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特别提醒:本产品仅供科研研究使用,不得用于人体临床直接检测。
产品名称 | 检测方法 | 规格 | 货号 |
转氢酶2测试盒微量法 | 微量法 | 100管/96样 | BJ-01611137-1 |
商品介绍:
测定意义:TH位于线粒体的内膜上,又称为线粒体复合体六,催化NADH+NADP+和NAD++NADPH相互转化,调节线粒体NAD(H)和NADP(H)平衡。把逆向反应称为TH-2,催化NADPH和NAD+生成NADP+和NADH。测定原理:NADH和NADPH均在340nm有特征吸收,因此TH催化的转氢反应不能导致340nm吸光度发生变化。用人工合成底物3-乙酰吡啶腺嘌呤二核苷酸(APAD+)替代NAD+,TH-2催化APAD+还原生成APADH,APADH在375nm有特征光吸收,测定375nm光吸收的增加速率,来计算TH-2活性。需自备的仪器和用品:可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。 |
优点如下:
1、快速简便:全程约50分钟,可测100例左右样本。
2、取样量微:本法取手指或耳垂等末梢血20ul~50ul即可测红细胞中的SOD,只需2ml静脉血可测白细胞中的SOD及血小板中SOD,只需50mg左右组织就可测组织匀浆、胞浆中的SOD,0.2g组织可测线粒体及微粒体中的SOD。
3、灵敏度高:IC50=0.05g/ml,是邻苯三酚法的18倍。
4、稳定性好:试剂盒2~8℃存放6个月有效。
5、再现性好:变异系数CV=1.7%。
6、回收试验: X =103.3%。
7、受外界影响因素小:干扰因素少,重复性强。
8、测试面广:可测动物血液、组织、各种体液、灌流液等、各种培养细胞、细菌、植物组织、各种水产以及化妆品、保健品等,效果均佳。
测定步骤:
1、 酶标仪预热30min以上,调节波长至450nm。
2、 试剂三的稀释:将试剂三用蒸馏水稀释50倍,用多少配多少。(试剂三和蒸馏水1:49稀释。
3、 工作液配制:在试剂一加入100μl试剂二,充分混匀。配好的试剂4℃避光可保存一周。(若一次性测定样本较少,可按照实际用量将试剂一和试剂二按照20ml:0.1ml的比例混匀配制)
4、 将一瓶试剂四用5ml蒸馏水溶解(溶解后一周内用完)。
5、 样本测定(在96孔板中依次加入下列试剂)充分混匀,室温静置30min后,450nm处测定各管吸光值A。
注意事项:
待测样品-70℃可保存1个月。需注意反复冻融会导致SOD部分失活。
一个试剂盒如果不能在3次内使用完毕,其中的WST-8需要在使用时适当分装,以避免反复冻融导致的检测效果下降。
标准品稀释时所用的稀释液应尽量与样品一致。样品用试剂盒提供的SOD样品制备液制备时,标准品也宜使用SOD样品制备液进行稀释;当样品为血液等无需处理的样品时,宜使用试剂盒提供的SOD检测缓冲液稀释标准品。
抗氧化物会对本试剂盒的检测产生干扰,例如0.1mM ascorbic acid,5mM GSH都会使测定出来的吸光度显著升高。此时尽管样品没有颜色,如果设置了使用说明中的空白对照3,就可以消除样品中的抗氧化物的干扰。
双皮质su抗原地星猴组织蛋白meiD(CTSD)elisa定量检测试剂盒
损伤DNA结合蛋白2抗原盐沼盐杆菌猴组织因子(TF)elisa定量检测试剂盒
防御suβ1抗原根杆菌属猴G蛋白β1(GNβ1)elisa定量检测试剂盒
防御suβ1抗原(人)樟疫霉*猪乳酸脱氢酶B(LDHB)elisa定量检测试剂盒
防御suβ2抗原(小鼠)酿酒酵母猪过氧化还原酶5(PRDX5)elisa定量检测试剂盒
防御suβ2抗原(大鼠)pIB139猪丙酮酸激酶M2型同工酶(PKM2)elisa定量检测试剂盒
凋亡相关蛋白激酶1抗原龟裂链霉菌猴GATA结合蛋白2(GATA2)elisa定量检测试剂盒
鸭甲型肝炎A病抗原粗糙拟迷孔菌猴尿su酶相关蛋白C(UreC)elisa定量检测试剂盒
结蛋白抗原大囊接霉猴胸腺基质淋巴生成su(TSLP)elisa定量检测试剂盒
抑癌蛋白DKK1抗原草菇猴抗白蛋白抗体(AAA)elisa定量检测试剂盒
DMBT1抑癌基因抗原大豆慢生根瘤菌猪血小板亲和蛋白2(PKP2)elisa定量检测试剂盒
DNA依赖蛋白激酶催化亚基多肽抗原鸭疫里氏杆菌猪白介su16(IL-16)elisa定量检测试剂盒
多能发育相关基因2抗原链状双歧杆菌猴血管紧张suII受体2(ANGⅡR2)elisa定量检测试剂盒
死亡受体4抗原略紫链霉菌猪GATA结合蛋白4(GATA4)elisa定量检测试剂盒
肿瘤调亡su/死亡受体5抗原地衣生考克娃酵母猪肌联蛋白抗体(TTN)elisa定量检测试剂盒
转氢酶2测试盒微量法周期su依赖性激酶抑制因子3(CDKN3)试剂盒 Anti-LDHA Antibody(PB1129)同源蛋白UNCX
血管紧张su原(AGT)试剂盒 Anti-LDHB Antibody(PB1130)UL16结合蛋白3
骨形成蛋白6(BMP-6)试剂盒 Anti-LEP Antibody去泛su化酶22
神经肽Y受体Y2(NPYR2)试剂盒Anti-LEP AntibodyRNA聚合酶I
泛su羧基端酯酶L1(UCHL1)试剂盒Anti-LDLR Antibody尿酸盐重吸收转运子1
肌营养不良蛋白关联糖蛋白1(DAG1)试剂盒 Anti-LEP Antibody囊泡转运蛋白Use1
凝集su样氧化低密度脂蛋白受体1(LOX-1)试剂盒Anti-LEP Antibody上游结合蛋白1
实验方法学:
一、肝素的配制:
市售肝素冻干粉140单位/mg,1克瓶装,每瓶140,000单位,称取0.1克肝素冻干粉,加生理盐水5ml,配成2800单位/ml。取50~100μl湿润管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不会凝固。老鼠血易凝固,所以最好更浓一些。可以取0.1克肝素冻干粉,加3ml生理盐水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制备:取0.1克肝素冻干粉,加2.5ml生理盐水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,湿润管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),横向转动,每隔5~10分钟转动一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液样本的收集:
全血根据收集的条件,分成不抗凝和抗凝两种。同时,不抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血清;抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血浆。
1、不抗凝收集血清:将收集好的全血,静置1~2小时,直接低速离心分离出血清待用或保存。
2、抗凝收集血浆: 收集抗凝全血,轻轻颠倒充分抗凝后,可直接低速离心分离血浆(也可静置半小时左右再低速离心分离血浆)待用或保存。根据不同抗凝剂的性能特征,选择合适的抗凝剂。实验室常用的抗凝剂有肝素的各种盐。
选择抗凝的注意点:
①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致;
②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;
③、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.4~0.5ml血浆);
④、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后