)充分混匀,室温静置30min后,450nm处测定各管吸光值A。
注意事项:
待测样品-70℃可保存1个月。需注意反复冻融会导致SOD部分失活。
一个试剂盒如果不能在3次内使用完毕,其中的WST-8需要在使用时适当分装,以避免反复冻融导致的检测效果下降。
标准品稀释时所用的稀释液应尽量与样品一致。样品用试剂盒提供的SOD样品制备液制备时,标准品也宜使用SOD样品制备液进行稀释;当样品为血液等无需处理的样品时,宜使用试剂盒提供的SOD检测缓冲液稀释标准品。
抗氧化物会对本试剂盒的检测产生干扰,例如0.1mM ascorbic acid,5mM GSH都会使测定出来的吸光度显著升高。此时尽管样品没有颜色,如果设置了使用说明中的空白对照3,就可以消除样品中的抗氧化物的干扰。
实验方法学:
一、肝素的配制:
市售肝素冻干粉140单位/mg,1克瓶装,每瓶140,000单位,称取0.1克肝素冻干粉,加生理盐水5ml,配成2800单位/ml。取50~100μl湿润管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不会凝固。老鼠血易凝固,所以最好更浓一些。可以取0.1克肝素冻干粉,加3ml生理盐水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制备:取0.1克肝素冻干粉,加2.5ml生理盐水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,湿润管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),横向转动,每隔5~10分钟转动一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液样本的收集:
全血根据收集的条件,分成不抗凝和抗凝两种。同时,不抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血清;抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血浆。
1、不抗凝收集血清:将收集好的全血,静置1~2小时,直接低速离心分离出血清待用或保存。
2、抗凝收集血浆: 收集抗凝全血,轻轻颠倒充分抗凝后,可直接低速离心分离血浆(也可静置半小时左右再低速离心分离血浆)待用或保存。根据不同抗凝剂的性能特征,选择合适的抗凝剂。实验室常用的抗凝剂有肝素的各种盐。
选择抗凝的注意点:
①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致;
②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;
③、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.4~0.5ml血浆);
④、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后
肽α1抗体膜醭毕赤酵母PA317(小鼠成纤维)
金属蛋白酶组织抑制因子-4抗体松口蘑Li-7(人肝癌)
金属蛋白酶组织抑制因子-1抗体(N端)少根根霉HO-8910(人卵巢癌)
金属蛋白酶组织抑制因子-2抗体歧异假丝酵母HCCC-9810(人肝内胆管癌)
甲状腺素T4抗体香菇F9(小鼠畸胎瘤)
TIGAR蛋白抗体粘金黄杆菌LM/TK(小鼠胸腺激酶缺陷)
CD90抗体金菌Hacat(人永生化角质形成)
线粒体DNA拓普西异构酶Ⅰ抗体节杆菌WB-F344(大鼠肝上皮样干)
突触融合蛋白结合蛋白5抗体片球菌属NRK(大鼠肾)
UNC80蛋白抗体小孢盘多毛孢KLE(人内膜癌)
四分子交联体4抗体(四旋蛋白)枯草芽孢杆菌OS-RC-2(人肾癌)
转录因子Tbx18抗体中国考克娃酵母Lncap clone FGC(人前列腺癌)
干燥综合征相关蛋白2抗体黄曲霉HCT-8(人盲肠腺癌)
甲状腺激素受体相互作用蛋白4抗体芽胞杆菌EAC(小鼠艾氏腹水癌)
β-taxilin蛋白抗体天白链霉菌HCT-15(人结肠癌)
NADH氧化酶(NOX)测试盒微量法CCAAT增强子结合蛋白γ(C/EBPγ)试剂盒 Anti-CKAP5 Antibody肿瘤坏死因子受体相关蛋白2
周期素依赖性激酶4(CDK4)试剂盒 Anti-CKB Antibody蛋白酶调解因子7
热休克蛋白20(HSPβ6/HSP-20)试剂盒 Anti-Clathrin heavy chain/CLTC Antibody磷酸化增殖核抗原
血管紧张素II受体1(ANGⅡR1-Ab)试剂盒 Anti-CKM Antibody磷酸化腺苷单磷酸活化蛋白激酶β1
Nesfatin 1蛋白 (NES1)试剂盒 Anti-Claudin 1/CLDN1 Antibody酮酸脱氢酶E1β亚单位
ras同源物基因家族成员b(RHOB)试剂盒Anti-Claudin 5/CLDN5 Antibody磷酸化酶β
泛素羧基端酯酶L1(UCHL1)试剂盒Anti-Claudin 3/CLDN3 Antibody胰